The 3T3-L1 cell line is a well-established and commonly used in vitro model to assess adipocyte differentiation. Over the course of several days, confluent 3T3-L1 cells can be converted to adipocytes in the presence of an adipogenic cocktail. In this study, the effects of chitosan oligosaccharides (CO) on adipocyte differentiation of 3T3-L1 cells were studied. The CO significantly decreased lipid accumulation, a marker of adipogenesis, in a dose-dependent manner. The low molecular mass CO (1-3 kDa) were the most effective at inhibiting adipocyte differentiation. Moreover, mRNA expression levels of both CCAAT/enhancer-binding protein (C/EBP) ${\alpha}$ and peroxisome proliferator-activated receptor (PPAR) ${\gamma}$, the key adipogenic transcription factors, were markedly decreased by CO treatments. CO also significantly down regulated adipogenic marker proteins such as leptin, adiponectin, and resistin. Our results suggest a role for CO as antiobesity agents by inhibiting adipocyte differentiation mediated through the down regulated expression of adipogenic transcription factors and other specific genes.
Sang-Eun Nam;Young-Joo Yun;Jae-Sung Rhee;Hyoung Sook Park
Journal of Marine Life Science
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v.8
no.2
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pp.186-189
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2023
Uncoupling protein 1 (UCP1) is a unique mitochondrial membranous protein expressed in brown adipose tissue (BAT) in mammals. While its expression in response to cold temperatures and adipogenic inducers is well-characterized in mammals and human infants, the molecular characterization and expression of UCP1 in fish remain unexplored. To address this gap, we analyzed UCP1 expression in response to adipogenic inducers in a fish cell line, rainbow trout gonadal cells (RTG-2), and compared it with UCP1 expression in three mammalian preadipocytes, 3T3-L1, T37i, and WT1 exposed to the Peroxisome proliferator-activated receptor gamma (PPARγ) agonists, rosiglitazone (Rosi). In mammalian preadipocytes, UCP1 protein was highly expressed by Rosi, with an induction of adipogenesis observed in a time-dependent manner. This suggests that UCP1 plays a significant role in adipogenesis in mammals. However, RTG-2 cells showed no response to adipogenic inducers and exhibited only marginal expressions of UCP1. These results imply that RTG-2 cells may lack crucial responsive mechanisms to adipogenic signals or that the adipogenic response is regulated by other mechanisms. Further studies are needed to confirm these phenomena in fish preadipocytes when an appropriate cell line is established in future research.
In this study, we report antigenotoxicity and cytotoxicity of Korean Radish extract (RJ) and its seed protein (RSP) to non-tumoral 3T3 cell line. In the case of antigenotoxicity, each cell line was treated with $10{\mu}l\;of\;100{\mu}g/ml$ N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine(MNNG) before adding $10{\mu}l$of 10mg/ml RJ and 1mg/ml RSP to the cell. Both RJ and RS were shown $30\%\;and\;43\%$ of antigenotoxicity respectively. As a result of quantitative analysis for lactose dehydrogenase (LDH), no cytotoxic activity against 3T3 cells was detected when the cells were treated with various concentrations of RJ and RSP, RSP showed $85\%$ of antimicrobial activity against cosmetic sample (C1) assumed as contaminated by bacteria. RSP and RJ showed $79\%\;and\;76\%$ of antimicrobial activities repectively on another cosmetic sample (C4, contaminated by fungi) were treated with 10mg/ml RJ and 1 mg/ml RSP
Lee, In Yong;Lee, Joonhee;Park, Weon Seo;Nam, Eui-Cheol;Shin, Yung Oh;Choe, Jongseon
IMMUNE NETWORK
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v.1
no.1
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pp.26-31
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2001
Background : Follicular dendritic cells (FDCs) play key roles during T cell-dependent humoral immune responses by allowing antigen-specific B cells to survive, proliferate, and differentiate within the FDC networks of secondary follicles, i.e., germinal centers (GC). Methods: A novel monoclonal antibody, 3C8, was generated by immunizing with an FDC line HK, in order to understand the molecular signals involved in the FDC-B cell interactions in the microenvironment of the GC. Results: The 3C8 antibody did not bind to mononuclear cells, including T cells, B cells, and monocytes. Murine L929 and human skin fibroblasts exhibited no or little reactivity to 3C8. However, 3C8 specifically recognized HK cells by flowcytometry. Furthermore, the antigen recognized by 3C8 was restricted to the GC of the human tonsil. Dendritic networks of the GC were intensely stained by 3C8, but cells outside the GC were not. Conclusion: Our results suggest that the antigen 3C8 may play some unique role on FDCs during the GC reactions.
