동자개 난모세포의 성숙과 배란에 있어 스테로이드와 HCG(human chorionic gonadotropin)의 효과에 대한 실험이 in vitro에서 이루어졌으며, 난모세포들은 $17\alpha,\;20\alpha-dihydroxy4-pregnen-3-one\;(17\alpha\;20\alpha\;OHP),\;17\alpha-hydroxyprogesterone\;(17\alpha\;OHP),\;progesterone\;(P_4),\;estradiol-17{\alpha}E_2)$ 과 HCG가 첨가된 Leibovitz L15 배지에서 성숙되어졌다. 60시간 배양후에 난모세포의 성숙능력은 난핵포붕괴(germinal vesicle breakdown, GVBD) 비율에 의해 평가되었다. GVBD 비율은 $17\alpha\;20\alpha\;OHP,\;17\alpha\;OHP,\;P_4$ 그리고 HCG의 첨가에 의해 유의하게 (P<0.05) 증가하였으며, 그 중 $17\alpha\;20\alpha\;OHP$ HCG에서 가장 높은 GVBD 비율을 보였다. 난모세포들 $17\alpha\;20\alpha\;OHP,\;17\alpha\;OHP,\;P_4$가 $10\~1,000ng/ml$포함된 배지에서 16시간 배양한 결과, $17\alpha\;20\alpha\;OHP\;10\~100ng/m1(65\%)$의 GVBD 비율은 $17\alpha\;20\alpha\;OHP(40\%)$와 $P_4(35\%)$에서 보다 나은 효과를 보였다. GVBD유도에 대한 효과는 $17\alpha\;20\alpha\;OHP$에서 $10\~100\;ng/ml$배지, HCG를 첨가하여 60시간 배양한 배란유도 실험에서 $17\alpha\;20\alpha\;OHP\;10\~100ng/ml$에서, HCG는 $50\~500IU/ml$의 배지에서 배란율이 유의하게 증가하였다. 그러나 $17\alpha\;20\alpha\;OHP\;1,000ng/m1$와 HCG 5IU/ml의 배지에서는 대조구의 배란율과 차이를 보이지 않았다. 이러한 결과로 $E_2$를 제외한 스테로이드와 HCG는 동자개의 난모세포 성숙과 배란을 in vitro에서 유도할 수 있으며, $17\alpha\;20\alpha\;OHP$와 HCG는 다른 스테로이드에 비해 높은 율의 난모세포 성숙과 배란을 유도하였다.
농어의 난성숙과 배란유도를 위한 C하(21)-스테로이드와 HCG의 효능 비교실험이 in vitro에서 이루어졌다. 분리된 난모세포를 대상으로 17${\alpha}$-hydroxy, 20${\beta}$-dihydroprogesterone(17${\alpha}$20${\beta}$OHP), 17${\alpha}$-hydroxy, 20${\beta}$-dihydroprogesterone(17${\alpha}$20${\beta}$OHP : 5~100ng/ml)와 HCG(5~500IU/ml)를 사용하여 관찰한 난성숙 유도효과, 즉 GVM(germinal vesicle migration)과 GVBD(germinal vesicle breakdown)를 보면, 5ng/ml 농도의 17${\alpha}$20${\beta}$OHP와 17${\alpha}$20${\beta}$OHP를 제외한 모든 실험군에서의 반응은 대조군보다 효과가 있는 것으로 나타났으며, 특히 17${\alpha}$20${\beta}$OHP 50ng/ml 농도에서 가장 높은 성숙 유도효과를 보였다. GVBD 유도효과에 대한 17${\alpha}$20${\beta}$OHP(50ng/ml), HCG(50IU/ml) 그리고 이들 호르몬을 혼합처리한 17${\alpha}$20${\beta}$OHP+HCG에서는 혼합처리한 실험군이 가장 높은 반응을 보여 이들의 상호 보완적 작용을 관찰할 수 있었다. 난소조직을 대상으로 HCG와 17${\alpha}$20${\beta}$OHP를 사용하여 in vitro에서 농어의 배란유도효과를 관찰한 결과 사용한 모든 농도(17${\alpha}$20${\beta}$OHP : 1~1000ng/ml, HCG : 1~500IU/ml)에서 배란반응을 보였다. 특히 저농도 50ng/ml 또는 50IU/ml 이하로 처리하는 것이 더 효율적인 것으로 나타났다. 또한 HCG 처리가 17${\alpha}$20${\beta}$OHP보다 배란 반응에 더 민감하게 작용하는 것으로 생각된다.
