• 제목/요약/키워드: 16S

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Reverse dot hybridization 방법과 16S rRNA gene(16S rDNA)을 이용한 식품에서 식중독균의 탐색 (Using Reverse Dot Hybridization Method and 16S rRNA Gene (16S rDNA) for Identifying the Food Poisoning Microorganism in Foods)

  • 김민성;신규철;이형구;한명수;민병례;최영길
    • 한국식품과학회지
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    • 제35권3호
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    • pp.470-474
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    • 2003
  • 식중독은 세균에 의한 발병이 대부분이다. 따라서 식품에서 식중독 원인균을 신속하게 탐색하게 식중독으로부터의 되면 피해를 줄일 수 있을 것이다. 고전적인 식중독 원인균 탐색은 증균, 선택적 배지를 이용한 isolation, 생화학적 특징을 활용하는 분석이 있으나 많은 시간이 소요되는 단점을 갖고 있었다. 본 연구는 16S rRNA gene(16S rDNA)로부터 얻은 DNA 염기 서열을 이용 식중독 원인균의 특이적 oligonucleotide probe을 제작 reverse dot blot hybridization과 PCR 방법을 이용하여 고전적인 방법보다 빠른 시간 내에 식품에서 원인균을 탐색 할 수 있었다. 우유를 인공적으로 본 연구에서 사용한 균주로 오염시킨 후 DNA를 추출하여 PCR 증폭산물과 oligonucleotide probe를 hybridization 시킨 결과 oligonucleotide probe를 hybridization 시킨 결과 oligonucleotide probe가 위치한 곳에서 발색 반응이 나타났다. 본 연구에서 본 연구를 통해 DNA microchip으로 활용 짧은 시간 내에 많은 종류의 식중독 원인균을 탐색 할 수 있는 가능성을 확인하였다.

발효중인 멸치액젓에서 분리한 단백질분해효소 생산 호염성 세균의 유전적 특성 (Isolation and Genetic Characterization of Protease-Producing Halophilic Bacteria from Fermenting Anchovy)

  • 이진호
    • 생명과학회지
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    • 제22권2호
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    • pp.167-176
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    • 2012
  • 발효가 진행중인 멸치액젓에서 단백질분해효소를 생산하는 3종의 호염성 세균을 분리하였다. 분리된 FAM 10, FAM 114, 그리고 FAM 115는 각각 소금농도가 2~4%, 10%, 6%에서 최적 세포성장이 관찰되었으며, 18~22% 소 금농도까지 생육이 가능했다. 단백질분해효소 생산을 위한 최적 소금농도는 FAM 10은 6%, FAM 114와 FAM 115는 10%로 나타났다. FAM 10의 단백질분해효소 활성은 10%까지 첨가하면 서서히 저하되며, 14% 소금농도에서는 효소활성이 없는 반면, FAM 114와 FAM 115의 경우, 14%까지 효소활성을 나타냈으며 18%에서는 활성을 관찰할 수 없었다. 이러한 결과로부터 분리된 3종의 미생물이 중간 정도의 호염성 세균임을 증명하였다. 16S rRNA 유전자와 16S-23S 유전자 사이 공간(IGS) 서열, 생화학적 실험, 그람염색을 이용하여 비교 분석한 결과, FAM 10, FAM 114, 그리고 FAM 115는 각각 Salinivibrio sp., Halobacillus sp., 그리고 Halobacillus sp.임을 동정하였다. Salinivibrio sp. FAM 10에는 191번째 서열부터 약간 다른 2가지 종류의 16S rDNA와 16S-23S IGS내에 tRNA 유전자가 없는 형태, 이소루이신/알라닌, 글루탐산/라이신/발린을 운반하는 tRNA 유전자들을 함유하는 4가지 종류의 다른 16S-23S IGS가 존재하였다. Hablobacillus sp. FAM 114와 FAM 115는 완전히 동일한 16S rRNA 유전자 서열을 가지고 있었으며, 여러 Halobacillus sp.와 99% 서열동일성을 보여주었다. IGS의 경우, tRNA 유전자가 없는 IGS와 이소루이신/알라닌을 운반하는 tRNA 유전자들을 함유하는 3가지 16S-23S IGS가 존재하였으며, Halobacillus aidingensis와 Halobacillus sp. JM-Hb의 IGS와 99% 서열동일성을 보여주었다.

