• 제목/요약/키워드: -cyclodextrin

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Cyclodextrin분해효소의 정제 및 그 특성 (Purification and Some Properties of Cyclodextrin Hydrolase)

  • 김용휘;심규광;문영희
    • Applied Biological Chemistry
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    • 제33권1호
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    • pp.79-86
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    • 1990
  • Bacillus stearothermophilus KFCC 21203를 배양하여 cyclodextrin(CD)을 분해하는 효소를 분리, 정제하고 정제효소의 몇 가지 특성을 조사하였다. 배양액에서 얻은 조효소를 염석, DEAE-cellulose column chromatography, Ultro AcA 34 gel filtration등의 방법으로 15배 정제하였으며 회수율은 77.2%이었다. 정제효소의 specific activity는 12.30units/mg protein 이었고 분자량은 약 29,500정도였다. 이 효소의 작용최적 PH는 5.5, 작용최적온도는 $55^{\circ}C$였으며 $40^{\circ}C$이하의 온도와 pH $5.0{\sim}8.0$의 범위에서 안정하였고 ${\gamma}-CD$에 대한 Km치는 $3.78{\times}10^{-3}$ M이었다. 정제효소는 ${\beta}-CD$에 대한 활성이 매우 낮았고 ${\alpha}-CD$에는 거의 활성이 없었으나 ${\gamma}-CD$에는 매우 높은 활성을 나타내었으며, 이의 분해산물로는 주로 glucose 및 maltose 그리고 소량의 maltotriose였다. 또한 amylose, potato starch, corn starch, amylopectin 및 maltooligomer등에는 높은 활성을, 그리고 glycogen, dextrin에도 비교적 높은 활성을 나타내었고 분해산물로는 주로 glucose와 maltose였다.

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Synthesis of a Novel Anthraquinone Diamino-Bridged Bis(β-cyclodextrin) and Its Cooperative Binding toward Guest Molecules

  • Zhao, Yan;Yang, Zi Ming;Chi, Shao Ming;Gu, Juan;Yang, Yong Cun;Huang, Rong;Wang, Bang Jin;Zhu, Hong You
    • Bulletin of the Korean Chemical Society
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    • 제29권5호
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    • pp.953-958
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    • 2008
  • A novel anthraquinone diamino-bridged bis($\beta$ -cyclodextrin) 2 was synthesized. The inclusion complexation behaviors of the native $\beta$ -cyclodextrin 1 and the novel bis($\beta$ -cyclodextrin) 2 with guests, such as acridine red (AR), neutral red (NR), ammonium 8-anilino-1-naphthalenesulfonate (ANS), sodium 2-(p-toluidinyl) naphthalenesulfonate (TNS) and rhodamine B (RhB) were investigation by fluorescence, circular dichroism and 2D NMR spectroscopy. The spectral titrations were performed in phosphate buffer (pH 7.20) at 25 ${^{\circ}C}$ to give the complex stability constants (Ks) and Gibbs free energy changes (−${\Delta}G^0$) for the stoichiometric 1:1 inclusion complexation of host 1 and 2 with guests. The results indicated that the novel bis($\beta$ -cyclodextrin) 2 greatly enhanced the original binding affinity of the native $\beta$ -cyclodextrin 1. Typically, bis($\beta$ -cyclodextrin) 2 showed the highest binding constant towards ANS up to 34.8 times higher than that of 1. The 2D NMR spectra of bis($\beta$ -cyclodextrin) 2 with RhB and TNS were performed to confirm the binding mode. The increased binding affinity and molecular selectivity of guests by bis($\beta$ -cyclodextrin) 2 were discussed from the viewpoint of the size/shape-fit concept and multipoint recognition mechanism.

β-CD 또는 아다만탄이 결합된 루테늄(II)-터피리딘 착화합물의 제조와 초분자 조립 (Synthesis and Supramolecular Assembly of Ru(II)-Terpyridine Complexes linked with β-Cyclodextrin or Adamantyl Group)

  • 박대림;정용채;최경호;김형진
    • 대한화학회지
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    • 제51권6호
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    • pp.526-535
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    • 2007
  • 아다만탄 또는 β-cyclodextrin이 결합된 루테늄(II)-터피리딘 착화합물(8, 9, 11)을 합성하고 1H NMR, 13C NMR 및 질량분석스펙트럼으로 구조를 확인하였다. 아다만탄이 결합된 루테늄(II)-터피리딘 착화합물(8, 11) 은 물에 전혀 녹지 않으나, β-cyclodextrin 수용액에 혼합할 경우 β-cyclodextrin과의 초분자를 형성하여 물에 잘 녹아들어갔다. 비슷한 방법으로 수용액 중에서 루테늄(II)-터피리딘 착화합물(8, 11)을 각각 착화합물 9와 혼합 하였을 때, 착화합물(8, 11)의 아다만탄 부분이 루테늄 착화합물 9의 β-cyclodextrin 내부에 포접 됨으로써 안정 한 초분자를 형성하였다.