목 적 : 미숙아에서는 선천 부신 과형성에 대한 선별검사의 위양성률이 높으나 이에 대한 추적관찰의 기준이 명확하지 않다. 이에 저자들은 소집단에서의 선별검사 결과를 통해 미숙아에서의 선천 부신 과형성에 대한 선별검사의 해석 방법 및 합리적인 추적관찰의 방법을 알아보고자 하였다. 방 법 : 2005년 1월부터 2007년 6월까지 서울대학교 병원 및 분당 서울대학교 병원에서 태어난 미숙아 중, 생후 7일 이내에 전혈에서의 17-OHP를 효소 면역측정법으로 검사한 427명을 대상으로 하였다. 이들에서 17-OHP 값과 재태 기간, 출생체중, 전신적 질환 및 출생 전에 투여 받은 덱사메타손과의 관계를 분석하였고, 17-OHP의 변화의 경향을 알아보았다. 결 과 : 대상 미숙아들의 17-OHP 선별검사의 값은 매우 다양하였다(범위 0.1-143.3 ng/mL). 17-OHP 선별검사 값은 재태 기간(r=-0.535, P<0.01), 출생체중(r=-0.435, P<0.01), 5분 Apgar 점수(r=-0.431, P<0.01)와 유의한 음의 상관관계가 있었다. 17-OHP 선별검사 값은 출생 후 신생아 호흡 곤란 증후군(P<0.05), 동맥관 개존증(P<0.01) 또는 기관지폐 형성 이상(P<0.01)이 있었던 군에서 유의하게 높았으며, 생후 1주 이내에 치료가 필요한 저혈압이 있었던 미숙아에서 유의하게 높았다(P<0.05). 17-OHP 선별검사 값은 선별검사 7일 이내에 산모가 덱사메타손 투여 받은 군에서 투여 받지 않은 군에 비해 유의하게 낮았다(P<0.05). 17-OHP 값이 안정범위까지 감소하는데 걸리는 시간의 정중값은 42일이었으며, 이 기간은 재태 기간과 유의한 음의 상관관계가 있었고(r=-0.541, P<0.01), 기관지폐 형성 이상이 있었던 경우에 유의하게 연장되었다(P<0.01) 전체 대상 중 추적 관찰 시 선천 부신 과형성으로 확진된 경우는 없었다. 결 론 : 미숙아에서의 17-OHP 선별검사 값은 그 편차가 매우 크며, 재태 기간이 어릴수록 높은 경향이 있고 출생 전 dexamenthasone 투여 및 출생 후 질환에 의해 영향을 받는다. 미숙아의 선별검사를 해석할 때에는 이를 고려해야 하며, 혈액 검사의 수치와 미숙아의 임상 양상을 종합하여 추적관찰의 방법을 결정해야 할 것으로 생각한다.
범가자미 난모세포의 최종성숙(GVBD=germinal vesicle breakdown) 유도를 위한 HCG (human chorionic gonadotropin)와 스테로이드 호르몬들의 효능 비교실험이 in vitro에서 이루어졌다. 실험에 사용한 스테로이드 호르몬, progestogens (progesterone, $17\alpha$-hydroxyprogesterone, $17\alpha$-hydroxy, $20\beta$-dihydroprogesterone)중에서는 $17\alpha$-hydroxy, $20\beta$-dihydroprogesterone ($17\alpha20{\beta}OHP$)이 매우 효과적으로 나타났으며, $17\alpha20{\beta}OHP$와 HCG와의 비교실험에서는 이들 모두 GVBD 유도에 효과적인 것으로 나타났다. 특히 $17\alpha20{\beta}OHP$는 저농도($10\~50$ ng/ml)에서도 효과적이며, HCG는 사용한 농도(50, 100, 500 IU/ml)사이에 유의한차를 보이지 않았다.
