Objectives : It is demonstrated that oxygen free radicals have cytotoxic effect on NIH3T3 fibroblast cells. Recently, many of herb extracts have an effect of antioxidant in oxygen free radical-induced cytotoxicity. But, the toxic mechanism of oxygen free radical is left unknown. The purpose of this study was to examine the cytotoxicity of hydrogen peroxide ($H_2O_2$) and antioxidant effect of Citri reticulatae pericarpium (CRP) on NIH3T3 fibroblasts. Methods : The cytotoxicy was measured by cell viability by XTT assay in NIH3T3 fibroblasts. XTT assay is regarded as a very sensitive screening method for the determination of the cell viability on various chemicals. Results : In this study, H2O2 decreased cell viability according to the dose- and time dependent manners after NIH3T3 fibroblasts were treated with various concentrations of H2O2 for 4 hours. And also, CRP showed the effect of antioxidant on $H_2O_2-induced $ cytotoxicity in cultured NIH3T3 fibroblasts. Conclusion : These results suggest that $H_2O_2$ has highly cytotoxic effect on cultured NIH3T3 fibroblasts by the decrease of cell viavility, and the herb extract such as CRP was showed the effect of antioxidant on $H_2O_2-induced$ cytotoxicity in these cultures.
녹차분말을 포함하는 차가버섯 조성물의 수용성 추출물에 의한 인체 위암 세포 AGS 및 대장암 세포 HCT-15, 그리고 마우스 정상세포 NIH3T3 fibroblast의 세포생육에 미치는 효과를 세포 수 측정방법과 MTT assay 방법으로 측정하였다. 차가버섯 조성물의 수용성 추출물은 인체 대장암 세포주 HCT-15와 위암 세포주 AGS의 생육을 억제하였다. 그러나 동일한 실험조건 하에서 마우스 정상 세포주 NIH3T3은 80% 이상의 생존율을 나타내었다. 본 연구의 결과로 차가버섯 조성물의 수용성 추출물은 정상세포에는 독성을 나타내지 않으면서 위암 및 대장암 세포에는 높은 생육억제 효과를 나타냄을 알 수 있었다.
We examined cell regeneration efficiency of brown marine algae living in Jeju coast for search of a novel therapeutic device with cutaneous wound healing materials. The five algae were collected and compared with epidermal growth factor (EGF) as a positive control in the assays of cell proliferation and cell migration of NIH3T3 fibroblast cells. Among the 80% methanol extracts of these brown algae, the two algal extracts from Ishige foliacea and Colpomenia bullosa showed the proliferative effects of the cells similar to the effect of EGF. Besides it was found that Colpomenia bullosa extract significantly enhanced cell migration of NIH3T3 cell. In the study, therefore, we confirmed that the Colpomenia bullosa extract improved proliferation of NIH3T3 cell and a potential candidate for cultaneous wound healing.
The studies were conducted to investigate the effect of Sinhyo-Taklee-San(STS), which is composed of Astragali Radix(AR), Lonicerae Flos(LF), Angelicae gigantis Radix(AGR) and Glycyrrhizae Radix(GR), on the proliferation of fibroblast cell(Balb/c 3T3). STS, GR and glycyrrhizin increased the proliferation of 3T3 cells. The 10% serum obtained from STS, AR, LF, AGR and GR treated mice also increased the proliferation of 3T3 cells markedly. GR, glycyrrhizin and glycyrrhetinic acid inhibited protein synthesis, but did not affect on DNA synthesis.
