• 제목/요약/키워드: -Amylase

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사찰의 된장에서 분리된 Bacillus licheniformis YB-1234의 내열성 ${\alpha}$-Amyalse (Thermostable ${\alpha}$-Amyalse of Bacillus licheniformis YB-1234 Isolated from the Fermented Soybean of a Korean Buddhist Temple)

  • 이은지;윤기홍
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제40권4호
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    • pp.296-302
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    • 2012
  • 국내 사찰에서 제조된 된장으로부터 내열성 ${\alpha}$-amylase 생산균으로 분리된 YB-1234는 형태적 특성, 생화학적 성질 및 16S rRNA 유전자 염기서열에 근거하여 Bacillus licheniformis로 동정되었다. B. licheniformis YB-1234의 ${\alpha}$-amylase 유전자를 클로닝하여 그 염기서열을 결정하였으며 그로부터 유추된 ${\alpha}$-amylase의 아미노산 서열은 glycosyl hydrolase family 13에 속하는 B. licheniformis의 내열성 ${\alpha}$-amylases와 매우 높은 상동성을 보였다. ${\alpha}$-Aamylase 유전자를 함유한 재조합 대장균과 B. licheniformis에 의해 각각 생산된 ${\alpha}$-amylase는 pH 6.0에서 최대활성을 보였으나, 최적 반응온도는 약간의 차이가 있었다. 또한 B. licheniformis로부터 ${\alpha}$-amylase는 재조합 대장균에서 생산된 효소보다 열안정성이 매우 높았다. 이들 효소에 의한 maltotetraose와 maltohexaose의 주된 가수분해산물로는 glucose, maltose 및 maltotriose가 관찰되었다.

Effects of Different Levels of Supplementary Alpha-amylase on Digestive Enzyme Activities and Pancreatic Amylase mRNA Expression of Young Broilers

  • Jiang, Zhengyu;Zhou, Yanmin;Lu, Fuzeng;Han, Zhaoyu;Wang, Tian
    • Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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    • 제21권1호
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    • pp.97-102
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    • 2008
  • Four hundred and forty 1-day-old Arbor Acre broilers were fed commercial starter diets with 0, 250, 750 and 2,250 mg/kg of an alpha-amylase preparation from 1 to 21 days of age to investigate the effects of an exogenous enzyme on growth performance, activities of digestive enzymes in the pancreas and anterior intestinal contents and pancreatic amylase mRNA expression. Body weight gain (BWG) and average daily gain (ADG) increased linearly (p<0.01) with increasing levels of supplementary amylase but feed conversion ratio (FCR) was not affected. There was a negative quadratic change of protease and amylase in the small intestinal contents with the increase of supplementary amylase level. The activity of intestinal trypsin was also increased (p<0.05). Lipase was unaffected by amylase supplementation (p>0.05). The pancreatic protease, trypsin, and lipase were not affected by exogenous amylase levels. Consistent with the tendency for a linear depression of amylase activity, pancreatic ${\alpha}$-amylase mRNA was down-regulated by dietary amylase supplementation. The present study suggested that oral administration of exogenous amylase affected activities of intestinal enzymes and the production of pancreatic digestive enzymes in a dose-dependent manner.

사상균 FM04에 의한 Amylase 생산 및 음식물 쓰레기의 효소학적 가수분해 (Production of Amylase by a Filamentous Fungus, Strain FM04, and Enzymatic Hydrolysis of Food Waste)

