• 제목/요약/키워드: 효소면역법

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면역효소항체법에 의한 $\beta$-용혈성 연쇄구균 Streptococcus sp.의 신속진단에 대하여 (The Rapid Diagnosis of $\beta$-Haemolitic Streptococcus sp. by Immunoperoxidase Method)

  • 전세규;최동림;박수일
    • 한국어병학회지
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    • 제1권2호
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    • pp.103-110
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    • 1988
  • 양식어류의 세균성 질병의 신속한 진단을 위하여 틸라피아(O. niloticus)로부터 분리된 $\beta$용혈성 연쇄구균인 Streptococcus sp. KST-2균주를 사용하여 면역효소법으로 검출실험을 하였으며, 면역효소법의 현장사용의 용이함과 검출의 민감도를 알아보기 위하여 counterimmunoelectrophoresis(CIE), 및 이중면역확산법등과 비교하여 보았다. 다른 어류 병원균과의 교차반응 결과 교차반응이 전혀 일어나지 않는 것으로 보아 이 방법은 $\beta$용혈성 연쇄구균(KST-2균주)에 매우 특이적임을 알 수 있었다. 연쇄구균의 검출실험한 결과 면역효소법은 $1{\times}10^3CFU/ml$의 농도까지 검출가능하였으며, 검출의 민감성이 CIE에 비해 $10^2$배, 이중면역확산법에 비해 $10^4$배나 높은 것으로 나타났다. 면역효소법은 이번 연구에서 사용된 진단법 중에서 현장사용이 가장 용이하며, 민감성이 가장 뛰어난 것으로 나타났다.

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단크론 항체를 이용한 돼지 로타바이러스의 진단법 개발 (Development of diagnostic methods for rotavirus from pigs using monoclonal antibody)

  • 강신영
    • 대한수의학회지
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    • 제32권4호
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    • pp.569-577
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    • 1992
  • Group A 로타바이러스 VP6에 특이적으로 반응하는 단크론 항체를 이용하여 로타바이러스 감염이 의심되는 돼지 분변으로부터 로타 바이러스를 검색할 수 있는 효소면역측정법을 개발하였다. 이 효소면역측정법에서는 capture antibody로서 protein A-sepharose를 이용하여 단크론 항체로부터 순수 분리한 immunoglobulin을 사용하였으며 detecting antibody는 토끼 면역혈청으로부터 순수 분리한 immunoglobulin에 biotin을 label하여 사용하였다. 개발된 효소면역측정법의 민감도와 특이성을 전자현미경법 및 형광항체법의 것과 비교하여 보았을 때 서로 유사하였으며 분변재료로부터 로타바이러스를 검색하는데 유용한 것으로 나타났다. 개발된 효소면역측정법은 야외로부터 로타바이러스 검색을 위하여 수집된 많은 양의 분변재료를 실험실내에서 screen하는데 유용하게 사용될 것으로 생각된다.

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단클론항체를 이용한 폐흡충증의 면역진단 (Serodiagnosis of human paragonimiasis by ELISA-inhibition test using monoclonal antibodies)

  • 용태순;서장훈;여인석
    • Parasites, Hosts and Diseases
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    • 제31권2호
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    • pp.141-148
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    • 1993
  • 폐흡충증의 진단을 위하여 근자에 효소면역측정 법(ELISA)이 널리 쓰이고 있다. 이 논문에서는 폐흡충 항원에 대한 단클론항체를 제조하고 이를 효소면역억제측정 법 (ELISA-Inhlbltlon test)에 응용하여 효소면역측정 법의 특이도를 더욱 높이고자 하였다. 폐흠충 성충의 수용성 항원으로 면역한 BALB/c 마우스의 비장세포와 형질세포종세포를 융합하여 림프잡종세포를 만들고 이 중에서 폐흡충 항원에 대한 특이 단클론항체를 생성하는 하나의 림프잡종세포를 선택하였다. 이는 Pwa-14라고 이름지워졌는데, EITB상 28 kDa, 42.5 kDa, 89 kDa, 120.5 kDa 항원대에 반응하였으며, 간접 면역항체법으로 반응하는 항원의 위치가 난황선임을 확인하였다. 폐흡충 항원을 사용한 통상적인 효소면역측정법에 폐흡충 감염자 22명의 혈청은 모두 양성 반응을 보였으며, 간흡충 감염자 40명 중 5명(12.5%), 유구낭충 감염자 26명 중 3명(7.7%)은 양성을 나타내 교차 반응을 보였다. 이 때, 스파르가눔 감염자 10명 및 정상 대조군에서는 양성 반응을 보이는 혈청이 없었다. 특이 단세포군항체를 이용한 효소면역 억제측정법으로 측정한 결과, 폐흡충 감염자는 모두 양성반응을 보였으나, 유구낭충, 스파르가눔 감염자의 혈청은 교차 반응을 보이지 않았다. 이상의 결과로 보아 폐흡 충의 면역 진단 시, 폐흠충 특이 단클론항체를 이용한 효소면역 억제측정 법은 통상적인 효소면역측 정법에 비하여 더 높은 특이도를 보임을 알 수 있었다.

