Callus and suspension cultures derived from leaf explants of Plumbago rosea were established on Murashige and Skoog's medium containing 1 mg/L IAA, 0.5 mg/L NAA and 0.3 mg/L BAP. Callus cultures were tested for their growth and accumulation of plumbagin, a naphthoquinone and was identified by $^1H$ NMR and electron ionization mass spectroscopy. While auxins (not 2,4-D) influenced growth and plumbagin accumulation, cytokinins did not influence them much. Increasing concentrations of IAA in presence of NAA and BAP increased plumbagin in suspensions only up to 1 mg/L. Growth of callus was optimum (8.3 g DCW/I) at a hormonal combination of 1.5 mg/L IAA, 0.5 mg/L NAA and 0.3 mg/L BAP, but high plumbagin accumulation (4.9 mg/g DCW) was recorded at 1.0 mg/L IAA plus 0.3 mg/L BAP. Since instability in growth and secondary metabolite accumulation was noticed, several cell lines/clumps of callus were screened for plumbagin accumulation by visual and analytical methods. Biomass and accumulation of plumbagin showed a negative correlation in several cell lines. But one cell line showed stability both in terms of biomass and plumbagin accumulation over a period of 6 months.
Objective : To compare and examine how adjustment of pH and electrolyte can affect the efficacy of cultivated wild ginseng distilled herbal acupuncture, we've administered pure cultivated wild ginseng distilled herbal acupuncture and pH and electrolyte adjusted cultivated wild ginseng distilled herbal acupuncture on A549 human lung cancer lines. Then mRNA and proteins which take parts in apoptosis were examined. Methods : Pure cultivated wild ginseng distilled herbal acupuncture treated group was set as the control group and pH and electrolyte adjusted cultivated wild ginseng distilled herbal acupuncture groups were administered on A549 human lung cancer lines. Cell toxicity was carefully examined and from the analysis of DNA fragmentation, RT-PCR, and Western blot, manifestation of mRNA and proteins which are associated with apoptosis were inspected. Results : The following results were obtained on apoptosis of A549 human lung cancer lines after administering pH and electrolyte adjusted cultivated wild ginseng distilled herbal acupuncture. 1. Measuring cell toxicity of lung cancer cells, higher cell toxicity was detected at pH and electrolyte adjusted groups and the results were concentration dependent. 2. Through DNA fragmentation, we were able to confirm cell destruction in all groups. 3. Experiment groups treated with cultivated wild ginseng distilled herbal acupuncture showed inhibition of Bcl-2 and COX-2 at mRNA and Protein level, whileas increase of Bax was shown. 4. Manifestation of p21, p53, Cyclin E, and Cyclin D1 were confirmed in all groups. 5. Extrication of Cytochrome C was detected at all groups, as well as increased activity of the enzyme caspase-3 and caspase-9, and PARP fragmentation were confirmed. Conclusions : From the above results, we can carefully deduce cell destruction of A549 human lung cancer lines were induced by Apoptosis. At the same concentration level, cell destruction efficacy was better with adjusted pH and electrolyte. Cultivated wild ginseng distilled herbal acupuncture also showed decrease of Bcl-2 and COX-2, as well as increase of Bax. Since cultivated wild ginseng distilled herbal acupuncture increases manifestation of p21, p53, Cyclin E, and Cyclin D1, it affects cellular cycle and through these phenomena, we can consider extrication of Cytochrome C, increase of caspase, and PARP fragmentation are the results.