  • 김경철;배영수;김시욱;김성준
    • KSBB Journal
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    • 제18권5호
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    • pp.363-370
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    • 2003
  • 본 연구에서는 썩은 고구마 및 감자로부터 amylase 생산균주인 사상균 FM04를 분리하였으며, 분리균주의 섬유소분해 효소 생산에 관한 배양의 환경변수 및 기질특성을 조사하였다. 최적의 효소생산을 위한 온도, pH, 교반조건은 각각 28∼3$0^{\circ}C$, 5.0∼6.0, 100rpm이였다. FM04는 Amylase 생산을 위해 탄소원으로서 starch을 잘 이용하였다. 경제적인 효소생산을 위해 전분이 많이 함유된 음식물쓰레기를 이용하였고, 1% (w/v)의 기질농도에서 5.2 U/ml의 amylase 효소활성을 얻을 수 있었다. Amylase 활성의 최적온도 및 PH는 각각 6$0^{\circ}C$와 4.5이었으며, 열안정성은 5$0^{\circ}C$에서 2일 동안 90%의 활성이 유지되었다. 음식물쓰레기의 효소학적 가수분해에서는 2.5 U/ml의 amylase 배양상등액에 음식물쓰레기 20% (w/v)의 첨가한 반응물을 5$0^{\circ}C$, 48시간의 반응한 결과 72.6 g/L의 환원 당을 얻을 수 있었다.

호알카리성 Bacillus sp. AL-8의 알카리성 아밀라제 유전자의 대장균에의 클로닝과 발현된 아밀라제의 특징 (Molecular Cloning and Expression of Alkaline Amylase Gene of Alkalophic Bacillus sp. AL-8 and Enzyme Properties in E. coli)

  • 배무;황재원;박신혜
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제15권6호
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    • pp.441-445
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    • 1987
  • 알카리성 amylase를 내는 Bacillus sp. AL-8의 알카리성 amylase 유전자를 amylase를 생성하지 않는 Escherichia coli HB101에 pBR322를 vector로 하여 형질전환하였다. E. coli도 알카리성 amylase를 생성하여 5$0^{\circ}C$에서 최적 활성온도를 가지며 5$0^{\circ}C$까지 열안정성을 갖고, pH10에서 최적 활성 pH를 나타내는 동시에 pH8-10에서 안정하였다. 알카리성 amylase 유전자가 E. coli에 형질전환되어 donor 세포와 같은 효소 성질을 갖고 있으며 pBR322로 삽입된 유전자는 pJW8에서 5.8kb이며 pJW200에서는 3.0kb로 E. coli에서 안정하게 발현되었다.

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보리와 밀 맥아 Amylases의 반응속도론적 연구 (Kinetic Studies on Amylases from Barley and Wheat Malt)

  • 김영휘;조정일
    • 한국식품위생안전성학회지
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    • 제6권3호
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    • pp.127-131
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    • 1991
  • 보리와 밀 맥아의 ${\alpha}-amylase$${\beta}-amylase$의 대한 찹쌀과 멥쌀 전분에 대한 반응속도론적 연구를 수행하였다. 보리와 밀의 발아 과정에서 ATP 함량은 발아 2일 후에 급격하게 증가하여 5일 후에는 감소하였으며, 건조 중량은 3일 후부터 감소하였다. 보리맥아와 밀 맥아의 ${\alpha}-amylase$$\;{\beta}-amylase$ 모두 6일째에 최대의 활성을 나타내었다. ${\alpha}-amylase$의 경우, 보리맥아에 존재하는 ${\alpha}-amylase$가 멥쌀 전분에서 친화력이 크게 나타났으며, $V_{max}$값은 보리 맥아의 경우 멥쌀 전분에서 밀 맥아의 경우 멥쌀과 찹쌀 전분에서 높게 나타났다. ${\beta}-amylase$의 경우는 보리 맥아의 효소가 찹쌀 전분에 대해 친화력이 크게 나타났으며, $V_{max}$값은 밀 맥아의 효소가 찹쌀 전분에서 높게 나타났다. 또한 기질 효율성은 보리 맥아에서 추출한 ${\beta}-amylase$가 멥쌀 전분에서 가장 우수하였다.