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보르나병 바이러스 항체검출을 위한 연구 -세 가지 혈청진단법의 비교- (Detection of antibodies against infectious Borna disease virus -a comparison of three serological methods-)

  • 이두식
    • 대한수의학회지
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    • 제32권1호
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    • pp.57-61
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    • 1992
  • Borna disease(BD) virus 특이항체검출에 대한 세 가지 혈청진단법(간접형광항체법, 세포효소면역반응법, 혈청중화시험)의 정확도를 비교하기 위해 BD virus를 실험적으로 감염시킨 273수의 토끼의 혈청으로 시험하였다. 혈청중 간접형광항체법에 의하여 판정된 123혈청들은 모두 세포효소면역반응법에 의해서 양성으로 판정되었으나 혈청중화시험법에 의해서는 단지 27혈청에서만 양성으로 판정되었다. 혈청중화시험법은 간접형광항체법과 세포효소면역반응법에 비하여 민감도가 훨씬 낮게 나타나 BD virus의 혈청학적 연구에는 간접형광항체법 및 세포효소면역반응법의 활용도가 높을 것으로 생각된다.

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보르나 바이러스를 실험감염시킨 동물에서 항체검출에 대한 세포효소면역반응법의 평가에 대한 연구 (Evaluation of a cell enzyme-linked immunosorbent assay for the detection of Borna disease virus antibodies in experimentally infected animals)

  • 이두식
    • 대한수의학회지
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    • 제32권3호
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    • pp.377-380
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    • 1992
  • 보르나병 바이러스 혈청학적 진단법에 있어서 새로 개발된 세포효소면역법의 항체검출에 대한 평가를 위하여 지금까지 주로 사용되어진 간접형광항체법과 네 종류의 실험동물에서 서로 비교하였다. 모든 동물에서 간접형광항체법의 역가와 세포효소면역반응치 사이에 상관계수가 모두 0.8 이상으로 고도의 유의성이 인정되었고 두 진단법의 일치율은 한 희석단계 이하로서 재현성이 아주 좋았다. 세포효소면역반응법은 보르나병 바이러스의 혈청역학적 조사 및 병인기전 연구에 유용하게 이용될 수 있을 것으로 생각된다.

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효소면역측정법을 이용한 스파르가눔증의 혈청학적 진단 (Serological Diagnosis of Human Sparganosis by means of micro-ELISA)

  • Hyuck Kim;Suk-Il Kim;Seung-Yull Cho
    • Parasites, Hosts and Diseases
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    • 제22권2호
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    • pp.223-228
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    • 1984
  • 외과적으로 충체를 적출하여 진단한 스파르가눔증 환자 7명으로부터 혈청을 수집하고 혈청내 스파르가눔 특이 IgG 항체가를 호소면역 측정 법으로 측정하였다. 스파르가눔 항원은 유혈목이에 자쳔 감염된 충체를 갈아 생리 식염수로 추출한 것으로 단백질 함량은 Smgyxnl이었다. 효소면역측정법은 McLaren 등(1978)의 방법에 따라 실시하였다. 스파르가눔중 환자 혈청이 폐흡충 항원 또는 유구낭미충 항원에 교차반응이 있는지 여부도 측정하였다. 또한 스파르가눔 항원에 대해서 정상인, 케흡충중 환자, 간홉충 감염자, 유구낭미충증 환자와 무구조충 감염자 등 모두 71명에 대해서도 교차반응을 나타내는지 를 관찰하고자 효소면역 측정 법을 실시하였다. 그 결과를 요약하면 다음과 같다. 1. 스파르가늠증 환자 7명중 석회화한 스파르가눔에 감염되어 있었고 수술후 1개월에 혈청을 수집한 1례를 제외하면 모두 홉광도 0.3 이상을 나타내었다. 양성판정기준을 흠광도 0.25로 하였을 때 효소면역 측정 법의 민감도(sensitivity)는 85.7이 었다. 2. 기타 기생충 감염자와 정상인 71명중에서 스파르가눔 항원에 대한 특이항체 양성자는 무구조충감염자 3명으로 특이도(specificity)는 97.5%이었다. 3. 스파르가눔중 환자 혈청은 폐흡충 항원 및 유구낭미충 항원에 대해서 항체가는 낮은 값을 보이고 있어 교차 반응은 발견할 수 없었다. 4. 중추신경계를 침범한 스파르가눔중 환자 2례에서 뇌척수액을 희석하지 않은 상태로 효소면역 측정 법을 실시하였던 바 1례는 폐흡충 및 유구낭미충 항원에 대해 교차반응 없이 스파르가눔항원에 대해 높은 항체가를 보인데 비해 다른 1례에서는 스파르가눔 항원 및 유구낭미충 항원에 대해 비슷한 항체가를 나타내고 있었다. 이상의 결과에서 효소면역 측정 법을 이용하여 스파르가눔중을 혈청학적으로 진단하는 경우 매우 특이하고 민감한 결과를 얻을 수 있을 것으로 생각하였다. 스파르가눔중의 수술전 진단이 실제로 어려운 것이 현실이므로 혈청학적 잖단은 역학적 유해조사나 형태학적으로 감별이 어려운 병리소견을 보인 경우 등에서 보조적인 진단법으로 이용할 수 있을 것으로 생각한다.

