Objectives: The purpose of this study was to determine the toxic effects of sodium lauryl sulfate(SLS) in human keratinocyte HaCaT cells and mouse fibroblast NIH-3T3 cells. Methods: The effect of sodium lauryl sulfate(SLS) cell viability and proliferation were determined by WST-1 assay and changes shape of nucleus were evaluated by Hoechst staining under fluorescence microscopy. Additionally, observation of cell morphological changes under light microscopy. Results: SLS induced cytotoxicity and a marked apoptosis in both HaCaT and NIH-3T3 cell lines. With the result of the WST-1 assay, SLS induced the cytotoxicity of 0.005% and 0.0075%, 0.01% SLS for 24 h after HaCaT and NIH-3T3 cells in time and dose-dependent manner(p<0.005). SLS inhibited cell growth and caused apoptosis as evidenced by nuclear fragmentation and condensation. Thus, determination of the morphological changes to define apoptosis was visualized using inverted phase contrast microscopy. Conclusions: SLS had toxicity of the human keratinocyte cells and mouse fibroblast cells and this study will provide the basic data for the development of proper SLS concentration in dentifrice.
Objectives : The purpose of this study was to investigate inhibitory effect of Gagamtongsung-San(GTS) on the cancer. Methods : This study estimated the cytotoxicity of GTS about L1210 and NIH3T3. We used GTS extract distilled with water, n-Hexane, Ethyl acetate and Butanol. The cytotoxicitys of GTS about cancer cells and normal cells were tested using a colorimetric tetrazoliun assay(MTT assay). Results : The results of this study were obtained as follow ; l. Cytotoxicity of water extract of GTS in L1210 cell lines was significantly increased, compared with NIH3T3. 2. n-Hexane fraction of GTS had similar cytotoxicity between L1210 and NIH3T3, and that have similar $IC_{50}$ of water extract of GTS at 276 ${\mu}g/ml$ 3. Ethyl acetate fraction of GTS had low degree cytotoxicity both L1210 and NIH3T3 cell lines. 4. Butanol fraction of GTS had cytotoxicity between L1210 and NIH3T3. Significantly, Cytotoxicity of GTS in L1210 cell lines was significant increased. 5. $H_2O$ fraction of GTS had no cytotoxicity both L1210 and NIH3T3.
The current study was undertaken to determine the effects of the ethanol extracts of loquat (Eriobotrya japonica Lindl.) seeds, flesh or leaves on the differentiation of 3T3-L1 cells and male pig preadipocytes. The cell number was measured with the MTT assay after trypsin digestion. The cell differentiation was determined by measuring the glycerol-3-phosphate dehydrogenase (GPDH) activity and triglyceride(TG) content. No cytotoxicity was observed from the loquat flesh and leaf ethanol extracts at concentrations of 5, 10, 25, 50, 100 or $200{\mu}g/mL$ in 3T3-L1 cells and pig preadipocytes. However, the cell viability of neither cell line were affected by up $50{\mu}g/mL$ of loquat seed ethanol extract. Treatment with the loquat seed and leaf ethanol extracts significantly suppressed the terminal differentiation of both cell lines in a dose-dependent manner, as confirmed by the decrease in the glycerol-3-phosphate dehydrogenase(GPDH) activity and TG content. Treatment with the loquat seed and leaf ethanol extracts inhibited the GPDH activity and reduced the TG content of both cell types more effectively than that with the loquat flesh ethanol extract. The most potent anti-adipogenic effect was obtained in the case of the ethanol extract of loquat seeds.
Dysfunction of the virus-specific T cells is a cardinal feature in chronic persistent viral infections such as one caused by hepatitis C virus (HCV). In chronic HCV infection, virus-specific dysfunctional CD8 T cells often overexpress various inhibitory receptors. Programmed cell death 1 (PD-1) was the first among these inhibitory receptors that were identified to be overexpressed in functionally impaired T cells. The roles of other inhibitory receptors such as cytotoxic T lymphocyte-associated antigen-4 (CTLA-4) and T cell immunoglobulin and mucin domain-containing molecule 3 (Tim-3) have also been demonstrated in T-cell dysfunctions that occur in chronic HCV patients. Blocking these inhibitory receptors in vitro restores the functions of HCV-specific CD8 T cells and allows enhanced proliferation, cytolytic activity and cytokine production. Therefore, the blockade of the inhibitory receptors is considered as a novel strategy for the treatment of chronic HCV infection.
