• KSBB Journal
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• v.18 no.6
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• pp.435-439
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• 2003

Plant cell culture can be divide into two classes non-organic culture and organic culture. Non-organic culture such as suspension culture has many researches, however organic culture about recombinant protein production has little researches. Recombinant protein produced through organ culture is quite stable and it can make proteins by itself without any grow regulators. Therefore organ culture is much easier than other methods. In this research, we used transformed tobacco seed. At first we germinated the seed then separated stems and leaves from the grown plant. And raised in liquid medium by in vitro vegetative reproduction. Continuing most suitable conditions, we compared the Quantities of recombinant protein from intra cellular with from extra cellular. And adding some permeabilizing agents (Pluronic F-68, Triton X-100, DMSO, PEG8000), we increased the productivity of the recombinant protein.

• Korean Journal of Animal Reproduction
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• v.27 no.3
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• pp.225-231
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• 2003

Transgenic mice containing Diphtheria Toxin-A (DT-A) gene fused to proximal lck promoter sequences was used for analysis of DT-A gene expression and thymocyte development. The diphtheria toxin gene was expressed in thymus, spleen and liver of transgenic mice confirmed by RT-PCR and Northern blotting. A FACS analysis with thymocyte cell surface antigens antibodies (CD4 and CD8) showed that the number of peripheral mature single positive thymocytes ($CD4^{+}\;and\;CD8^{+}$ cells) T-cells was severely reduced in transgenic mice compared to that in the non-transgenic littermates. A relative portion of $CD8^{+}$ single positive thymocytes was about 33.2% in transgenic peripheral T-cells while 50.6% in wild type. Reduction of $CD4^{+}$ cell numbers in transgenic mice was observed (5.9% in transgenic versus 10.3% in non-transgenic). The data from analysis of these transgenic mice indicate that the proximal lck promoter regulated the expression of DT-A gene at high level in developing thymocytes and the DT-A disrupted developing thymocytes in transgenic mice.

• Korean Journal of Plant Taxonomy
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• v.32 no.4
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• pp.363-382
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• 2002

Morphological characters of three taxa belonging to three genera (Fuirena, Kobresia, and Scleria) in Korean Cyperaceae were reexamined. The anatomical patterns of stems and leaves, and epidermal patterns of achenes and leaves were investigated by a scanning electron microscope (SEM) and a light microscope (LM). Based upon the results, the scientific and Korean names, which have not been clearly established, were reviewed. Morphological characters such as length and width of stem, leaf, bract, scale, achene, and shape of achene, spikelet, style base, scale, perianth, and anatomical characters such as shape of stem and leaf, shape of achene epidermal cell and silica body of leaf, size and frequency of stomatal complex, presence of bulliform cell were useful for an identification of the three taxa.

• Proceedings of the Korean Society of Embryo Transfer Conference
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• 2002.11a
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• pp.72-72
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• 2002