Lumbera, Wenchie Marie L.;Cruz, Joseph dela;Yang, Seung-Hak;Hwang, Seong Gu
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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v.29
no.3
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pp.419-427
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2016
There is a high association of heat shock on the alteration of energy and lipid metabolism. The alterations associated with thermal stress are composed of gene expression changes and adaptation through biochemical responses. Previous study showed that Angelica gigas Nakai (AGN) root extract promoted adipogenic differentiation in murine 3T3-L1 preadipocytes under the normal temperature condition. However, its effect in heat shocked 3T3-L1 cells has not been established. In this study, we investigated the effect of AGN root hot water extract in the adipogenic differentiation of murine 3T3-L1 preadipocytes following heat shock and its possible mechanism of action. Thermal stress procedure was executed within the same stage of preadipocyte confluence (G0) through incubation at $42^{\circ}C$ for one hour and then allowed to recover at normal incubation temperature of $37^{\circ}C$ for another hour before AGN treatment for both cell viability assay and Oil Red O. Cell viability assay showed that AGN was able to dose dependently (0 to $400{\mu}g/mL$) increase cell proliferation under normal incubation temperature and also was able to prevent cytotoxicity due to heat shock accompanied by cell proliferation. Confluent preadipocytes were subjected into heat shock procedure, recovery and then AGN treatment prior to stimulation with the differentiation solution. Heat shocked preadipocytes exhibited reduced differentiation as supported by decreased amount of lipid accumulation in Oil Red O staining and triglyceride measurement. However, those heat shocked preadipocytes that then were given AGN extract showed a dose dependent increase in lipid accumulation as shown by both evaluation procedures. In line with these results, real-time polymerase chain reaction (RT-PCR) and Western blot analysis showed that AGN increased adipogenic differentiation by upregulating heat shock protection related genes and proteins together with the adipogenic markers. These findings imply the potential of AGN in heat shock amelioration among 3T3-L1 preadipocytes through heat shock factor and proteins augmentation and enhanced adipogenic marker expression.
To investigate effect of water extract of PaIMuITang(PMT) on human cancer cell-lines and immunocytes, this research estimated proliferation of A431 cell line, KHOS-NP cell line, mouse thymocytes and mouse splenocytes, Nitric Oxide(NO) from macrophage, apoptosis and subpopulation of the mouse thymocytes. The results were obtained as follows; 1. PMT inhibited the. proliferation of A431 cell line, but it is not significant. 2. PMT inhibited the proliferation of KHOS-NP cell line, but it is not significant. 3. PMT stimulated the proliferation of mouse thymocytes, being compared Con A non-treated group. 4. PMT stimulated the proliferation of mouse splenocytes, being compared LPS treated group. 5. PMT l00g/mQ inhibited the production of NO from macrophages in vitro, being compared NPS IFN treated group. 6. PMT inhibited the production of NO from macrophages in vivo, being compared LPS|IFN treated group. 7. PMT accelerated the induction of apoptosis of the mouse thymocytes. 8. In subpopulation PMT decreased $T_H$ of the mouse thymocytes, but increased T /dT s of the mouse thymocytes.
Objectives: These experimental studies were designed to investigate the effects of antler's extracts on the expression of leptin, IGF-l and IGF-1 receptor on cultured 3T3-L1 cells. Methods: A mouse adipoblast cell line, 3T3-L1, was cultured with or without a differentiation medium containing Isobutylmethylxanthin, Dexametasone and Insulin before adding extracts of antler of various concentratio(10, 50, ]00, 200${\mu}g/ml$). The expression of leptin and IGF-1 receptor was measured by western blot assay, and expression of IGF-1 was determined by F ACS analysis. Results and Conclusion: The 3T3-L1 cells' differentiation did not show a significant induction by extracts of antler. The expression of leptin was significantly decreased depend on antler's concentration. The expression of IGF-1 showed a slightly increase by extracts of antler, whereas that of IGF-receptor showed a tendency to increase. The total amount of intracellular triglyceride showed a tendency to diminish as the concentration of antler's extract increase.
