Purpose: The objective of this study was conducted to investigate the effects of rutin, buckwheat components on cell growth and anti-inflammation in adipocyte 3T3-L1 and human colon cancer cell SW-480. Methods: We cultured 3T3-L1 adipocyte and SW-480 colon cancer cell to confluence, at which time starvation was induced with SFM for 1 day. Cells were then cultured in medium containing 0, 25, 50, or $100{\mu}mol/mL$ of rutin 3T3-L1 or 0, 10, 20, or $40{\mu}mol/mL$ SW-480. Cell viability was measured using a cell viability kit. In addition, we examined the expression of mRNA related to inflammation. RT-PCR was used to quantity tumor necrosis factor ($TNF-{\alpha}$), interleukin-$1{\beta}$ ($IL-1{\beta}$), IL-6, inducible nitric oxide synthase (iNOS), and cyclooxygenase-2 (COX-2) mRNA levels. Results: Rutin significantly inhibited 3T3-L1 and SW-480 cell proliferation in a dose and time dependent manner. Rutin also significantly reduced the mRNA expression of $IL-1{\beta}$, IL-6 and $TNF-{\alpha}$ at the highest dose. In addition, rutin treatment caused a significant reduction in COX-2 and iNOS mRNA levels compared to the control group. Conclusion: Overall, our results suggest that rutin has the potential to reduce inflammation, and that these effects are greater during tissue-damaging inflammatory conditions.
Based on the traditional application of Carthamus tinctorious L. (CF) as a component of Korean medicinal decoctions, in the present study, we investigated in vitro an immunomodulatory activity of water extract of CF(WECF). Water extract of CF significantly increased the in vitro proliferative responses of spleen cells (SPC). However, addition of WECF during anti-CD3 activation resulted in a significant decrease in SPC proliferation. Flow cytometric analysis showed that WECF addition chanced T and B cell frequencies in anti-CD3-activated spleen cell populations. Using purified cells, it was revealed that WECF is mitogenic to B cells but rather inhibitory to T cell Proliferation. Upon anti-CD3 stimulation, high concentration (1 mg/ml) of WECF significantly inhibited T cell proliferation until day 2 of stimulation. At day 3, anti-CD3-activated cells exposed to WECF recovered their proliferation to the level comparable to control. Although B cell proliferation was also inhibited in proliferation at day 1, it recovered sooner and then was rather augmented by WECF at day 3. These data indicate that WECF down-regulates lymphocyte proliferation at early phase of activation but T cells are more vulnerable than B cells to WECF, However, CD4+ and CD8+ T cells did not differ in WECF-mediated immunotoxicity. Data of propidium iodide (PI) staining showed that WECF accelerates activated T cell, but not B cell, apoptosis and WECF concurrently inhibited cytokine production of activated T cells. Taken together, WECF exhibits B cell mitogenic activity and differential toxicity more pronounced to T cells, suggesting a possible in vivo application of WECF for specific control of T cells without alteration of B cell activity.
It is well reported that tumor cells can regulate host immune systems. To identify the detailed changes of immune cells between tumor bearing mice and normal mice, we evaluated the systemic immune cell phenotype of B16F10 tumor bearing mice in a time dependent manner. The lymphocytic population (CD4+ and CD8+ T cells) of tumor bearing mice significantly decreased compared to that of normal mice. We found that the Foxp3+CD25+ CD4 T cell decreased, but the Foxp3+$CD25^{high}$ CD4 T cell significantly increased. All subpopulations of CD8 T cells decreased, except the CD62L-CD44+ CD8 T cell subpopulation. The myeloid cell population (CD11b+ and Gr-1+ cells) of tumor bearing mice significantly increased. Specifically, Foxp3+$CD25^{high}$ CD4 T cell and CD11b+Gr-1+ cells significantly increased in early phase of tumor progression. These results are helpful to understand the change of the systemic immune cell subpopulation of tumor bearing mice in a time-dependent manner.