점농어의 난소성숙과 배란과정에서 생성되는 성 스테로이드 호르몬 특히, $C_{21}$-스테로이드를 분석하고자 전구물질 $^3H$-pregneolone와 $^3H$-$17\alpha$hydroxyprogesterone를 난소조직 배양초기에 첨가하여 24시간 배양 뒤 생성된 물질은 성숙기 난소 (난경 $700\sim800 \mu m$ )의 경우corticosteroids계의 호르몬과 $17\alpha20\beta OHP$가 관찰되었으나 $17\alpha20\beta OHP$만이 HPLC상에서 확인되었다 특히 배란중인 점농어에서는 $17\alpha20\beta OHP$, $17\alpha20\beta21P$그리고 corticosterone의 존재가 뚜렷하였다. 따라서 점농어에서는 난소의 성숙과 배란과정에 $17\alpha20\beta OHP$이 모두 관여하며, 배란에 이르면서 $17\alpha20\beta21P$의 출현이 뚜렷한 것으로 생각된다. corticosterone의 존재에 대해서는 이 물질이 점농 어의 배란과 관련이 있는지 또는 스트레스 조건에서 나타나는 순간적인 생성물인지 앞으로 더욱 상세한 분석방법으로 접근해야 할 부분이다.
To examine the production of steroids with potential oocyte maturation-inducing activity in the spotted flounder, Verasper variegatus, we have incubated post-vitellogenic oocytes (0.820.95mm in diameters) with radiolabeled pregnenolone and $17\alpha-hydroxyprogesterone$. The resulting metabolites were analyzed by thin layer chromatography (TLC) and high performance liquid chromatography (HPLC). The two main metabolites (progestogens) found in both incubations co-migrated with $17\alpha-hydroxy$, $20\alpha-dihydroprogesterone$$(17\alpha, 20\alpha OHP)$ and $17\alpha-hydroxy,\;$20\beta-dihydroprogesterone$ (17 a20{30HP). Additional chromatography by HPLC and TLC confirmed the presence of radioactive $17\alpha, 20\alpha OHP$ and a large amount of unknown metabolite. The present study did not reveal in vitro formation of $l7\alpha 20\beta OHP$. Although 1$l7\alpha 20\beta OHP$ was found in a small amount, the synthesis of this steroid suggests that it may play a role in regulating the oocyte maturation process in the spotted flounder.
Traceability establishment in chemical measurements is a like a linkage established through an unbroken chain from the measured results to the international system (SI) of units. The primary process for traceability establishment is the purity assignment of a target material to be measured. In this study, we studied the purity assignment of 17α-hydroxyprogesterone (17-OHP). The presence of 17-OHP is indicative of congenital adrenal hyperplasia (CAH) and it builds up due to the deficiency of 21-hydroxylase and 11β-hydroxylase enzyme in the human blood. The purity assignment of 17-OHP was performed by the mass balance method, in which the impurities are categorized into four classes: total related structural impurities, water, residual organic solvents, and nonvolatiles/inorganics. The total related structural impurities were characterized by HPLC-UV; water content was determined by Karl-Fisher coulometer; and the total residual solvents and nonvolatiles/inorganics were determined by TGA. The purity of 17-OHP from a commercial manufacturer was calculated as 993.30 mg/g, and the expanded uncertainty was 0.58 mg/g. The proposed method was validated by uncertainty evaluation and comparing with the actual value of purity.