The maintenance of peripheral immune tolerance and prevention of chronic inflammation and autoimmune disease require $CD4^{+}CD25^{+}$ T cells (regulatory T cells). The transcription factor Foxp3 is essential for the development of functional, regulatory T cells, which plays a prominent role in self-tolerance. Retroviral vectors can confer high level of gene transfer and transgene expression in a variety of cell types. Here we observed that following retroviral vector-mediated gene transfer of Foxp3, transductional Foxp3 expression was increased in the liver, lung, brain, heart, muscle, spinal cord, kidney and spleen. One day after vector administration, high levels of transgene and gene expression were observed in liver and lung. At 2 days after injection, transductional Foxp3 expression level was increased in brain, heart, muscle and spinal cord, but kidney and spleen exhibited a consistent low level. This finding was inconsistent with the increase in both $CD4^{+}CD25^{+}$ T cell and $CD4^{+}Foxp3^{+}$ T cell frequencies observed in peripheral immune cells by fluorescence-activated cell-sorting (FACS) analysis. Retroviral vector-mediated gene transfer of Foxp3 did not lead to increased numbers of $CD4^{+}CD25^{+}$ T cell and $CD4^{+}Foxp3^{+}$ T cell. These results demonstrate the level and duration of transductional Foxp3 gene expression in various tissues. A better understanding of Foxp3 regulation can be useful in dissecting the cause of regulatory T cells dysfunction in several autoimmune diseases and raise the possibility of enhancing suppressive functions of regulatory T cells for therapeutic purposes.
발효 및 비발효 차가버섯 수용성 추출물이 정상 세포주 NIH3T3 mouse normal fibroblast cell 및 인체 종양 세포주 AGS human gastric cancer cell(위암), HCT-15 human colon cancer cell(대장암), Hep3B human hepatoma cancer cell(간암), MCF-7 human breast cancer cell(유방암), HeLa human cervical cancer cell(자궁경부암)에서 MTT(3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyl tetrazolium bromide) assay 방법에 의한 세포 증식 억제와 암세포 증식억제의 기전 연구의 일환으로 apoptosis가 일어날 때 나타나는 DNA fragmentation을 agarose gel electrophoresis 방법으로 검토하였다. 인체 종양 세포주의 생육저해 효과가 발효 차가버섯 추출물이 비발효 차가버섯 추출물보다 강한 것으로 나타났다. 그러나 동일한 실험조건하에서 마우스 정상 세포주 NIH3T3은 80% 이상의 생존율을 나타내어 정상 세포주에는 큰 영향을 미치지 않는 것으로 나타났다. 특히, 발효 및 비발효 차가버섯 추출물에서 본 실험에 사용한 세포주 중에서 대장암 세포주 HCT-15에 대해 가장 세포 증식 억제효과가 뛰어났으며, 이러한 효과는 첨가 농도 의존적 이였다. 발효 및 비발효 차가버섯 추출물에 의한 암세포 증식억제가 기전 연구로 apoptosis가 일어날 때 나타나는 DNA fragmentation을 세포로부터 genomic DNA를 분리하여 agarose gel electrophoresis 방법으로 조사한 결과, 정상세포인 NIH3T3 세포는 DNA fragmentation이 거의 일어나지 않아 세포 생존율 결과와 유사한 경향을 보였으나, 특히 대장암 세포주인 HCT-15에서는 발효 차가버섯뿐만 아니라 비발효 차가버섯 추출물에서도 DNA fragmentation이 많이 일어나는 것이 관찰되어 암세포 증식억제 효과가 높다는 결과를 뒷받침 해주고 있다.