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Amylase와 유화제의 첨가가 빵 반죽특성에 미치는 영향 (Effect of Amylase and Emulsifier on the Characteristics of the Bread Dough)

  • 박범준;황성연;박천석
    • 한국식품과학회지
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    • 제37권5호
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    • pp.763-767
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    • 2005
  • 본 연구에서는 곰팡이과 세균에서 유래된 ${\alpha}-amylase$와 유화제인 monogrlyceride(MG), sodium stearoyl-2-laclylate(SSL) 및 diacetyltartaric acid ester of monol and diglycerides(DATEM)을 첨가하여 반죽을 제조하고, 제빵 반죽의 물리적 특성인 falling number, farinogram, alvogram 및 RVA를 이용한 호화특성을 살펴보았다. ${\alpha}-amylase$의 전분분해로 인하여 falling number는 감소하였으나, MG를 혼합한 반죽의 경우 전분과 높은 결합력으로 falling number가 높게 나타났다. Farinogram 특성에서는 곰팡이와 세균에서 유래된 ${\alpha}-amylase$와 유화제가 반죽의 점탄성과 흡수율, 탄력도를 감소시키고, 흡수시간은 증가시켰다. 다만 유화세로 SSL+MG를 사용하였을 때, 대조구와 유사하거나 탄력도와 흡수시간이 더 높게 나타났다. Alveogram 특성에서는 farinogram과 유사하게 $P_{max}$ 값을 감소시켜 탄력도를 감소시켰으며, 신장성, 팽창성 및 탄력에 대한 저항성을 감소시켰다. 반죽의 호화특성에서는 호화개시온도에서는 ${\alpha}-amylase$와 유화제가 영향을 주지 않았으나, ${\alpha}-amylase$의 전분 분해로 인하여 반죽의 점도를 낮추는 경향을 보여주었다.

외래 알파아밀라제의 Saccharomyces cerevisiae에서의 생산과 분비효율의 증진 (Improvement of Production and Secretion of Heterologous \alpha-Amylase from Saccharomyces cerevisiae.)

  • 최성호;김근
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제31권1호
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    • pp.36-41
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    • 2003
  • Saccharomyces cerevisiae로부터 외래 $\alpha$-amylase의 발현 및 분비를 증진시키기 위하여 여러 실험이 수행되었다. ADC1 promoter와 mouse salivary $\alpha$-amylase cDNA gene의 native signal sequence를 효모의 PRB1 promoter와 invertase leader sequence로 대치한 plasmid vector pCNN(AMY)를 제작하였다. 효모세포에서 생성된 $\alpha$-amylase의 세포외로의 분비율은 mouse o-amylase의 native signal sequence인 경우는 약 89.4%이었으며 invertase leader sequence로 치환된 경우는 96.3%로 분비효율이 증진되었다. 야생주인 K8l/pCNN(AMY)와 호흡결여변이주인 K81/pCNN(AMY)p-의 혐기적 조건하에서의 배양 결과 $\alpha$-amylase 생산량이 K8l/pCNN(AMY)보다 K81/pCNN(AMY)p-가 약 5~8배 정도 증가하였다. $\alpha$-Amylase의 생산에 있어서 배지조성에 따른 K81/pCNN(AMY)의 생산증진의 비교는 배지성분인 yeast extract와 peptone의 구성비율을 비교하였을 때 yeast extract 1%와 peptone 2%, NaCl의 경우 100 mM, 2-mercaptoethanol인 경우에는 0.015%(w/v)을 첨가하였을 때 최대 효소 활성을 나타내었고, 특히 2-mercaptoethanol인 경우에는 대조구에 비해 효소 생산량이 약 3배 정도 증진되었다.

