• KSBB Journal
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• 제9권3호
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• pp.299-305
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• 1994

15년생 주목의 부위별 단위 질량당 taxal 함량은 줄기수피, 뿌리수피, 잎 그리고 종자의 순으로 높았 고, 종자에서는 종피 (seed caa t), 배 (embrya) 그리 고 배유(endasperm)의 순으로 taxal 함량이 높게 측정되었다. 15년생 주목 1그루로부터 이론적으로 얻을 수 있는 taxal의 양은 1.68g이었는데 잎, 줄기 수피, 뿌리수피, 종자로부터 각각 48.0, 23.8, 27.9 빛 0.4%씩 얻을 수 있었다. 주목의 taxal 함량은 서식 고도에 따라 차이가 있었다. 해발 1000m 이상 의 높은 고도에서 서식하는 주목의 taxal 함량이 낮은 고도(600-800m)에서 서식하는 주목보다 높았다. 주목 세포배양 결과 callus 및 현탁배양 세포에 셔 taxal이 검출되었으며 함량은 서l포의 상태 및 주 목의 종류에 따라 서로 차이가 있었다. 이라한 결과로 주목 세포배양에 의한 taxal 생산의 가능성을 확 인할 수 있었다.

• 한국생물공학회:학술대회논문집
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• 한국생물공학회 2000년도 춘계학술발표대회
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• pp.321-324
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• 2000

식물세포의 장기보존방법 연구를 위하여 참당귀(Angelica gigas Nakai) 현탁세포를 이용하여 동결보존을 수행하였다. 최적의 예비성장배지로는 0.7 M sucrose를 첨가하여 6일간 배양한 것이 가장 좋았으며, 동결보호제로는 1 M sucrose, 1 M glycerol, 1 M DMSO를 혼합하여 사용하였을 때 가장 좋은 결과를 나타내었다. 동결 시에는 처음 8시간 동안 deep freezer에서 천천히 냉동을 한 후 액체질소에 넣는 것이 가장 좋은 것으로 나타났다. 또한 여러 가지 삼투압 증진제를 사용한 실험을 수행한 결과 sucrose가 가장 좋은 결과를 나타내었는데 이것은 sucrose가 삼투압 증진제 역할뿐만 아니라 cell membrane을 보호하기 때문으로 사료된다.

• 한국연초학회지
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• 제21권1호
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• pp.64-69
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• 1999

The effect of phytohormones, light and phosphate on in vitro production of ubiquinone 10 from the suspension cultures of Nicotiana tabacum cv. Xanthi callus was investigated. The inoculum size and cultured time in the suspension culture had to be at least over 2 % of medium volume at 15 days for the excellent growth of Xanthi callus. The growth of Xanthi callus in the suspension culture was improved by addition of NAA and 2,4-D, especially NAA 1.0mg/1 alone, at the light condition. The optimal concentration of phytohormone was 0.1 mg/l 2.4-D and 1.0 mg/l NAA for productivity of ubiquinone 10 in the suspenseion of Xanthi callus. Addition of 3mM KH$_2$PO$_4$ to the medium was more effective in promoting ubiquinone-l0 formation than other concentration in the light condition. Content and production of ubiquinone-l0 in the suspension cultures of Xanthi callus were the highest at the MS media containing 0.5mg/L kinetin, 0.5mg/L 2,4-D, 1.0mg/1 NAA, 3mM phosphate and 2 % inoculum in the light.

• KSBB Journal
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• 제7권3호
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• pp.209-215
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• 1992

당근 현탁배양세포에서 세포벽 합성 효소인 GSII의 활성에 다가양이온의 작용기작을 조사하였다. 다가양이온의 특성을 가진 poly-L-Iysine과 poly-L-ornithine은 GSII의 활성을 40~50% 정도 촉진 시켰으며, ATP도 NaF도 이와 비슷한 결과를 나타냈다. 한편 poly-L-Iysine과 poly-L-ornithine은 막투과성에는 영향을 미치지 못하였으며, protein kinase의 활성제인 TPA는 GSII의 활성을 대조구에 비해 35%정도 증가시켰고 억제제인 H-7은 30%정도 감소시켰다, 이러한 결과들은 다가양이온이 인산화 과정을 통해 GSII의 활성을 증가시켜 세포벽의 합성을 증진시키리라 사료된다.