본 실험은 사료급여 종류가 동절기 우유의 생산량 및 조성분에 미치는 영향을 규명하기 위하여, 1998년 10월 부터 1999년 3월까지 실시하였다. 실험구 처리는 볏짚구(볏짚 위주 조사료+농후사료: T1)를 대조구로 하여 옥수수 사일리지구(옥수수 사일리지 위주 + 농후사료:T2) 및 TMR구(완전혼합사료: T3)를 상호 비교하였으며 그 결과를 요약하면 다음과 같다. 1. 우유 생산량은 T2(31.9$\pm$3.2kg) > T3(29.6$\pm$3.8kg) > T1구(22.5$\pm$2.0 순으로 높게 나타났다 (P<0.05). 그리고 산차별 우유 생산량은 T2 및 T3구는 3산에서(P<0.01), T1구는 4산에서 높은 유량을 나타냈다. 2. 유지율은 T3구가 3.79$\pm$0.31%로 가장 높았던 반면 T1구는 2.64$\pm$0.20%(P<0.01)로 가장 낮은 함량을 보였으며, 산차별로는 2 산차가 높은 경향치를 보였다. 3. 단백질 함량은 사료종류에 따라 유의적인 차이는 없었지만 T1구(3.17%$\pm$3.56%)에 비하여 T2(3.25$\pm$0.05%) 및 T3구(3.29$\pm$0.10%)가 높은 경향을 나타났으며(P<0.05), 산차에 따라서는 뚜렷한 차이는 보이지 않았다. 4. 무지고형분 함량은 T3(8.74$\pm$0.18%)>T2(8.47$\pm$0.22%)>T1구(8.56$\pm$0.04%) 순으로 나타났으며, 총고형분 함량은 T3(12.51$\pm$0.57%)>T1(11.71$\pm$0.62%) > T2구(11.52$\pm$0.55%) 순으로 나타났다. 그러나 상호간 유의차는 없었다. 5. 체세포 수는 T1구가 39.6$\pm$4.6${\times}$$10^4$Cell/ml 로 가장 높은 수치를 보였던 반면 T2구는 28.7$\pm$4.4 ${\times}$$10^4$ Cell/ml로 가장 낮게 나타났다. 이상의 결과를 종합해 볼 때 볏짚구(T1)에 비하여 TMR(T3) 및 옥수수 사일리지(T3) 급여체계는 유량 증대 및 우유성분 함량을 높이는 데 매우 효율적인 방안으로 나타났다.
Taurine is the most abundant amino acid in many tissues and is found to be enhancing the bone tissue formation or inhibits the bone loss. Although it is reported that taurine reduces the alveolar bone loss through inhibiting the bone resorption, its functions of taurine and expression of taurine transporter (TauT) in bone have not been identified yet. The purpose of this study is to clarify the uptake mechanism of taurine in osteoblast using mouse osteoblast cell lines. In this study, mouse stromal ST2 cells and mouse osteoblast-like MC3T3-E1 cells as osteoblast cell lines were used. The activity of taurine uptake was assessed by measuring the uptake of [$^3H$]taurine in the presence or absence of inhibitors. TauT mRNA was detected in ST2 and MC3T3-E1 cells. [$^3H$]Taurine uptake by these cells was dependent on the presence of extracellular calcium ion. The [$^3H$]taurine uptake in ST2 cells treated with 4 mM calcium was increased by 1.7-fold of the control which was a significant change. In contrast, in $Ca^{++}$-free condition and L-type calcium channel blockers (CCBs), taurine transport to osteocyte was significantly inhibited. In oxidative stress conditions, [$^3H$]taurine uptake was decreased by TNF-$\alpha$ and $H_2O_2$. Under the hyperosmotic conditions, taurine uptake was increased, but inhibited by CCBs in hyperosmotic condition. These results suggest that, in mouse osteoblast cell lines, taurine uptake by TauT was increased by the presence of extracellular calcium, whereas decreased by CCBs and oxidative stresses, such as TNF-$\alpha$ and $H_2O_2$.
녹차분말을 포함하는 차가버섯 조성물의 수용성 추출물에 의한 인체 위암 세포 AGS 및 대장암 세포 HCT-15, 그리고 마우스 정상세포 NIH3T3 fibroblast의 세포생육에 미치는 효과를 세포 수 측정방법과 MTT assay 방법으로 측정하였다. 차가버섯 조성물의 수용성 추출물은 인체 대장암 세포주 HCT-15와 위암 세포주 AGS의 생육을 억제하였다. 그러나 동일한 실험조건 하에서 마우스 정상 세포주 NIH3T3은 80% 이상의 생존율을 나타내었다. 본 연구의 결과로 차가버섯 조성물의 수용성 추출물은 정상세포에는 독성을 나타내지 않으면서 위암 및 대장암 세포에는 높은 생육억제 효과를 나타냄을 알 수 있었다.
The studies were conducted to investigate the effect of Sinhyo-Taklee-San(STS), which is composed of Astragali Radix(AR), Lonicerae Flos(LF), Angelicae gigantis Radix(AGR) and Glycyrrhizae Radix(GR), on the proliferation of fibroblast cell(Balb/c 3T3). STS, GR and glycyrrhizin increased the proliferation of 3T3 cells. The 10% serum obtained from STS, AR, LF, AGR and GR treated mice also increased the proliferation of 3T3 cells markedly. GR, glycyrrhizin and glycyrrhetinic acid inhibited protein synthesis, but did not affect on DNA synthesis.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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