Dietary Exogenous α-Amylase Modulates the Nutrient Digestibility, Digestive Enzyme Activity, Growth-Related Gene Expression, and Diet Degradation Rate of Olive Flounder (Paralichthys olivaceus)

  • Md. Tawheed Hasan;Hyeon Jong Kim;Sang-Woo Hur;Seong-Mok Jeong;Kang-Woong Kim;Seunghan Lee
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제33권10호
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    • pp.1390-1401
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    • 2023
  • In this study, a 12-week feeding experiment was conducted to characterize the effects of exogenous α-amylase on the growth, feed utilization, digestibility, plasma α-amylase activity, feed degradation rate, and fecal particle size of olive flounder (Paralichthys olivaceus). Diet was supplemented with 0 (AA0; control), 100 (AA100), 200 (AA200), or 400 (AA400) mg/kg of α-amylase, respectively. Fish (273.1 ± 2.3 g) were stocked into 12 tanks (25 fish/1,000-L tank) and 3 tanks were randomly selected for each diet group. As a result, α-amylase was found to have no significant effects (p ≥ 0.05) on the growth, feed utilization parameters, and whole-body proximate compositions. α-Amylase-treated fish exhibited only a significant increase in the apparent digestibility coefficient of carbohydrates compared to the controls. In addition, in vitro analyses revealed that α-amylase dose-dependently increased (p < 0.05) the feed degradation rate, while photographs of the intestinal content after 2, 4, and 8 h of feeding demonstrated an improved degradation rate in the α-amylase-treated groups. Plasma α-amylase content was higher in the AA200 and AA400 groups, whereas the control group produced significantly larger-sized fecal particles (90% size class) than these two groups. In the intestine, no changes were observed in the expression levels of the immune-related TNF-α, IL-1β, IL-2, immunoglobulin-M, HSP-70, lysozyme, and amylase alpha-2A. However, growth-related genes IGF-1, IGF-2, TGF-β3, and growth hormone genes were upregulated in muscle tissues. Collectively, exogenous α-amylase has positive roles in the modulation of the digestibility coefficient, blood α-amylase concentration, growth-related gene expression, and diet degradation for improved digestion in olive flounder.

보리종자에서 ${\alpha}-amylase$ 유도에 미치는 Dimethipin의 영향 (Effect of Dimethipin on the ${\alpha}-amylase$ Induction in Barley Seeds)

  • 전방욱
    • Journal of Plant Biology
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    • 제34권2호
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    • pp.159-163
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    • 1991
  • 합성 식물생장조절제인 dimethipin의 작용기작을 밝히고자 보리 무배부 종자 시스템에서 gibberellic acid(GA3)에 의해 유도되는 ${\alpha}-amylase$ 활성에 미치는 dimethipin의 영향을 조사하였다. Dimethipin은 mRNA와 단백질 함량 및 GA3에 의해 유도되는 ${\alpha}-amylase$ 활성을 뚜렷하게 억제하였다. 그러나 억제효과는 GA3 처리 후 dimethipin 첨가시간 간격이 커질수록 점점 감소하였다. Dimethipin을 GA3 처리후 18시간 이내에 첨가하였을 때 mRNA 함량증가를 억제하였다: 그러나 GA3 처리 18시간 경과 후에 첨가하였을 경우에도 수용성 단백질 함량 및 ${\alpha}-amylase$ 활성 증가를 억제하였다. 이러한 결과로 미루어보아 dimethipin은 mRNA 합성과 ${\alpha}-amylase$ 단백질 합성을 공히 억제하는 것으로 사료된다.

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내산성 ${\alpha}-Amylase$에 관한 연구 (Studies on Acid-stable Alpha-amylase)

  • 김학주;변시명
    • Applied Biological Chemistry
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    • 제21권2호
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    • pp.103-108
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    • 1978
  • Paecilomyces subglobosum이 생산하는 내산성 ${\alpha}-amylase$를 Sephadex G-150으로 정제한 결과 순수정제가 되지 않았으나 glucoamylase와 분리되었다. 조효소를 사용하여 내산성 amylase의 일반 성질을 조사한 결과 최적 pH는 4.0이었고 최적온도는 $38^{\circ}C$이었다. 이 효소는 보통 ${\alpha}-amylase$와 비교하여 pH에 대한 안정성은 매우 좋았으나 열 안정성은 비슷하였다. 전분에 대한 가수분해력이 좋았으며 생성물을 박충 크로마토그라피로 조사한 결과 말토스도 분해하는 것을 알았다.

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