Recombinant Chinese hamster ovary (rCHO) cell lines expressing a high level of human thrombopoietin (hTPO) or its analog, TPO33r, were obtained by transfecting expression vectors into dihydrofolate reductase-deficient (dhfr) CHO cells and subsequent gene amplification in media containing stepwise increments in methotrexate (MTX) level such as 20, 80, and 320 nM. The parental clones with a hTPO expression level $>0.40\;{\mu}g/ml$ (27 out of 1,200 clones) and the parental clones with a TPO33r expression level $>0.20\;{\mu}g/ml$ (36 out of 400 clones) were subjected to 20 nM MTX. The clones that displayed an increased expression level at 20 nM MTX were subjected to stepwise increasing levels of MTX such as 80 and 320 nM. When subjected to 320 nM MTX, most clones did not display an increased expression level, since the detrimental effect of gene amplification on growth reduction outweighed its beneficial effect of specific TPO productivity ($q_{TPO}$) enhancement at 320 nM MTX. Accordingly, the highest producer subclones ($1-434-80^{*}$ for hTPO and $2-3-80^{*}$ for TPO33r), whose $q_{TPO}$ was 2- to 3-fold higher than that of their parental clones selected at 80 nM MTX, were isolated by limiting dilution method and were established as rCHO cel1 lines. The $q_{TPO}$ of $1-434-80^{*}\;and\;2-3-80^{*}\;was\;5.89{\pm}074\;and\;1.02{\pm}0.23\;{\mu}g/10^6$ cells/day, respectively. Southern and Northern blot analyses showed that the enhanced $q_{TPO}$ of established rCHO cell lines resulted mainly from the increased TPO gene copy number and subsequent increased TPO mRNA level. The hTPO and TPO33r produced from the established rCHO cell lines were biologically active in vivo, as demonstrated by their ability to elevate platelet counts in treated mice.
Park, Young-Goo;Kim, Su-Jung;Kang, Young-Min;Jung, Hee-Young;D. Theertha Prasad;Kim, Sun-Won;Chung, Young-Gwan;Park, Myung-Suk
Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
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v.9
no.1
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pp.41-46
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2004
The influence of various culture conditions on growth and ginkgolides (GKA and GKB), and bilobalide formation in callus and suspension cultures of Ginkgo biloba were investigated. Callus induced from the leaf petioles exhibited distinct morphological and physiological responses. The cell biomass and ginkgolides content varied among the cell lines; brownish callus lines produced high levels of ginkgolides and bilobalide in spite of poor cell growth. Among the culture media used, MS medium showed significant effect on cell growth and ginkgolides production. Low concentration of sucrose (3%) improved cell growth, while higher sucrose levels (5 and 7%) improved ginkgolides production. Cultivation of callus cultures above 28$^{\circ}C$ dramatically reduced their growth rate; however the cell lines grown at 36$^{\circ}C$ showed increased levels of bilobalide content. A 2.5-L balloon type bubble bioreactor (BTBB) was successfully developed for the cell growth and ginkgolides production.
This study was carried out to evaluate cytotoxic effects of the roots of Sophora flavescens Ait. extracts on murine leukemia tumor cells lines $(P388D_1\;and\;L1210)$. Disruptions in cell organelles were determined by 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide (MTT) assay. The comparison of $IC_{50}$ values of the ethyl acetate of Sophora flavescens Ait. extract in leukemia cell lines showed that their susceptibility to these extracts decreased in the following order : Adriamycin>Fr.4>Fr.5>Fr.3>Fr.1>Fr.2 by the MTT assay. These results suggest that the fraction 4 of the ethyl acetate soluble extract of Sophora flavescens Ait. may be a valuable choice for the studies on the treatment of murine leukemia cell lines.
Journal of information and communication convergence engineering
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v.20
no.2
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pp.137-142
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2022
Monolithic three-dimensional (M3D) logics such as M3D-NAND, M3D-NOR, M3D-buffer, M3D 2×1 multiplexer, and M3D D flip-flop, consisting of modularized M3D inverters (M3D-INVs), have been proposed. In the previous M3D logic, each M3D logic had to be designed separately for a standard cell library. The proposed M3D logic is designed by placing modularized M3D-INVs and connecting interconnects such as metal lines or monolithic inter-tier-vias between M3D-INVs. The electrical characteristics of the previous and proposed M3D logics were simulated using the technology computer-aided design and Simulation Program with Integrated Circuit Emphasis with the extracted parameters of the previously developed LETI-UTSOI MOSFET model for n- and p-type MOSFETs and the extracted external capacitances. The area, propagation delay, falling/rising times, and dynamic power consumption of the proposed M3D logic are lower than those of previous versions. Despite the larger space and lower performance of the proposed M3D logic in comparison to the previous versions, it can be easily designed with a single modularized M3D-INV and without having to design all layouts of the logic gates separately.
