In the experiment, gene actions were analyzed for seven silkworm varieties in order to obtain basic information on their genetic improvement by diallel crosses. The results obtained were summarized as follows : in analysis of variance, significantly maternal and reciprocal effects were observed for all character except female cocoon shell percentage and female pupal weight. Over-dominance was shown by Vr-Wr graphic analysis in three characters such as female cocoon weight, female and male pupal weight, and partial dominance in five characters such as male cocoon weight, cocoon shell percentage in both female and male. Component of genetic varience analyzed for five characters such as male cocoon weight, cocoon shell weight, cocoon shell percentage in both female and male showed that additive effects were higher than dominant effects, and female cocoon weight showed dominant effects higher than additive effects. Heritability of narrow sence was higher more than 0.51 and heritability of broad sence was higher more than 0.77 in all characters except for female pupal weight. The directions of dominance were negative for female cocoon shell weight and somewhat higher for female and male cocoon shell percentage. Meanwhile cocoon weight, pupal weight in both female and male showed positive in the direction of dominance.
Rice is the most important crop as a model plant for functional genomics of monocotyledons. Rice is usually transformed using Agrobacterium tumefaciens. However, the transformation efficiency using previous method is still low. In this study, we established a new method by modifying the general Agrobacterium protocol especially in the inoculation and co-cultivation step. We directly inoculated Agrobacterium containing a CIPK15 gene under the control of CaMV 35S promoter and NOS terminator in the pCAM1300 vector into the pre-soaked seeds in N6D media for 24 hours. After 7 days of culture at $25^{\circ}C$, calli were formed on seeds cultured on the co-cultivation medium containing an antioxidant compound (1 mM dithiothreitol) and of Agrobacterium growth-inhibiting agent (3 mg/L silver nitrate). We obtained 35 and 22 transgenic plants in rice cultivars, Gopumbyeo and Ilpumbyeo, with increase of transformation efficiency by 30.4% and 22.6%, respectively compared to the general transformation method. The new method in this study would lead to reduction of substantial labor and time to generate transgenic plants.
Journal of The Korean Society of Grassland and Forage Science
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v.31
no.1
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pp.1-8
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2011
Molecular techniques such as genetic transformation are powerful tools that can be used for the genetic modification of warm-season grasses. The P. meyerianum with high regeneration ability was used for establishing an Agrobacterium-mediated transformation system. We investigated various factors affecting Agrobacterium infection by examining GUS gene expression of pCAMBIA1304 vector. Among various concentration of acetosyringone and betaine tested for inoculation and co-cultivation, 10 mg/L acetosyringone and 60 mg/L betaine resulted in the highest transformation frequency in terms of GUS expression. The calli of 4 species of Panicum spp. with excellent tissue culture response were inoculated with Agrobacterium under the optimal infection conditions. The high activity of GUS gene was observed in all species and hygromycin-resistant calli expressing GFP were obtained in P. meyerianum, P. longijubatum, P. stapfianum and guineagrass Noh-PL1. Co-cultivated calli were transferred onto the selection medium containing hygromycin, and the hygromycin resistant calli were selected after 3 months. Hygromycin-resistant plantlets were then successfully regenerated from the calli and grown in a greenhouse. We confirmed stable insertion of hpt gene among the hygromycin-resistant plantlets of P. meyerianum by PCR analysis.
Korean ginseng(Panax ginseng C.A. Meyer) is very difficult to obtain stable production of qualified ginseng roots because of variable stresses in soil environments. In transformation of ginseng with betain aldehyde dehydrogenase gene, compounds synthesized for controlling osmotic pressure such as proline, glycine, betaine, polyols and sugar were accumulated in cell for salt resistance in transgenic plants. 2 Agrobactgerium conjugants were acquired with bet A and bet B genes for solt resistant plants. A. tumefaciens MP90/pBetA and A. tumefaciens MP90/pBetB were recombined for increasing the tolerance to salt stress. To confirm the transformation of the binary vector, tobacco plant was transformed, and the transformant can grow on media containing high concentration of kanamycin. To identify NPT 11, BetA and BetB genes of the transformants, the band on the agarose was confirmed by PCR and RT-PCR techniques. The transformants of ginseng with bet A and bet B genes were acquired on the phytohormone free basic MS media containing only antibiotics and 1M mannitol used for selection of transgenic plant, but the transfomation efficiency for BetA and BetB was very low.