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Haemophilus influenzae type b 피막 다당질 특이 인간 IgG 항체의 정량적 측정을 위한 enzyme immunoassay의 타당성 연구 (Validation of enzyme immunoassay for the quantitative measurement of human IgG antibodies specific for Haemophilus influenzae Type b capsular polysaccharide)

  • 김경효;임수영
    • Clinical and Experimental Pediatrics
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    • 제50권2호
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    • pp.143-150
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    • 2007
  • 목 적: 인체의 항 PRP IgG 항체를 정량적으로 측정하기 위한 방법인 표준화된 효소면역법의 타당성을 연구하는 것이 목적이다. 방 법: 인체의 항 PRP IgG 항체를 정량적으로 측정하기 위한 방법인 표준화된 효소면역법의 타당성을 연구하기 위해 특이성, 반복성, 실험실내 정밀성, 정확성, 최소 정량 한계, 및 안정성을 평가하였다. 결 과: 본 연구에서 사용한 효소면역법은 검사에 사용된 항원(HbO-HA)에 특이성을 보였으며 반복성, 실험실내 정밀성 등의 정밀성은 허용기준(반복성 : $CV{\leq}15%$, 실험실내 정밀성 : $CV{\leq}20%$)을 만족하였다. 정확성은 28개 혈청을 대상으로 한 RABA 정량결과와 효소 면역법 정량결과 비교시험에서 높은 상관계수를 보였고 첨가 회복 검사 결과 허용기준($100{\pm}20%$)을 만족하였다. 최소 정량 한계 시료 정량결과의 정밀성과 정확성은 공칭 양의 -14.7~-4.7%로 모두 허용기준(정밀성 : $CV{\leq}25%$, 정확성 : ${\pm}25%$)을 만족하였다. 안정성 중 냉 해동 안정성과 단기 온도 안정성도 모두 허용기준(${\pm}20%$ 이내)을 만족하였다. 결 론: 이상의 결과로 이화여자대학교 의과학연구소 백신효능연구센터에서 시행한 본 효소 면역법은 혈액 내에 존재하는 항 PRP IgG 항체를 정량적으로 측정하는 시험법으로 적절하였다.

파충류 $M_4$형 젖산 수소이탈효소의 면역학적 연구 (Immunological Comparison of the Reptilian $M_4$-LDH Isozyme)

  • Park, Sang-Yoon;Cho, Dong-Hyun;Kim, Sang-Yeop
    • 한국동물학회지
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    • 제19권2호
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    • pp.79-84
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    • 1976
  • 살모사 근육조직의 $M_4$형 젖산 수소이탈효소에 대한 항혈청을 토끼에서 얻어서 척추동물 15종의 젖산 수소이탈효소와 항원-항체 반응결과를 초산셀룰로즈 전기영동법에 의하여 얻었으며, 아울러 뱀목 4종에 대한 면역확산 실험도 실시하였다. 살모사, 쇠살모사, 까치살모사 및 유혈목은 면역학적으로 동일한 젖산 수소이탈효소를 가지고 있으며 쇠살모사는 살모사속의 다른 종과는 유연관계가 먼것 같았으며 젖산 수소이탈효소 단위체의 면역학적 상이성이 파충류에서도 재확인되었다.

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