Recombinant Saccharomyces cerevisiae BZ-pJ containing the gene coding for metallothionein, a metalbinding protein was grown in the medium with high cadmium concentrations to study the characteristics of growth and cadmium uptake. High concentrations of cadmium reduced cell growth and final cell density and increased the lag phase periods of the recombinant yeast. Addition of 10 mg $Cd^{2+}$/L to the growth medium remarkably decreased a lag period and enhanced the specific cadmium uptake to 52.6 mg $Cd^{2+}$/g dry cell. The effect of copper addition was further investigated in the medium of 680 mg Cd2+/L. An increase in copper concentration from 11.0 to 33.3 mg/L enhanced the specific cadmium uptake from 17.0 to 42.0 mg Cd2+/g dry cell.
As a pary of investgation on effective accumulation of cadmium in yeast cells, effect of surfactant was studied on intracellular accumulation of cadmium in extremely cadmium-tolerant yeast, Hansenula anomala B-7. Cadmium accumulation was enhanced up to approximately 40% by the addition of non-ionic surfactant, Triton X-100 and its optimal concentration was found to be 0.1-0.2%. Furthermore, optimum conditions for intracellular accumulation of cadmium were at $40^{\circ}C$ and initial pH 6.0 for 48 hours under shaking culture.
Park, Chan-Kum;Lyu, Geun-Shin;Kim, Wan-Sup;Jeon, Seok-Chol;Lee, Jung-Dal
The Korean Journal of Cytopathology
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v.8
no.1
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pp.103-107
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1997
Initial rapid diagnosis of primary pulmonary cryptococcosis(PPC) occurring in a immunocompetent host was made by transthoracic fine needle aspiration cytology of a solitary subpleural nodule. Numerous refractile spherical organisms surrounded by a clear halo were demonstrated with haematoxylin-eosin and Papanicolaou stains. The organisms, $5{\sim}15{\mu}m$ in diameter, were easily demonstrated with Gomori methenamine-silver stain. Many of the organisms showed narrow-base budding. Carminophilic cell walls were well demonstrated with mucicarmine stain.
A Saccharomyces cerevisiae isolated from a feed additive yeast product was cultivated in a Korean paper digestion wastewater in order to investigate the possibility of using it as substrate for the yeast. The yeast couldn't grow in the wastewater. It could grow in the wastewater diluted and the optimum dilution rate was 7.5 In batch cultivation with the jar fermenter the maximum total cell count was $1.34{\times}107/mL$ was obtained by the addition of undiluted digestion wastewater. By adding $(NH_4)_2S0_4 and KH_2P0_4$together with the undiluted wastewater the maximum cell concentration could be obtained faster.
This study was conducted to investigate the condition of enhancing glutathione content of yeast. Rhodotorula glutinis in various kind of yeasts produced high content of glutathione and dry cell by cultivating for 48 hours at 30'C and pH 6.0 on reciprocal shaker. In order to enhance the glutathione content, as 0.7% of amino acid was applied into the medium. Glutathione was produced high for 36 hours cultivation. When glutamic acid, cysteine and glycine composing the glutathione were added, glutathione content increased to 219 $\mu\textrm{g}$/ml. However the control showed to 73 $\mu\textrm{g}$/ml.
As a primary study for SCP production from soybean curd waste water, selection of yeast and optimum cultivation condition of selected yeast on soybean curd waste water were investigated. Eighteen strains of the genus Candida and Saccharamyces were tested to compare their abilities to grow on soybean curd waste water. Candida utilis YUFE 1508 and Candida guilliermondii KFCC 35120 grew most successfully. Optimum pH and optimum temperature of the basal medium for growth of the two strains were $6.0{\sim}6.5$ and $25^{\circ}C$, respectively. The optimum culture medium of the two yeasts was soybean curd waste water supplemented with molasses 2.5% (as total sugar), ammonium acetate 0.1-0.3% (as nitrogen), $KH_2PO_4$ 0.1-0.2% (as phosphorus), and $K_2HPO_4$ 0.05% (as phosphorus). But yeast growth was not affected by metal salts. Under the optimum cultivation condition, the maximum cell weights of Candida utilis YUFE 1508 and Candida guillfermondii KFCC 35120 were 1.313g and 1.322g/100ml of culture broth respectively after 48 hr of cultivation. The cell yields of Candida utilis YUFE 1508 and Candida guilliermondii KFCC 35120 were 68.4% and 74.2%, respectively, based on utilized sugar. On the other hand, crude protein of dry yeast produced by Candida utilis YUFE 1508 and Candida guilliermondii KFCC 35120 under optimum condition was 54.0% and 56.8%, respectively.