Intergeneric hybrids between Saccharomyccopsis fiburigera KCTC 7393 and Saccharomyces cerevisiae KCTC 7049 (tyr-, ura-) were obtained by nuclear transfer technique. Nuclei isolated from the wild type S. fiburigera strain were transfered into auxotrophic S. cerevisiae mutants and new strains showing an increased starch degrading capability were selected. Maximum production of protoplasts was obtained from the treatment with 0.1 % Novozym 234 at $30^{\circ}C$ for 90 min, and most effective osmotic stabilizer for the isolation of protoplasts was 0.6 M KCl at pH 5.8. The frequency of protoplast regeneration was 14.64% under the conditions. Genectic stability, conidial size, DNA content, and nuclear stain suggested that the fusants were aneuploidy. The specific activity of ${\alpha}-amylase$ was observed to increase about $1.2{\sim}1.9$ folds.
Pax6, a member of the highly conserved homeobox gene family, is known to be expressed in spatially and temporally restricted pattern during embryogenesis. To examine the spatial expression pattern of Pax6 in malaria vector mosquito Anopheles stephemi, in different molecular environment, the germ line transformation technique using piggyBac transposon combined with the use of Pax6 specific 3xp3-EGFP marker was utilized. Four transgenic lines with a transformation rate of 6.7% were established. Transgenes were stably expressed in subsequent several generations. The transgenic lines showed 3 different expression pattern with spatial specificity, possibly due to enhancing and/or silencing position effects. In two transgenic lines, noble expression pattern of Pax6 was observed in the region that has not been previously reported in any animal species. The results show that the tranposon piggyBac mediated germ line transformation system can be used as an efficient tool for the generation of diverse spatially restricted reporter gene expression.
Some morphological and anatomical characteristics of four Abies species in Korea were investigated to find the characteristics and the taxonomical relationship between the species. The results were summarized as follows: There was no significant difference in needle thickness and number of hypodermic cell layer among 18 morphological and anatomical characteristics of cone and needle between the species. A. koreana and A. nephrolepis were similar in above fourteen characters and A. holophylla and A. firma were also similar in the 14 characters. A. koreana and A. firma showed similarity in above two characters. Main resin canals of needles in A. koreana and A. nephrolepis were situated in leaf margin (L-LM), those of A. holophylla, in L, L-M and M, and that of A. firma fully in other locations except L.
It is generally known that mutations in any of several genes encoding photoreceptor-specific proteins have resulted in retinitis pigmentosa (RP), a disease characterized by losing photoreceptor function with progressive degeneration of photoreceptor cells and eventually leading to blindness. To study the procure and cure of photoreceptor degeneration, we produced transgenic mice. Transgene consisted of a 12.5kb genomic DNA fragment that contains mutated pig rhodopsin gene (Pro-347-Ser) including both the 5'-franking (4.0 kb) and the 3'-franking (2.9 kb) sequences. This gene was used for the production of transgenic mouse. The mutated rhodopsin DNA was microinjected into male pronuclei of fertilized mouse (C57BL /6]) embryos. We detected transgenic animals harboring mutated rhodopsin gene by PCR and Southern blot analysis. These transgenic mice showed stable transmission of microinjected rhodopsin gene into their offspring. Therefore these animals will provide a novel approach to study the mechanism of the photoreceptor degeneration and be provided as a disease model for the treatment of the blind in human.
The fruit wall anatomy of Ocotea was investigated on the basis of 14 species within the genus to contribute to a better understanding of specific relationships and homogeneity of genus. The species have a similar mature fruit wall structure, but diUerences among the species are found with respect to whether or not sdc.nchyma cells are present in the mesocarp. if present, whether or not they are present in particular positions and forms. Comparisons with species studied suggested that at least a few groups of species can be distinguished in Ocotea. They arc divided into five groups on the basis of anatomical structures. i.e., group 1) O. atrriensis, O. cujumari, O. helicterifolia, O. rubra and O. schomburgkiana; group 2) O. aeiphylla, O. javitensis, and O. sp. [Werff et ai. 12676]; group 3) O. tonduzii: group 4) O. foetens, O. quixos, and O. veraguensis; and group 5) O. floribunda and O. nitida. These various variations in Ocntea were also discussed to invite its respective systematic revisions. By the comparisons with species, on the other hand, it suggested that the specialized species are evolved from non-specialized species.
The olfactory system is an important model for the study of neuronal degeneration and regeneration, including neuronal diseases. When the olfactory sensory neurons are damaged by nerve injury or are exposed to environmental factors, they degenerate and are replaced by regenerating neurons. To monitor neuronal degeneration in living animal, we established an olfactory-specific GFP transgenic zebrafish. The effects of Triton X-100 or sodium acetate on the olfactory system were examined. A significant decrease in the number of GFP-positive olfactory sensory neurons was observed after chemical lesion. We found a recovery of GFP-positive neurons by 2 days posttreatment. From these results, we expect that further studies of olfactory degeneration and regeneration using this transgenic zebrafish will provide important advances for the study of neuronal degeneration and regeneration.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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