Objectives This study is to investigate how dose Ikhwang-San can be effective on SD rats which deteriorated immunity caused by methotrexate. Methods The test sample were dosed once a day for 14 days by gastric gavage at the beginning of dosage 1000, 500 and 250㎎/㎏/10㎖ from 2 days after last MTX-dosing, and the changes of the body and spleen weight, total number of blood leukocytes, total number of lymphocytes, the percentage of B-cell, T-cell, CD3+CD4+ T-cell, CD3+CD8+ T-cell and CD4+/CD8+ T-cell ratios in the blood and spleen were observed. Results The changes of the body and spleen weight, the total number of blood leukocytes, the total number of lymphocyte in the blood and spleen were significantly increased in IHS Extracts groups comparing with the control group. The percentage of B-cell, T-cell, CD3+CD4+ T-cell in the blood and spleen were significantly increase in IHS groups and comparing with the control group. The ratio of CD4+/CD8+ T-cell in blood and spleen was significantly increased in IHS Extracts groups comparing with the control group. Conclusions According to those results, Ikhwang-San has good immunostimulating effect on SD rats which had deteriorated immunity caused by methotrexate.
Objecgtive : The aim of present study was to investigate inhibition effect of Whakijogyung-Tang(WJT) on the tumor cell lines. This study estimated the cytotoxicity of WJT about viability of S-180 and NlH3T3. Methods : The cytotoxicity of WJT about viability of cells were tested using a colorimetric tetrazoliun assay(MTT assay) Results and Conclusion : 1. Water extract of WJT had $IC_{50}$ of 863 ${\mu}g/ml$ in S-180 cell lines, but cytotoxicity of NIH3T3 was not significant difference compare with S-180. 2. n-Hexane fraction of WJT had similar cytotoxicity between S-180 and NIH3T3, but that could not have $IC_{50}$ in S-180 cell lines. 3. Ethyl acetate fraction of WJT had low degree cytotoxicity both S-180 and NIH3T3 cell lines. 4. Significantly, Butanol fraction of WJT had differenct citotoxicity between S-180 and NIH3T3. 5. $H_2O_2$ fraction of WJT had no cytotoxicity both S-180 and NIH3T3.
악성종양의 발생과 진행에 면역 방어기능이 중요한 역할을 하리라는 가설은 모두가 공감하는 사실이다. 이중 T-lymphocyte와 Natural killer cell (이하 NK cell이라함)은 종양 면역학에 특히 중요한 임파구로 이런 임파구의 혈액분포양상은 면역방어기능을 짐작할 수 있는 간접적인 자료가 될 수 있다. 저자들은 치료전 두경부 악성종양환자에서 혈액을 채취하여 T-lymphocyte와NK cell의 분포양상을 검사하고, 방사선치료 환자에서는 NK cell activity를 측정하였기에 다음과 같은 결과를 보고하는 바이다. 1) 두경부 악성 종양 환자군에서 CD3+ cell은 감소하고 NK cell은 증가하며 CD4/CD8 비율은 변화가 없었다. 2) 병변이 진행되면서 CD3+ cell과 CD4+ cell은 감소하고 NK cell은 증가하였으며 CD4/CD8 비율의 변화는 없었다. 3) 방사선치료에 의해 CD3+ cell과 CD4+ cell, CD4/CD8 비율은 감소하였고, NK cell과CD8+cell은 증가하였다. 4) 방사선치료에 의한 CD4/CD8 비율의 감소와, CD8+ cell의 증가는 NK cell의 증가에 의한 것이라 추정되고, NK cell을 제외하면 CB4/CD8 비율의 변화는 없었다. 5) 방사선치료 환자에서 NK cell activity는 증가하였고, 이런 증가가 T-lymphocyte기능의 감소를 보상해 주고 있었다.
The aim of this study was to examine the cytotoxicity and potential inhibitory effects from four types of edible domestic brown seaweeds, Undaria pinnatifida (UP), Laminaria japonica (LJ), Sargassum fulvellum (SF), and Hizikia fusiforme (HF), on preadipocyte differentiation in 3T3-L1 cell line. Water and ethanol extracts from the four types of seaweeds were prepared and tested for cell viability in the 3T3-L1 cell line by using MTT assay. In addition, various doses of the water extract of seaweeds (WES) and ethanol extract of seaweeds (EES) were treated at the beginning of 3T3-L1 differentiation and continued until the cells were fully differentiated to adipocytes. Oil Red-O staining was performed to determine the potential cell differentiation inhibitory effects of the WES and EES by measuring the levels of lipid droplet accumulation in 3T3-L1 adipocytes. $PPAR{\gamma}$ mRNA expression levels were significantly reduced by WESs of UP, LJ, and HF as well as EESs of LJ and HF. As a result, we observed the superior cell differentiation inhibitory effects of WES compared to that of EES in a dose-dependent manner without any significant cytotoxicity in mouse adipocytes.