• 한국동물학회지
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• 제39권3호
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• pp.239-247
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• 1996

현탁 배양액에서 생쥐 배아주 세포를 배아체(embryoid body. EB)로 분화시키는 간단한 시험내 모델 체계가 초기 적혈구 분화 분석에 유용한 지의 여부를 조사하였다. 분화중인 배아체로부터 각 혈구계열 세포 유형이 만들어지는 지(분화능)의 여부는 혈도형성, benzidine 염색법 및 2단계 콜로니 분석법을 조사하였고, 발생과 분화시기에 바ㅈ추어 적혈구 표시 유전자들이 발현되는 지(발현능)의 여부는 각 분화시기별 배아체로 부터 추출한 RNA를 RT-PCR 방법으로 조사하였다. 분석 결과, 다른 기존의 복잡한 분화 방법에 의한 것과 마찬가지로 모든 혈구계열 세포 유형이 반복성 있게 유도되었다. 더군다나, 분화중인 배아주 세포에서의 글로빈 유전자 발현 전환은 생쥐 배아에서와 유사하게 진행되었으며, 글로빈 유전자의 발현은 적혈구-특이 전사인자인 GATA-1과 Tal-1보다 적어도 12시간 늦게 활성화되었다. 이와같이 간단한 분화 체계에서도 적혈구 분화과정이 효율적으로 반복성 있게 나타나는 것으로 보아, 간단한 현탁배양에서의 분화는 초기 적혈구 분화과정이 분자적 기작을 분석하는데 유용하게 이용될 수 있으리라 본다.

• 한국식품영양과학회지
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• 제38권8호
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• pp.1118-1123
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• 2009

쌀을 이용한 새로운 probiotic food를 개발하기 위한 기초연구로 본 연구를 수행하였다. 먼저 호화시킨 현미 현탁액에 $\alpha$-amylase, $\alpha$-amylase와 glucoamylase를 처리한 후 동결 건조하여 가수분해도가 상이한 현미 분해물을 제조하였다. 김치에서 분리한 유산균인 Ln. mesenteroides KC51 균주를 4%(w/w) 현미 분해물 현탁액에 진탕배양하면서 현미의 가수분해도가 산의 생성, 균의 생육과 phytate의 분해에 미치는 영향을 조사하였다. 동시에 효소를 처리하지 않은 현미 분말 현탁액을 대조군으로 비교하였다. 배양액의 pH는 현미의 가수분해도가 증가함에 따라 감소하였으며 $\alpha$-amylase와 glucoamylase로 분해한 경우 접종 후 15시간에 pH 3.41로 급속히 감소하였다. 이때 배양액에 젖산과 초산이 각각 0.327%와 0.200% 함유되어 있었다. 적정산도의 변화도 pH의 변화와 유사하게 가수분해도에 비례하여 증가하였다. 모든 현미의 분해물에서 Ln. mesenteroides KC51 균주는 접종 후 6시간에 $4.0\sim7.2{\times}10^8$ CFU/g 수준까지 증가한 후 생육에 큰 변화는 없었으나 대조군에서는 접종 9시간 후 생균수가 다소 감소하였다. 항영양인자인 phytate의 함량은 현미가수분해도가 증가할수록 감소하여 $\alpha$-amylase와 glucoamylase로 분해하여 가수분해도가 가장 높은(48.2%) 경우 phytate의 약 50%가 분해되었으며 $\alpha$-amylase로 처리하여 가수분해도가 낮은(22.5%) 경우에서는 거의 분해되지 않았다. Ln. mesenteroides KC51 균주 배양액의 저장성은 $4^{\circ}C$에서 14일간 저장 후 pH와 적정산도, 생균수는 거의 유사하였다.