사이클로덱스트린과 전분을 이용한 coenzyme Q10 복합체의 특성 연구 (Structural and Solubility Characteristics of Coenzyme Q10 Complexes Including Cyclodextrin and Starch)

  • 이준경;이현주;임재각
    • 한국식품과학회지
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    • 제46권2호
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    • pp.180-188
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    • 2014
  • 본 실험에서는 coenzyme $Q_{10}$을 cyclodextrin, starch를 이용하여 각각 복합체를 형성하고 형성된 복합체의 용해도 및 구조적 특성을 확인하였다. Starch 복합체는 용해 온도가 증가할수록 복합체 및 복합체내의 coenzyme $Q_{10}$의 용해도가 유의적으로 증가하는데 비해 cyclodextrin 복합체는 $37^{\circ}C$에서 coenzyme $Q_{10}$의 최대 용해도를 보였으며 이후 $50^{\circ}C$에서는 강하게 aggreagation이 일어났고, $80^{\circ}C$에서는 약해진 결합에 의해 복합체가 깨짐으로써 coenzyme $Q_{10}$이 물 위에 뜨는 형상을 나타내었다. 두 복합체의 구조적 차이를 FT-IR, XRD, DSC를 통하여 확인한 결과 cyclodextrin 복합체는 coenzyme $Q_{10}$의 isoprenoid chain에 주로 포접이 되어 있는데 반해 starch 복합체는 coenzyme $Q_{10}$의 isoprenoid chain 뿐만 아니라 benzoquinone ring에도 포접되어 있는 것을 확인하였고, 또한 starch 복합체가 cyclodextrin 복합체에 비해 coenzyme $Q_{10}$ 무정형영역이 더 크게 증가되어 있는 것을 확인하였다. In vitro simulated digestion model을 통하여 각 소화기관 별 복합체의 방출 패턴을 확인 한 결과 두 복합체 모두 구강, 위장의 효소 및 조건에 비해 소장의 효소와 조건에서 유의적으로 크게 coenzyme $Q_{10}$의 방출이 확인되었다. 따라서 coenzyme $Q_{10}$은 cyclodextrin, starch와 포접되어 복합체를 형성함으로서 생체이용율의 향상을 기대할 수 있다.

Water-Activity Depressor가 Pullulanase의 역반응에 의한 Maltosyl-$\beta$-Cyclodextrin의 합성에 미치는 영향 (Effect of Water-Activity Depressor on the Enzymatic Synthesis of Maltosyl-$\beta$-Cyclodextrin through the Reverse Reaction of Pullulanase)

  • 이용현;한일근
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제20권4호
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    • pp.422-429
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    • 1992
  • Maltosy-$\beta$-cyclodextrin는 $\beta$-cyclodextrin에 maltose가 $\Alpha$-1,6 glycosidic bond로 결합된 분지환상결합체로서 pullulanase의 역반응(축합반응)을 이용하여 $\beta$-cyclodextrin과 maltose로부터 합성된다. Maltosyl-$\beta$-cycloextrin의 합성수율을 증가시키기 위하여 각종 water activity depressor인 각종 polyol, sugar 그리고 polyethylene glycol(PEG)등의 첨가의 영향을 검토하였다. 가장 적절한 water activity depressor는 PEG 6000로서, 첨가량 10%(w/w)의 경우 maltosyl-$\beta$-cyclodextrin 생성량과 합성수율은 크게 증가하여 3.02g/100ml 와 55.9%(w/w)로서, 첨가하지 않았을 경우보다 약 1.3배 증가하였다. Water activity는 PEG 6000을 20%(w/w) 첨가할 때 원래의 0.966에서 0.914로 감소하였으며, maltosyl-$\beta$-cyclodextrin 합성수율은 water activity에 반비례하여 증가하였다. Pullulanase의 역반응을 이용한 maltosyl-$\beta$-cyclodextrin 합성반응의 각종 열역학적 상수를 평가하였으며, $\Delta$H는 36.788kJ/mol, $\Delta$S는 0.067kJ/moleK, 그리고 $\Delta$G는 14.433kJ/mole이였다. PEG 6000의 분리회수에 적절한 ultrafiltration membrane의 pore size는 3K dalton이었으며, 여과액과 농축액의 적정 분획비는 1.0 : 9.0였다. Maltosyl-$\beta$-cyclodextrin 합성수율의 증가는 첨가한 PEG가 water activity를 감소시켜 합성된 maltosyl-$\beta$-cyclodextrin이 재분해되는 pullulanase이 정반응인 hydrolysis reaction을 억제하여 equilbrium state에 변화를 주기 때문인 것으로 유추된다.