조류는 발생학적 특성상 수정과 초기 배발생을 제외한 거의 대부분의 개체발생 과정이 난각 속에서 진행된다. 그러므로 수정란에 생명 공학적 기법을 적용하는데 있어서, 포유류의 경우 여러 생명공학 기법이 적용된 수정란은 초기발생을 위한 체외배양 이후 반드시 모체에 이식되어야 하지만, 조류의 경우 인공적인 체외배양 체계가 확립되어 있어야 생명공학 기법이 적용된 수정란을 개체까지 발생시킬 수 있게 된다. 닭의 난자는 난관 누두부에 배란 후 약 15분내에 정자의 침입을 받아 수정되어 난관 팽대부에 도달하면 1세포기 수정란이 된다. 그 후 수정란이 협부에 도달하면 최초로 분할이 일어나기 시작하여, 방란시에는 그 세포수가 60,000개에 이르게 된다. 한편, 계란의 형성 과정에서는 다량의 난황을 포함한 난자가 난관 누두부로 배란되어 정자와 만나게 되면 수정란으로서 계란 형성이 계속되고 정자와 만나지 못하게 되면 무정란으로서 계란 형성을 계속하게된다. 배란된 난자가 난관누두부를 거쳐 난관팽대부에 도달되면 난자는 농후난백에 의해 둘러싸이게 되고 난관혈부에 도달되면 난각막이 형성되고 수양성 난백이 침적하게 된다. 그 후, 난관협부를 지난 난자는 난관자궁부에 도달되면 20시간이상 그곳에 머물면서 난각형성이 진행된 다음 방란된다. 따라서 수정란에 외래유전자를 미세주입하여 형질전환 닭을 생산하기 위해서는 수정란을 암탉의 난관 내에서 최초 분할되기 전에 외부로 끄집어내어야 하며, 수정란에 외래 유전자를 미세주입한 다음에는 다시 암탉의 난관내로 이식해야 하지만 현재까지 그러한 기술은 확립되어 있지 못하다. 그렇기 때문에 모체의 난관 속에서 일어나는 배 발생과 그 이후 개체까지의 발생을 위하여 인공적인 체외배양 체계가 확립되어 있어야 한다. 따라서 본 발표에서는 형질전환 닭을 생산하기 위한 양질의 1세포기 수정란 획득 방법과 획득된 수정란의 체외 배양방법에 관하여 기술적인 측면에서 고찰 해보고자 하며, 그와 같은 배양 기술을 이용하여 외래유전자를 도입한 일련의 결과에 관하여 보고 하고자한다.

• Proceedings of the KSAR Conference
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• 2001.03a
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• pp.58-58
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• 2001

본 연구는 섬유소 분해효소 유전자 Cel D(Cellulase Digestion)가 도입된 형질전환 돼지 생산을 통하여 섬유소 함유 사료의 이용 효율을 증대시키고, 나아가 장기이식동물 및 고가의 의료용 단백질 생산가축을 개발하기 위한 원천기술 확보에 있다. 섬유소분해 유전자의 크로닝 및 조직 특이적 발현벡터를 개발하기 위하여, 우선 소의 위중 제4위 내의 미생물로부터 전체 유전자를 분리하였고, 이렇게 작성된 DNA library에서 섬유소분해 관련 유전자인 약 2.0 kb의 Cel D유전자를 크로닝하였으며, 췌장 특이적 발현 프로모터(rat elastase I: 약 200bp)를 크로닝한 후, 미세주입용 형질전환 재조합 벡터를 구축하기 위하여 rElastase I 프로모터 하류에 섬유소 분해 유전자(Cel D)를 연결하여 약 3.0 kb 크기의 재조합 벡터를 준비하였으며, 재조합 유전자를 1세포기 수정란 전핵내에 미세주입 하기 위해 Sal I과 BglII를 이용 유전자 단편을 만들었다. 구축된 유전자를 미세주입하기 위한 수정란을 회수하기위해 총68두의 돼지를 4-5두씩 분리사육하면서 발정동기화 및 과배란 유기를 위해 PG600, Altrenogest, FSH, hCG를 투여하였으며 hCG투여후 약54시간에 외과적 방법에 의해 총 1,359개의 수정란을 회수하였고, 이중 미세주입가능한 1세포기 수정란은 1,296개로 두당 평균 15.9개 였다. 1,296개의 1세포기 수정란 중에서 재조합 유전자(rE I-CelD)가 미세주입된 660개의 수정란을 32두의 수란돈에 외과적 방법에 의해 이식하였으며, 이식되어진 모돈 13두가 분만하여 40.6%의 임신율을 나타내었다. 이렇게 분만된 13두에서 총 65두(암:33두, 수:32두)의 자돈이 생산되었으며, 형질전환 여부를 판명하기 위해 자돈의 꼬리조직으로 부터 genomic DNA를 추출하고 PCR 검정을 실시하였다. PCR 검정 결과, 섬유소 분해 유전자가 도입된 자돈은 5두 이었으며, 그 결과를 Table에 나타내었다.(Table Omitted) Table 1 에서와 같이 섬유소 분해효소유전자가 형질전환된 자돈은 65마리 중 5마리로 7.69%의 형질전환율을 나타내었으며, 5마리의 자돈중 2두(암:1두, 수:1두)는 분만 후 즉시 폐사되었으며 2두(암:1두, 수:1두)는 86일령 그리고 14일령에 폐사하여 현재 1두(암)가 생존하여 섬유소 분해 사양 실험 중에 있다.