Polycyclic aromatic hydrocarbons (PAHs) are well known for strong carcinogen. However, the human exposure analysis of PAHs is quite difficult and unreliable because of hard for estimation of actual expose dose. Then urinary 1-hydroxypyrene (1-OHP) has been a biological marker of exposure to PAHs. The purpose of this study was to investigate total amount from exposure to PAHs soused by indoor occupational exposure, and residence at Seoul metropolitan area and Kyeonggi province in Korea. Thirty-five housewives were included in this study from April 2003 through February 2004. Dietary habit and general characteristics such as age, type of building, existence of passive smoking, period of residence, fuel type for heating and ventilation type were obtained by self administered questionnaire. Urine samples were collected at morning and freeze quickly. Urinary creatinine was measured for converting into 24 hr urine. Concentration of the indoor PAHs was examined by NIOSH method number 5506. Urinary 1-OHP and PAHs were analysed by HPLC. Correlation coefficient between urinary 1-OHP levels and pyrene concentration of indoor air was 0.66 and statistically significant(P<0.01). The difference of urinary 1-OHP level due to dietary habits were not significant. Urinary 1-OHP level of Spring, Summer, Autumn, and Winter were $0.21{\pm}0.12,\;0.10{\pm}0.17,\;0.16{\pm}0.12,\;0.17{\pm}0.14{\mu}g/g$ cr, respectively. The arithmetic means of urinary 1-OHP for four season tee $0.16{\pm}0.14 {\mu}g/g$ cr. There was a trend that urinary 1-OHP level of residents who dwelling in apartment were higher compared with detached home, Comparison of 1-OHP level between heating by kerosene and LPG, Much higher gas heating type than kerosene type (P<0.05). This result implies that the urinary 1-OHP can be applied as the PAHs exposure indices.
The measurement of $17{\alpha}$-hydroxyprogesterone ($17{\alpha}$-OHP) in a dried blood spot on filter paper is an important for screening of congenital adrenal hyperplasia (CAH). Since high levels of $17{\alpha}$-OHP are frequently observed in premature infants without congenital adrenal hyperplasia, we evaluated cuts-off based on birth weight and performed validation. Birth weight and $17{\alpha}$-OHP concentration data of 292,204 newborn screening subjects in Greencross labopratories were analyzed. The cut-off values based on birth weight were newly evaluated and validated with the original data. The mean $17{\alpha}$-OHP concentration were 7.25 ng/mL in very low birth weight (VLBW) group, 4.02 ng/mL in low birth weight (LBW) group, 2.53 g/mL in normal birth weight (NBW) group, and 2.24 ng/mL in heavy birth weight (HBW) group. The cut-offs for CAH were decided as follows: 21.12 ng/mL for VLBW and LBW groups and 11.14 ng/mL for NBW and HBW groups. When applied new cut-offs for original data, positive rates in VLBW and LBW groups were decreased and positive rates in NBW and HBW groups were increased. The cut-offs based on birth weight should be used in the screening for CAH. We believe that our new cut-off reduce the false positive rate and false negative rate and our experience for cut-off set up and validation will be helpful for other laboratories doing newborn screening test.
경골어류의 난소 성숙 과정은 여포층에서 생성ㆍ분비되는 성 스테로이드 호르몬에 의해 조절된다. 성 스테로이드 호르몬 중에서도 C2l-스테로이드가 난소 성숙 과정에 중요한 역할을 하는 것으로 알려져 있으며, 특히 20$\alpha$와 20$\beta$-hydroxy group을 가지고 있는 스테로이드, 17 $\alpha$-hyoxy, 20 $\alpha$-dihydroprogesterone (17 $\alpha$ 20 $\alpha$ OHP)과 17$\alpha$-hyoxy, 20$\beta$-dihydroprogesterone (17$\alpha$20$\beta$OHP)가 성숙유도에 가장 효과적인 것으로 보고하고 있다 (Canario and Scott, 1989; 1990). (중략)
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[게시일 2004년 10월 1일]
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