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Octyldiinethyl p-aminobenzoate와 \brta -Cyclodextrin$의 포접화합물에 관한 연구 (A Study on the Inclusion Complexation of Octyldimethyl p-aminobengoate with \brta -Cyclodextrin$)

  • 이창학;소부영;김영수
    • 대한화장품학회지
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    • 제15권1호
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    • pp.51-62
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    • 1989
  • Inclusion complex formation of octyldimethl p-aminobenzoate with $\beta$-cyclodextrin in aqueous solution and in the solid state was studied by the solubility method, spectroscopic(UV, FT-lR) and X -ray diffractometry. The solid complex of octyldimethy p-aminobenzoate with $\beta$-cyclodextrin was obtained in molar ratio of 1 : 2(guest/host). A spatial relationship between host and guest molecule was clearly reflected in the magnitude of the apparent stability constant (K') and in the stoichiometry of the inclusion complex. Furthermore, a typical type Bs phase-solubility diagram was obtained for octyldimethyl p-aminobenzoate and p -cyclodextrin in water at $25^{\circ}C$. The results indicated that the solubility of the guest molecule was higher by the formation of $\beta$-cyclodextrin inclusion complex.

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Bacillus stearothermophilus KJ16이 생산하는 Cyclodextrin Glucanotransferase 의 정제와 효소특성 (Purification and Characterization of Cyclodextrin Glucanotransferase from Bacillus stearothermophilus KJ16)

  • 권현주;남수완;김광현;송승구;윤종원;김병우
    • 생명과학회지
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    • 제8권3호
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    • pp.326-332
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    • 1998
  • Cyclodextrin glucanotransferase from B. stearothermophilus KJ16 that can produce both cyclodextrin glucanotransferase and cyclodextrinase was purified by ammonium sulfate precipitation, DEAE-cellulose chromatography, Sephadex G-100 chromatography, and FPLC. The molecular weight of the purifice enzyme was about 65,000 dalton by SDS-PAGE. The optimal pH and temperature were 6.0 and $60^{\circ}C$, respectively. The enzyme was stable at $50^{\circ}C$ for 1 hr and in the pH range of 5.5 and 8.5. Mercaptoethanol and dithiothreitol inhibited the enzyme activity strongly. The enzyme produced 60% cyclodextrin(CD) from 5% soluble starch with the $^{\alpha}$, $^{\beta}$, $^{\gamma}$-CD ratio of 42:46:12. Amylopectin was the most suitable substrate with 67% conversion to CD.

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Cyclodextrin Glucanotransferase 고생산 호알칼리성 세균의 탐색과 분비 효소의 특성 (Screening of Alkalophilic Bacillus sp. for Overproduction of Cyclodextrin Glucanotransferase and Its Enzymatic Properties)

  • 도은주;박종부;이용현
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제21권2호
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    • pp.119-124
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    • 1993
  • An alkalophilic microorganism for overproduction of cyclodextrin glucanotransferase (CGTase) was newly isolated from hot-water spring soil, and identified as Bacillus firmus var. alkalophilus H609. The strain maintained stability during preservation and cultivation for the enzyme production, and produced significant amount of CGTase corresponding to the volumetric activity of 75 units/mL at 37C, initial pH of 11.2, and after 40 hours. The strain excreted several different proteins showing CGTase activity that catalyzed the formation of mainly beta-and Gamma-type cyclodextrin (ratio of 7:1) from soluble starch without accumulation of alpha-type. Other enzymatic properties were also investigated.

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Capping of Silybin with β-Cyclodextrin Influences its Binding with Bovine Serum Albumin: A Study by Fluorescence Spectroscopy and Molecular Modeling

  • Natesan, Sudha;Sowrirajan, Chandrasekaran;Dhanaraj, Premnath;Enoch, Israel V.M.V.
    • Bulletin of the Korean Chemical Society
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    • 제35권7호
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    • pp.2114-2122
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    • 2014
  • The association of silybin with ${\beta}$-cyclodextrin and its influence on silybin's binding with bovine serum albumin are reported. The stoichiometry, binding constant, and the structure of silybin-${\beta}$-cyclodextrin inclusion complex are reported. The titrations of silybin with bovine serum albumin in the absence and presence of ${\beta}$-cyclodextrin are carried out and the differences in binding strengths are discussed. Molecular modeling is used to optimize the sites and mode of binding of silybin with bovine serum albumin. F$\ddot{o}$rster resonance energy transfer is calculated and the proximity of interacting molecules is reported in the presence and absence of ${\beta}$-cyclodextrin.

FTIR-ATR 분광법을 이용한 사이클로덱스트린의 가수분해 측정 (The Hydrolysis Measurement of Cyclodextrins Using FTIR-ATR Spectrometry)

  • 정진갑
    • 분석과학
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    • 제13권5호
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    • pp.549-557
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    • 2000
  • 자외선/가시선 영역에서 뚜렷한 발색단이 없는 화합물 수용액의 반응을 추적하기 위해 FTIR-ATR 분광법이 사용되었다. 구체적인 예로서, 산성 수용액에서 ${\alpha}$-사이클로덱스트린과 ${\gamma}$-사이클로덱스트린의 가수분해 반응을 FRIR-ATR 분광법으로 연구하였다. 각각 1.0M, 0.5M, 0.1M 농도의 HCl 조건에서 두 사이클로덱스트린의 가수분해 반응을 연구한 결과, 강한 산성 용액에서 ${\alpha}$-사이클로덱스트린의 가수분해 생성물은 글루코오스이지만 ${\gamma}$-사이클로덱스트린의 가수분해 생성물은 글루코오스에서 더욱 분해된 물질이었다.

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