The purpose of this study were to determined the effect of laser irradiation on the fibroblast activity. Cultures of 3T3 fibroblasts were subjected to Helium Neon laser(632.8 nm) irradiation of various energy density. On one, two and three consecutive days the fibroblast monolayers wert irradiated for period from 0 to 32 minutes with 8 mW of average output power. The fibroblast activity was determined by the quantitative assay of MTT, SRB and NR after incubation of the fibroblasts for 24 hours. Results show that exposure duration from 2 min to 32 min could increase MTT at three consecutive days, whereas control and 1 min, one and two days irradiation had were not inclosed. The SRB and NR were inclosed at two and three consecutive days from 2 min to 32 min, whereas control and 1 min, and once radiation were not increased. These result demonstrate that energy density from 0.48 to 7.64 J/cm could increase cellular protein contents and fibroblast activity at more than twice irradiation of laser, whereas low energy density (less than 0.24 J/m) and once irradiation of laser had no effect. The results suggest that the beneficial effect of the He-Ne laser with adequate dose on fibroblast activity in vitro.
The cytotoxic and antitumor activity of Herba cratalariae sessiliflorae on cultured NIH 3T3 fibroblast and human oral epitheloid carcinoma cells were evaluated by 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazoliumbromide (MTT) colorimetric method. The light microscopic study was carried out to observe morphological changes of cultured mouse fibroblast and human oral epitheloid carcinoma cells (KB). These results were obtained as follows; Ethyl acetate, chloroform and hexane extracts showed a significant cytotoxicity in NIH 3T3 fibroblast, but the other extracts did not show. All extracts exhibited a significant antitumor activity in human oral epitheloid carcinoma cells, but ethanol extract did not show a antitumor activity. Hexane extract showed low cytotoxic effect, but exhibited the most antitumor activity. The MTT absorbance in NIH 3T3 fibroblast was significantly decreased by treatment with chloroform, ethyl acetate and hexane extracts respectively. Human oral epitheloid carcinoma cells was significantly decreasd by treatment with all extracts with the exception of ethanol extract. The difference in MTT absorbance in two cell Types was most remarkable when treated with water and hexane extracts. Cholroform and hexane extracts showed the strongest effect in growth inhibition of human oral epitheloid carcinoma cells. These results indicated that water extract possessed no cytotoxicity and a strong antitumor activity.
This study were carried out to investigate cytotoxicity of paraquat and bentazon that is scattering to farm products were essensial for human diet and compensatory effects of 3-methylcholanthrene (3-MC) in vitro and in vivo. In vitro, The 5.0$\times$$10^4$ cell/ml of NIH 3T3 fibroblast in each well of 24 multidish were cultured. After 24 hours, the cells were treated with solution of paraquat and bentazon (1, 25, 50, 100 pM respectively). After the NIH 3T3 fibroblast of all groups were cultured in same condition for 48 hours, Sulfohordamin B Protein (SRB) assay were performed to evaluate the cytotoxicity of cell organelles. Paraquat and bentazon $SRB_50$ were 1860.73 $\mu\textrm{M}$, 1913.38 $\mu$M respectively. In vivo, Sprague Dawley male rats divided into paraquat and bentazon only administered group and simultaneous application group of paraquat and bentazon and 3-MC. At 30 min. and 1, 3, 6, 12, 24, 48 and 96 hrs. interval after each treatment, the animals were sacrificed by decapitation and kidney were immediately removed, immersed in fixatives, and processed with routine method for light microscopic study. Paraffin sections were stained with H-E, PAM, and PAS. Under the light microscope, atrophic change of renal corpuscles were frequently observed from 3 hrs after paraquat and bentazon treatment. The increase of the mesangium was apparent from 12 hrs later after paraquat and bentazon treatment. Necrotic changes of the epithelium and loss of brush border of proximal tubules were most severe at 48 hrs after paraquat and bentazon treatment, respectively. In contrast there were no evidences of the toxic effects on renal tissues at 48hrs in paraquat and bentazon plus 3-MC treated groups.