A report of 11 unrecorded bacterial species in Korea isolated in 2017

  • Maeng, Soohyun;Kim, Ju-Young;Jang, Jun Hwee;Kang, Myung-Suk;Kim, Myung Kyum
    • Journal of Species Research
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    • 제7권2호
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    • pp.135-150
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    • 2018
  • Eleven bacterial strains 17SD2_15, 17Sr1_23, 17SD2_13, 17Sr1_31, 17gy_18, 16B15D, 16B02D, 16B04G, 16B01D, 17U4-2 and 17J28-10 assigned to the phylum Proteobacteria were isolated from soil samples collected from Seoul Women's University, in South Korea. The Belnapia species, strain 17SD2_15 was cocci-shaped and pink-colored. The Methylobacterium species, strain 17Sr1_23, 17SD2_13, 17Sr1_31, and 16B15D were short rod-shaped and pink-colored. The Microvirga species, strain 17gy_18, and 16B02D were short rod-shaped and pink-colored. The Oxalicibacterium species, strain 16B04G was short rod-shaped and pink-colored. The Sphingomonas species, strain 16B01D was short rod-shaped and yellow-colored. The Variovorax species, strain 17U4-2 was cocci-shaped and yellow-colored. The Paracoccus species, 17J28-10 was cocci-shaped and orange-colored. Phylogenetic analysis based on 16S rRNA gene sequence showed that strains 17SD2_15, 17Sr1_23, 17SD2_13, 17Sr1_31, 17gy_18, 16B15D, 16B02D, 16B04G, 16B01D, 17U4-2 and 17J28-10 were most closely related to Belnapia soli (with 99.9% similarity), Methylobacterium gregans (99.1%), Methylobacterium isbiliense (99.6%), Methylobacterium oxalidis (99.9%), Microvirga aerilata (98.7%), Methylobacterium aerolatum (99.0%), Microvirga vignae (100.0%), Noviherbaspirillum canariense (100.0%), Sphingomonas desiccabilis (100.0%), Variovorax humicola (99.6%), and Paracoccus acridae (99.1%), respectively. This is the first report of these eleven species in Korea.

Genetic Diversity and Molecular Phylogeny of Cyanobacteria from Sri Lanka Based on 16S rRNA Gene

  • Wanigatunge, R.P.;Magana-Arachchi, D.N.;Chandrasekharan, N.V.;Kulasooriya, S.A.
    • Environmental Engineering Research
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    • 제19권4호
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    • pp.317-329
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    • 2014
  • The diversity of cyanobacteria in Sri Lanka was studied in different water reservoirs, paddy fields, brackish water and tsunami affected areas using light microcopy, 16S rRNA sequences, followed by phylogenetic analysis. Based on light microscopy, 24 genera were identified from environmental samples belonging to the orders Chroococcales, Oscillatoriales, Pleurocapsales and Nostocales. In cultures, 33 genera were identified from all five cyanobacterial orders, including Stigonematales. Based on 16S rRNA gene sequences and their morphology, two isolates were identified up to species level, 72 to genus level, one isolate up to family and 11 up to order level. Twelve isolates couldn't be assigned to any taxonomic level. The results of 16S rRNA gene sequences along with the phylogenetic analysis indicated that some cyanobacterial isolates could be accommodated to genus or order level. The 16S rRNA sequence analysis data in this study confirmed that order Nostocales and order Pleurocapsales cyanobacteria are monophyletic while orders Chroococcales, Oscillatoriales and Stigonematales cyanobacteria are polyphyletic. Polyphasic approach including the combination of light microscopy, cultures and the analysis of 16S rRNA gene sequences provide a promising approach to ascertain the diversity of cyanobacteria in different habitats.