Objectives : To examine the effects of Gojineumja on white rats which deteriorated immunity caused by Methotrexate(MTX), first of all, MTX was fed to the rats once a day for 4 day. Methods : After the immune response of the rats are deteriorated, dried extracts of Gojineumja(GJE) mixed in water was fed to the white rats once a day for l4days. The next conclusion was made by examining the rates of B-cells and T-cells of the peripheral blood and the changes in rates of CD4+ T-cells and CD8+ T -cells of the blood sampled from the spleen and peripheral region. Especially the count of CD3+ CD4+ T-cells of the peripheral blood and the count of CD3+ CD4+ T-cells of the spleen the count of CD4+/ CD8+ T-cell of the peripheral blood and the spleen proved the significant effect of increasing immune responses statistically. Results :(1) The following are the summary of the results. (2) The percentage of B lymphocyte of peripheral blood was increased significantly in GJE group as compared with control group. (3) The percentage of CD3+ CD4+ T-cell of peripheral blood was increased significantly in GJE group as compared with control group. (4) The percentage of CD3+ CD8+ T-cell of peripheral blood was not different statistically. (5) The percentage of CD4+/ CD8+ T-cell of peripheral blood was increased significantly in GJE group as compared with control group. (6) The percentage of CD3+ CD4+ T-cell of spleen was increased significantly in GJE group as compared with control group. (7) The percentage of CD3+ CD8+ T-cell was not different statistically. (8) The percentage of CD4+ /CD8+ T-cell was not different statistically. Conclusions : Gojineumja has an effect of increasing immune responses on white rats with deteriorated immunity caused by MTX.
Objectives : It is demonstrated that oxygen free radicals have cytotoxic effect on NIH3T3 fibroblast cells. Recently, many of herb extracts have an effect of antioxidant in oxygen free radical-induced cytotoxicity. But, the toxic mechanism of oxygen free radical is left unknown. The purpose of this study was to examine the cytotoxicity of hydrogen peroxide ($H_2O_2$) and antioxidant effect of Citri reticulatae pericarpium (CRP) on NIH3T3 fibroblasts. Methods : The cytotoxicy was measured by cell viability by XTT assay in NIH3T3 fibroblasts. XTT assay is regarded as a very sensitive screening method for the determination of the cell viability on various chemicals. Results : In this study, H2O2 decreased cell viability according to the dose- and time dependent manners after NIH3T3 fibroblasts were treated with various concentrations of H2O2 for 4 hours. And also, CRP showed the effect of antioxidant on $H_2O_2-induced $ cytotoxicity in cultured NIH3T3 fibroblasts. Conclusion : These results suggest that $H_2O_2$ has highly cytotoxic effect on cultured NIH3T3 fibroblasts by the decrease of cell viavility, and the herb extract such as CRP was showed the effect of antioxidant on $H_2O_2-induced$ cytotoxicity in these cultures.
It has well studied that immune cells are strongly related to tumor progression and tumor suppression. To identify the difference of immune cell between tumor bearing mice and normal mice, we examined systemically the immune cell of CT26 tumor bearing mice on 21 days after tumor cell administration. As previously reported, CD4+ and CD8+ T cells population of tumor bearing mice significantly decreased 38% and 30% on day 21 compared to that of normal mice, respectively. All subpopulation of CD4 and CD8+ T cell significantly decreased, except CD49b+ T cell subpopulation. But, myeloid cell population ($CD11b^{high}$ and all Gr-1+ subpopulation) of tumor bearing mice significantly increased on day 21. Especially, all subpopulation of CD11b+Gr-1+ cell of tumor bearing mice significantly increased on day 21. Also, Foxp3+$CD25^{high}$ CD4 T cell (regulatory T cells) population significantly increased on day 21. These results suggest that tumor can induce the decline of T lymphocyte and the expansion of myeloid cells and regulatory T cells, and provide the basic information for the study of tumor immunology.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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