The growth and synthetic activities of fibroblasts are regulated by cytokines and growth factors derived from activated inflammatory cells. Stimulatory effect of low level laser (LLL) radiation on wound healing seems to be in part due to direct stimulatory action on cell proliferation and synthetic activities of fibroblasts. Also indirect stimulatory effect on the fibroblast function through inflammatory or immune cells is another possible mechanism of biostimulatory action of LLL. This study was performed to determine the growth rate of human gingival fibroblasts obtained biopsy and culture, fibroblast cell line, and immune cell line by using $[^3H]-$ thymidine incorporation test. And gene expression pattern was also analyzed by using the DNA probe such as Hsp70, IL-1$\beta$, MIP-1$\alpha$ and actin cDNA. Proliferation rate of gingival fibroblast was increased by LLL irradiation, but no more effect was added by LPS or IL-1$\beta$ pretreatment Enhanced Hsp70 gene expression was found from gingival fibroblasts and fibroblast cell line COS by LLL irradiation., which was not more increased by LPS or IL-1$\beta$ pretreatment. LLL-irradiated promyelcytic cell line HL-60 and macrophage cell line RAW264.7 showed significant stimulatory effect of proliferation rate when compared with respective control. However there were no changes in growth rate of other immune cell tested in this study, such as B cell line WR19n.l and 230, helper T cell line Jurkat and Hut78, cytolytic T cell line CTLL-r8. By LLL-irradiation Hsp70 gene expression was increased in RAW246.7 and HL-60, not in CTLL-R8. And IL-1$\beta$ and MIP-1$\alpha$ gene expression were induced only from LLL-irradiated RAW264.7. These results led us to presume that LLL radiation may affect to the immune cells, especially to macrophage, through which it might promote wound healing process.
Kim, Kui-Jin;Lee, Ok-Hwan;Lee, Han-Chul;Kim, Young-Cheul;Lee, Boo-Yong
Food Science and Biotechnology
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v.16
no.2
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pp.212-217
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2007
Fucoidan (fucan sulfate) is a fucose-containing sulfated polysaccharide from brown algae such as Fucus vesiculosus, Ecklonia kurome, and Cladosiphon okamuranus. The aim of this study was to investigate the effect of fucoidan on the expression of diabetes-related genes in mouse cell line 3T3-L1. 3T3-L1 adipocytes were cultured for 48 hr with or without fucoidan (10, 100, and 500 ppm) on a 60 mm dish. Reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) was used for measurement of peroxisome proliferators activated receptor ${\gamma}\;(PPAR{\gamma})$, CCAAT/enhancer binding protein ${\alpha}\;(C/EBP{\gamma})$, and glucose transporter 4 (GLUT4) RT-PCR analysis revealed that expression level of GLUT4, $PPAR{\gamma}$, and $C/EBP{\alpha}$ mRNAs increased with fucoidan treatment from 10 to 500 ppm in a dose-dependent manner. Fucoidan appears to enhance insulin sensitivity by increasing the expression level of diabetes-related genes in 3T3-L1 adipocytes. Therefore, fucoidan is potentially useful as a natural therapeutic material for hyperglycemia in type II diabetes patients.
Purpose : To investigate the effects of irradiation on transforming growth factor ${\beta}_1$ (TGF-${\beta}_1$) mRNA expression and calcific nodule formation in MC3T3-E1 osteoblastic cell line. Materials and Methods : Cells were cultured in alpha-minimum essential medium ($\alpha$-MEM) supplemented with 10% fetal bovine serum and antibiotics. When the cells reached the level of 70-80% confluence, culture media were changed with $\alpha$-MEM supplemented with 10% FBS, 5 mM $\beta$-glycerol phosphate, and $50\;{\mu}g/mL$ ascorbic acid. Thereafter the cells were irradiated with a single dose of 2, 4, 6, 8 Gy at a dose rate of 1.5 Gy/min. The expression pattern of TGF-${\beta}_1$ mRNA, calcium content and calcific nodule formation were examined on day 3, 7, 14, 21, 28, respectively, after the irradiation. Results : The amount of TGF-${\beta}_1$ mRNA expression decreased significantly on day 7 after irradiation of 4, 6, 8 Gy. It also decreased on day 14 after irradiation of 6, 8 Gy. and decreased on day 21 after irradiation of 8 Gy. The amount of calcium deposition decreased significantly on day 7 after irradiation of 4, 8 Gy (P < 0.01) and showed a decreased tendency on day 14, 21 after irradiation of 4, 6, 8 Gy. The number of calcific nodules was decreased on day 7 after irradiation of 4, 8 Gy. Conclusion: Irradiation with a single dose of 4, 6, 8 Gy influences negatively the bone formation at the molecular level by affecting the TGF-${\beta}_1$ mRNA expression that was associated with proliferation and the production of extracellular matrix in MC3T3-E1 osteoblastic cell line.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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