• Journal of Plant Biology
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• 제32권4호
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• pp.275-283
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• 1989

$\beta$-1, 4-endoglucanase (EC 3, 2, 1, 4) was isolated and purified from Nicotiana tabaccum L. Var. Virginia 115 suspensin cultured cells. The molecular weight as estimated by Sephadex G-100 was about 14, 000. The optimum pH for activity was 5.4. The Km value for carboxymethyl cellulose was 0.18 mg/unit and the enzyme was quite resistant to heating. Polyamine did not affect the activity of $\beta$-1, 4-endoglucanase in vitro but the activity increased drastically when polyamines were added in the suspension culture medium. It is suggested that increase in $\beta$-1, 4-endoglucenase activity due to polyamine might be related to growth of the plant.

• Journal of Plant Biology
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• 제33권2호
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• pp.87-96
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• 1990

The role of S-adenosylmethionine (SAM) as an intermediate in interrelation between polyamine and ethylene biosynthesis was studied in suspension cultures of Nicotiana tabacum L. Exogenous SAM stimulated the polyamine and ethylene biosynthesis in 4 day-cultured cells, which were in active cell divisions, and 10 day cultured cells, which went on with active cell elongation and senescence. SAM-induced ethylene production was more effective in 10 day-cultured cells than in 4 day-cultured cells, but SAM-induced polyamine biosynthesis was more effective in 4 day-cultured cells than in 10 day-cultured cells. Polyamine contents were increased by the blockage of ethylene biosynthetic pathway in the conversion of SAM to ethylene via 1-aminocyclopropane-1-carboxylinc acid (ACC) with aminooxyacetic acid (AOA). Also, ethylene production was increased by the inhibitors of polyamine biosynthesis such as methylglyoxal bis-(guanylhydrazone) (MGBG), dicyclohexylamine (DCHA), $\alpha$-difluoromethylarginine (DFMA) and $\alpha$-difluoromethylorinithine (DFMO). These results suggest that there may be interrelations between polyamine and ethylene biosynthesis for the competition of SAM and the inherent mechanism of switch on-off in polyamine and ethylene biosynthetic activity with the progress of cell growth and senescence.

• KSBB Journal
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• 제13권1호
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• pp.26-30
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• 1998

The suspension cultures of Mentha piperita produce menthol which has very low solubility in water due to its hydrophobicity. This can be considered as a factor for its low production in the suspension suspension cultures. Cyclodextrin has the hydrophobic cavity inside the molecule in which menthol can be captured and allow to form a stable complex. The suspension culture of Mentha piperita showed 70% higher production enhancement in the medium containing 1.5%(w/v) $\beta$-cyclodextrin than the control. $\beta$-cyclodextrin had no adverse effect on the cell growth and showed the best result among $\alpha$-, $\beta$- and $\gamma$-cyclodextrins tested in terms of menthol production. We demonstrated that $\beta$-cyclodextrin can be used to enhance the production of menthol in the suspension cultures by capturing hydrophobic menthol into the cavity of cyclodextrin molecules.

• Journal of Plant Biology
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• 제36권1호
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• pp.19-27
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• 1993

Effects of polyamines on DNA synthesis were studied in synchronized culture of Nicotiana tabacum L. When DFMO and DFMA, inhibitors of ornithine decarboxylase and arginine decarboxylase, respectively were initially applied to the cells, the polyamine contents were rapidly dropped and [methyl-3H] thymidine incorporation into DNA was markedly reduced during the early stage of culture period. Inhibition of DNA synthesis, however, was partially reversed when these inhibitors were applied simultaneously with putrescine. In addition, exogenous administration of putrescine also increased the DNA synthesis during the all over the culture period. In vitro activity of DNA polymerase from Nicotiana tabacum L. was promoted by increasing concentrations of polyamines in the reaction mixture. Maximal activity was shown at 5 mM putrscine, 0.5 mM spermidine and spermine, respectively. Lack of Mg2+ ion in the reaction buffer resulted in an inhibition of the enzyme activity by about 30%. The inhibition could not be completely reversed by application of polyamines at optimal concentrations. These results suggest that polyamines promote the DNA synthesis in vivo and in vitro by stabilizing the DNA-helix upon binding to negatively charged groups on DNA or increasing the activity of DNA polymerase in Nicotiana tabacum L.