• Korean Journal of Plant Resources
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• v.12 no.1
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• pp.50-61
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• 1999

The leaf morphological and anatomical characters about 17 taxa of Aster and its allied taxa were investigated to estimate taxonomic values. Leaf shapes of the treated taxa were divided into five types; elliptic, spathulate, lanceolate, linear, ovatodeltoid. These types were fixed in same taxa, but variable among different taxa, therefore useful as taxonomic character. Leaf margins were divided into four types; entire, serrate, dentate, incised, these types were invariable in most taxa, but variable among individual in same taxa such as Kalimeris incise, Aster spathulifolius. The size and shape of leaf epidermal cell, the size and distributional numbers per 10$\textrm{mm}^2$ of stomata, deposit feature of cuticle were not distinguished clearly from treated taxa, but presence of stomata on adaxial surface, size and distributional numbers per 10$\textrm{mm}^2$ of stomata were useful taxonomic characters in some taxa such as Gymnaster koraiensis, Aster altaicus var. uchiyamae, Aster tripolium, Heteropappus arenarius. The leaf trichomes were divided into five types by basic form, sculpturing on their outer surface and cell arrangement; uniseriate granulate conical type, uniseriate psilate conical type, uniseriate psilate filiform type, globular type, biseriate vesicular capitate type. In spite of various habitat, basic morphology of trichomes were not changed, therefore, it was thought to be good taxonomic character.

• Proceedings of the Korean Society of Tobacco Science Conference
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• 1997.10a
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• pp.134-152
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• 1997

Plant viruses of tobacco including tobacco mosaic virus (TMV) and potato virus Y (PVY) cause severe economic losses in leaf-tobacco production. Cultural practices do not provide sufficient control against the viruses. Use of valuable resistant cultivars is most recommendable for the control of the viruses. However, conventional breeding programs are not always proper for the development of virus-resistant plants mostly owing to the frequent lack of genetic sources and introduction of their unwanted properties. Therefore, we tried to develop virus-resistant tobacco plants by transforming commercial tobacco cultivars, NC 82 and Burley 21, with coat protein (CP) or replicase (Nlb) genes of TMV and PVY necrosis strain (PVY-VN) with or without untranslated region (UTR) and with or without mutation. Each cDNA was cloned and inserted in plant expression vectors with 1 or 2 CaMV 35S promotors, and introduced into tobacco leaf tissues by Agrobacterium tumefaciens LBA 4404. Plants were regenerated in kanamycin-containing MS media. Regenerated plants were tested for resistance to TMV and PVY In these studies, we could obtain a TMV-resistant transgenic line transformed with TMV CP and 6 genetic lines with PVY-VN cDNAs out of 8 CP and replicase genes. In this presentation, resistance rates, verification of gene introduction in resistant plants, stability of resistance through generations, characteristics of viral multiplication and translocation in resistant plants, and resistance responses relative to inoculum potential and to various PVY strains will be shown. Yield and quality of leaf tobacco of a promising resistant tobacco line will be presented.

• Bulletin of Food Technology
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• v.3 no.3
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• pp.24-33
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• 1990

• Proceedings of the Plant Resources Society of Korea Conference
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• 1997.03b
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• pp.46-46
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• 1997

• Proceedings of the Botanical Society of Korea Conference
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• 1994.07a
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• pp.141-176
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• 1994