Molecular Systematics of the Tephritoidea (Insecta: Diptera): Phylogenetic Signal in 16S and 28S rDNAs for Inferring Relationships Among Families

  • Han, Ho-Yeon;Ro, Kyung-Eui;Choi, Deuk-Soo;Kim, Sam-Kyu
    • Animal cells and systems
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    • 제6권2호
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    • pp.145-151
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    • 2002
  • Phylogenetic signal present in the mitochondrial 16S ribosomal RNA gene (16S rDNA) and the nuclear large subunit ribosomal RNA gene (28S rDNA) was explored to assess their utility in resolving family level relationships of the superfamily Tephritoidea. These two genes were chosen because they appear to evolve at different rates, and might contribute to resolve both shallow and deeper phylogenetic branches within a highly diversified group. For the 16S rDNA data set, the number of aligned sites was 1,258 bp, but 1,204 bp were used for analysis after excluding sites of ambiguous alignment. Among these 1,204 sites, 662 sites were variable and 450 sites were informative for parsimony analysis. For the 28S rDNA data set, the number of aligned sites was 1,102 bp, but 1,000 bp were used for analysis after excluding sites of ambiguous alignment. Among these 1000 sites, 235 sites were variable and 95 sites were informative for parsimony analysis. Our analyses suggest that: (1) while 16S rDNA is useful for resolving more recent phylogenetic divergences, 28S rDNA can be used to define much deeper phylogenetic branches; (2) the combined analysis of the 16S and 28S rDNAs enhances the overall resolution without losing phylogenetic signal from either single gene analysis; and (3) additional genes that evolve at intermediate rates between the 16S and 28S rDNAs are needed to further resolve relationships among the tephritoid families.

활성슬러지로부터 분리된 Miniimons sp. S16 세균의 특성 (Characterization of Miniimonas sp. S16 isolated from activated sludge)

  • 고현우;김홍익;박수제
    • 미생물학회지
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    • 제55권3호
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    • pp.242-247
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    • 2019
  • 폐수 처리 설비에서 생물학적 요인은 유기물 분해 또는 제거에 필수적인 역할을 수행한다. 본 연구에서는, 폐수처리장의 미생물 기능적 역할을 이해하기 위해, 활성 슬러지 샘플로부터 박테리아 균주를 분리하고 그들의 특성 분석을 시도했다. S16 균주는 대한민국 대전광역시의 폐수처리장의 활성슬러지로 부터 분리되었다. 세포들은 그람음성, 비운동성, 통성 혐기성 그리고 막대모양이였다. S16 균주는 $15{\sim}40^{\circ}C$ (최적 $30^{\circ}C$), 0~9.0% (w/v) NaCl (최적 1.0~2.0%), pH 5.5~9.0 (최적 pH 7.0~7.5)에서 성장하였다. 분자계통학적 분석결과, S16은 Miniimonas 속의 고유종인 Miniimonas areae NBRC $106267^T$ (99.79%, 16S rRNA 유전자 염기서열 유사성)와 가장 밀접한 것으로 나타났다. 해양 미생물로 여겨지는 표준균주 NBRC $106267^T$의 분리 원은 바다 모래이지만 S16 균주는 육상 환경이다. 이는 서식지 전환에 대한 생태학적 의문을 제기할 수 있다. 따라서 비교 유전체 분석은 잠재적인 대사 특성 및 유전체 간소화를 밝히기 위한 가치있는 연구가 될 것이다.

40 Gb/s (16×2.5 Gb/s WDM 신호의 10,880 km 전송실험 (16×2.5 Gb/s WDM transmission over 10,880 km using forward error correction)

  • 정윤철;전상배;정환석;윤천주;박근주
    • 한국광학회지
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    • 제13권2호
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    • pp.113-116
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    • 2002
  • 본 논문은 국내에서는 처음으로 수행된 대양횡단거리의 포장거리 전송실험에 관한 것이다. 오류정정부호와 반복순환 루프 기법을 이용하여 40 Gb/s (16채널$\times$2.5 Gb/s) WDM 신호의 10,880 km 전송실험을 성공적으로 수행하였다. 이는 태평양을 충분히 횡단할 수 있는 거리이다. 10,880 km 전송 후에도 16개 모든 채널의 비트오류률은 $10^{-10}$ 이하로 측정되었다.