The endoglucanase gene, egl6, of Trichoderma sp. was connected with the yeast ADH1 promoter, and the resultant plasmid, pVT-C4, was introduced into three S. cerevisiae host strains (YNN27, 2805, and SEY2102). Among each 80 transformants, the cell growth and expression level of endoglucanase were compared in test-tube cultivation, and three respective transformants for each host cells showing the highest expression level and cell growth were selected. When three recombinant yeast cells were batchwise cultivated for 48 hr in flask, the total activities of endoglucanase expressed were about 1140 unit/l with 2805/pVT-C4, 1020 unit/l with SEY2102/pVT-C4, and 590 unit/l with YNN27/pVT-C4. Irrespective of host strain, about 80% of the expressed endoglucanase was detected in the extracellular medium. In addition, it was also found that the recombinant enzyme was secreted into the culture medium as two major forms of lightly and heavily glycosylated proteins.
During an extensive screening tests of yeasts for their RNA formation, it was found that Cryptococcus laurentii had especially high RNA content and high dry cell weight, when hydrolyzate of sliced and dried sweet potatoes was used as a carbon source. Growth conditions of this strain were examined, and the most desirable results were obtained at 48 hours of cultivation on a reciprocal shaker at 3$0^{\circ}C$ with initial pH 6.0. Under the above conditions, the RNA content and yield of dry cells were investigated using various media compositions. Ammonium sulfate 0.40%, peptone 0.6 %, and yeast extract 0.4% were appeared to be favorable as a nitrogen sources. The optimum concentrations of K $H_2$P $O_4$, M $n^{++}$, C $O^{++}$ were 0.05 %, 0.1 %, and 0.001 %, respectively. Ca-pantothenate, 400$\mu\textrm{g}$/$m\ell$, showed relatively favorable effects as a growth factor. The maximum RNA content obtained in this study was 16.8 % of the total dry cell weight.t.t.
The glutathione contents of the selected mutants were investigated and found to be 6.1-15.8 mg/g-DCW. The glutathione content positively correlated with the antioxidant activity of the mutant strains ($R^2$=0.488). Furthermore, the glutathione content of the mutant S. cerevisiae Sa-59 was approximately 38% greater than that of the wild type strain and, therefore, this mutant strain was selected for glutathione production. The volumetric glutathione content in a shaking culture was increased by about 70% compared to the static culture. In addition, the specific glutathione content was increased by ~19%. The volumetric glutathione content and specific glutathione content were increased by approximately 16% and 66%, respectively, when 0.04% glutamate, 0.04% cysteine and 0.04% glycine were added. Furthermore, the highest antioxidant activity was 0.52 as absorbance unit at 700 nm.
$\alpha$-Amylase gene of Bacillus amyloliquetaciens was cloned on plasmid YEp13, S. cerevisiae-E. coli shuttle vector. Hybrid plasmid pTG17, carrying $\alpha$-amylase gene of B. amyloliquefaciens, was transformed to E. coli and the expression of it in yeast was investigated. This plasmid was unstable in E. coli and produced two minor plasmids, pTG17-1 and PTG17-2, which resulted from the segregation of it. Transformant of S. cerevisiae MC16 with pTG17-1 plasmid was not appeared on SD medium because of the Leu2 gene defection. S. cerevisiae could be transformed by the hybrid plasmid, and $\alpha$-amylase activity of the yeast transformant was detected by somogyi-Nelson method and agar diffusion method.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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