Kim, Jihee;Chandra, Prakash;Yang, Jiyoon;Rhee, Seog Woo
Bulletin of the Korean Chemical Society
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제34권12호
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pp.3715-3721
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2013
In this study, the behavior of cells on the modified surface, and the correlation between the modified substrates and the response of cells is described. A close-packed layer of nano-sized silica beads was prepared on a coverslip, and the adhesion, proliferation, and migration of BALB/3T3 fibroblast cells on the silica layer was monitered. The 550 nm silica beads were synthesized by the hydrolysis and condensation reaction of tetraethylorthosilicate in basic solution. The amine groups were introduced onto the surfaces of silica particles by treatment with 3-aminopropyltrimethoxysilane. The close-packed layer of silica beads on the coverslip was obtained by the reaction of the amine-functionalized silica beads and the (3-triethoxysilyl)propylsuccinic anhydride treated coverslip. BALB/3T3 fibroblast cells were loaded on bare glass, APTMS coated glass, and silica bead coated glass with the same initial cell density, and the migration and proliferation of cells on the substrates was investigated. The cells were fixed and stained with antibodies in order to analyze the changes in the actin filaments and nuclei after culture on the different surfaces. The motility of cells on the silica bead coated glass was greater than that of the cells cultured on the control substrate. The growth rate of cells on the silica bead coated glass was slower than that of the control. Because the close-packed layer of silica beads gave an embossed surface, the adhesion of cells was very weak compared to the smooth surfaces. These results indicate that the adhesion of cells on the substrates is very important, and the actin filaments might play key roles in the migration and proliferation of cells. The nuclei of the cells were shrunk on the weakly adhered surfaces, and the S1 stage in which DNA is duplicated in the cell dividing processes might be retarded. As a result, the rate of proliferation of cells was decreased compared to the smooth surface of the control. In conclusion, the results described here are very important in the understanding of the interaction between implanted materials and biosystems.
연구배경: 세포성장은 세포증식과 세포죽음의 균형에 의해 이루어 진다. 세포성장에 관여하는 여러 growth factor증 IGF-I은 IGF-IR와 결합하여 세포증식을 유발하는 mitogen으로 알려져 있다. 또한 IGF-I에 결합하는 IGFBPs중에 IGFBP-3는 혈액내에 가장 많은 carrier protein으로, IGF-I과 결합하여 IGF-I의 세포증식 효과를 증가 혹은 억제시킨다. 방 법: 3T3 fibroblast 세포를 이용하여 IGF-I과 IGF-IR transcripts를 northern blot으로 확인하고, IGF-I에 의한 mitogenic effect를 MTT assay 및 $^3H$-thymidine incorporation test로 관찰하고, IGF-I의 receptor인 IGF-IR의 활성화를 보기 위해 intracellular $\beta$-subunit의 tyrosine kinase domain의 phosphorylation을 western blot으로 관찰하였다. 또한 IGFBP-3가 3T3 세포에서 mitogenic effect에 미치는 영향을 보기 위해 anti-IGFBP-3와 ${\alpha}IR_3$을 단독 및 병용투여하여 관찰하였다. 결 과: 3T3 세포는 IGF-I와 IGF-IR의 mRNA expression을 보였으며, IGF-I을 투여시 IGF-IR의 intracelluar cytoplasmic protein인 $\beta$-subunit의 tyrosine kinase domain을 phosphorylation시켜 활성화시키며, 5%, 1% serum-containing media에서 세포증식을 보였으나, serum-free media에서는 세포증식을 보이지 않았다. 또한 anti-IGFBP-3 투여와 ${\alpha}IR_3$과 anti-IGFBP-3를 병용투여시는 세포종식이 각각 2배이상 증가하였으나, ${\alpha}IR_3$을 4시간 전처치후 ${\alpha}IR_3$과 anti-IGFBP-3를 병용투여시는 anti-IGFBP-3에 의한 세포종식이 보이지 않은 것으로 보아 IGF -I/IGFBP-3 결합에서 분리되는 free IGF-I어l 의해 세포증식이 유도된 것으로 생각된다. 결 론: IGF-I은 IGF-IR를 phosphorylation시켜 mitogenic effect를 보이며, IGFBP-3는 IGF-I의 mitogenic effect를 억제하는 것으로 생각된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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