Uridylate kinase as a New Phylogenetic Molecule for Procaryotes

  • Lee, Dong-Geun;Lee, Jin-Ok;Lee, Jae-Hwa
    • 한국생물공학회:학술대회논문집
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    • 한국생물공학회 2003년도 생물공학의 동향(XIII)
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    • pp.810-814
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    • 2003
  • 원핵생물 (procaryote)의 분류에 16S rRNA 유전자가 많이 이용되어 있으나 제한된 해상력과 유전자의 수에 차이가 있는 등의 문제가 있어 이를 보완할 수 있는 새로운 생체분자를 찾고 그 분류 결과는 16S rRNA의 결과와 비교하였다. COG(clusters of orthologous of protein) 알고리즘으로 42종의 원핵생물 (procaryote)에서만 발견되는 transcription elongation factor (COG0195), bacterial DNA primase (COG0358) 그리고 uridylate kinase (COG0528)를 구하였다. 이중 유사도와 유전자수를 바탕으로 새로운 분류의 키로 uridylate kinase를 설정하여 분석한 결과 16S rRNA 유전자 결과와 유사점과 차이점을 보여, uridylate kinase를 이용한 분류가 16S rRNA 유전자를 이용한 분류의 문제점을 보완하여 원핵생물의 정확한 분류에 기여할 수 있을 것으로 사료되었다.

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16S/23S Intergenic Spacer Region as a Genetic Marker for Thiobacillus thiooxidans and T.ferrooxidans

  • Lee, Hye-Won;Choi, Won-Young;Cho, Kyung-Suk;Choi, Won-Ja
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제11권6호
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    • pp.1046-1054
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    • 2001
  • Bioleaching is the process in which insoluble metal sulfide is oxidized by specialized iron- and/or sulfur-oxidizing lithotrophic bacteria in acidic, metal-rich environments. Most of these processes are carried out by the genus Thiobacillus. Three novel Thiobacillus strains (Thiobacillus thiooxidans AZ11, Thiobacillus thiooxidans MET, and thiobacillus thiooxidans TAS) associated with bioleaching have been isolated from soil and sludge (Korean patent No. 1999-0073060 for T. thiooxidans AZ11, Korean patent No. 1999-0005798 for T. thiooxidans MET, and Korean patent No. 1999-0073059 for T. thiooxidans TAS). A partial sequence of 16S ribosomal RNA gene (16S rDNA) and the entire sequence of 16S/23S intergenic spacer region (ISR) were determined in the three above novel strains and in Thiobacillus ferrooxidans ATCC19859 as a reference strain. When phylogenetic analysis was performed based on G+C contents and sequence alignments, T. ferroxidans ATCC19859 was found to be closely related to previously registered T. ferrooxidans strains in a monophyletic manner, while the three novel T. thiooxidans strains were classified in a paraphyletic manner. Close examination on the base composition of 16S/23S ISR revealed that the 5\` part (nucleotide residues 21-200) was specific for the genus Thiobacillus. On the other end, the 3\` part (nucleotide residues 201-520) showed specificity in T. ferrooxidans strains, but not in T. thiooxidans strains. These results suggest that the proximal and distal halves of 16S/23S could be used as a genetic marker for the identification of the genus Thiobacillus and the species T. ferrooxidans, respectively.

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김치 서식처에서 Listeria monocytogenes를 억제하는 lactococci의 분리와 16S rDNA분석에 의한 동정 (Isolation of Lactococci Inhibiting Listeria monocytogenes from Kimchi Habitat and Its Identification by 16S rDNA Analysis)

  • 박은주;한홍의;민봉희
    • The Korean Journal of Ecology
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    • 제22권1호
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    • pp.45-50
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    • 1999
  • 김치 발효 초기에 bacteriocin 생성 유산균을 분리하고자 하였다. 분리 유산균은 형태, 배양 및 생리학적인 특징과 16S rDNA의 부분적인 염기서열로부터 Lactococcus lactis로 동정되었다. 분리균주가 생성한 bacteriocin은 Listeria monocytogenes, Staphylococcus aureus와 같은 그람 양성 병원성 세균과 몇몇 유산균에 대해 항균활성이 있었고, 그람음성균인 Yesinia에는 활성이 없었다. bacteriocin의 활성은 protease, protease ⅩⅣ, a-chymotrypsin과 pepsin에 대해서 활성이 소실되었으나, lipase, trypsin, lysozyme에 대해서는 활성이 유지되었다. bacteriocin의 활성은 pH 2∼11에서 안정적이며 l00℃에서 10분간 열처리시에도 변하지 않았다. 따라서 L. monocytogenes는 발효초기에 L. lactis에 의하여 억제될 수 있다.

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