An anticancer substance was prepared by ethanol precipitation of the hot water extract of culture mycelia of Conolus versicolor KFCC 30388. After 6 days of fermentation, the mycelia growth reached the peak and reducing sugar consumed almost all. HTCFA method has been employed for three human cancer cell lines, Hep-2(larynx cell), A-427 and Calu-3 (lung cell). Anticancer activities in A-427 and Calu-3 were 8.4 and 9.8% survival rate, respectively. The chemical analysis of the extract from the mycelia showed 42.2% of polysaccharide and 10.5% of protein. The polysaccharide consisted of five kinds of monosaccharides, L-glucose, D-glucose, galactose, mannose and xylose.
Background: In tumor cells, aberrant differentiation programs have been described. Several neuronal proteins have been found associated with morphological neuronal-glial changes in breast cancer (BCa). These neuronal proteins have been related to mechanisms that are involved in carcinogenesis; however, this regulation is not well understood. Microtubule-associated protein-tau (MAP-Tau) has been describing in BCa but not its variants. This finding could partly explain the neuronal-glial morphology of BCa cells. Our aim was to determine mRNA expression of MAP-tau variants 2, 4 and 6 in breast cancer cell lines. Materials and Methods: Cultured cell lines MCF-10A, MDA-MB-231, SKBR3 and T47D were observed under phase-contrast microscopy for neural morphology and analyzed for gene expression of MAP-Tau transcript variants 2, 4 and 6 by real-time PCR. Results: Regarding morphology like neural/glial cells, T47D line shown more cells with these features than MDA-MB-231 and SKBR. In another hand, we found much greater mRNA expression of MAP-Tau transcript variants 2, and to a lesser extent 4 and 6, in T47D cells than the other lines. In conclusion, regulation of MAP-Tau could bring about changes in cytoskeleton, cell morphology and motility; these findings cast further light on neuronal transdifferentiation in BCa.
Cuong, To Dao;Lim, Chae-Jin;Kim, Sang-Won;Park, Ji-Eun;Hung, Tran Manh;Min, Byung-Sun
Natural Product Sciences
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v.17
no.2
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pp.80-84
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2011
Five known compounds, cimigenol (1), 25-O-acetylcimigenol (2), cimigenol 3-O-${\beta}$-D-xylopyranoside (3), ferulic acid methyl ester (4), and visnagin (5), were isolated from Cimicifugae Rhizoma (Ranunculaceae). The chemical structures of these compounds were determined on the basis of spectroscopic analyses including 2D NMR. Compounds 1 - 5 were evaluated for their cytotoxic activity against the HL-60, MCF-7, and A549 cancer cell lines in in vitro. Among them, compounds 4 and 5 showed moderate inhibitory activity against HL-60 cancer cell lines with $IC_{50}$ values of 24.8 and 18.1 ${\mu}M$, respectively.
Design and synthesis of novel 4-phenyl-1-arylsulfonylimidazolones 3 and 4-phenyl-3-arylsulfonylimidazolones 4 and evaluation of their cytotoxic activity against eleven human cancer cell lines and two murine leukemia cell lines in vitro were performed. As a result, a series of 4-phenyl-1(N)-arylsulfonylimidazolones (3) has been found to be the potential anticancer agent. Compounds 3b, 3c, and 3d exhibit strong activity as indicated by their $IC_{50}$ values 0.39, 3.19, $0.31{\mu}g/mL$ against A549 and 0.80, 0.48, $0.0007{\mu}g/mL$against SK-Mel-2, respectively. These compounds also possess much more potent activity (10-1000 times) than LY186641 against eleven other cell lines.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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