• Title/Summary/Keyword: 현미경관찰법

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마이크로파에 의한 생체물질 고정효과

  • 손태호
    • The Proceeding of the Korean Institute of Electromagnetic Engineering and Science
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    • v.5 no.3
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    • pp.78-87
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    • 1994
  • 생물학 및 의학등의 생명과학에서는 현미경을 이용하여 생체물질 즉, 생체조직을 관찰하고 이에 대한 조직의 검사 결과를 판정하고 발표한다. 이때 필히 고정과정(fixation process)을 거쳐야 한 다. 즉, 생체조직중 조직의 구조, 특정 세포나 바이러스 및 효소등을 관찰할 때 고정과정을 거쳐 조직을 절편하고 이를 염색하여 현미경으로 검사하게 된다. 고정과정이란 생체물질을 안정화시키고 자기분해 혹은 부패를 방지하여 보존이 가능하도록 변화시키 는 과정으로, 조직내의 용해성 물질을 불용성 물질로 변형시키는 과정이다. 고정과정을 거친 생체조직 은 구조를 보존하고 있기 때문에 조직의 훼손이 없는 상태에서 절편이 가능하고 또한 염색상태를 좋게 하며 관찰시 contrast를 증진시킨다. 만약 고정과정을 거치지 않으면 물질의 세포막이 파괴되고 단백질 등의 물질이 용해되어 조직의 변형을 일으켜 제대로 조직을 관찰할 수 없게 된다. 고정과정에는 크게 화학적 고정법과 물리적 고정법이 있다. 화학적 고정법은 생체조직을 화학용액에 처리하는 방법이며, 물리적 고정법은 직접적인 열 혹은 초음파등으로 물질을 고정시키는 방법이다. 표 면과 내부의 열전도가 달라져 고정이 균일하게 되지 않는 단점을 가지고 있기 때문에 보통 2~6일의 고 정시간을 요하는 화학적 고정법을 사용하고 있다. 따라서 조직에 대한 총 검사시간이 최소 6일에서 최 대 12일이 요구된다. 병원등에서 조직검사의 결과가 늦게 발표되는 사유는 바로 화학적 고정법을 사용 하여 생체조직을 관찰하고 그 결과를 판정하기 때문이다. 본 고에서는 마이크로파를 이용하여 약 3시간만에 조직의 상태를 관찰할 수 있는 고정법을 소개한다. 마이크로파를 이용하여 조직을 고정하는 고정방법을 기존의 고정법과 비교하여 이들의 장단점을 나타 낸다. 본 연구자에 의해 개발된 마이크로파 고정기를 소개하고, 이를 이용하여 생체물질을 고정한뒤 절 편, 염색하여 현미경 관찰결과를 발표하여 본 연구의 방법이 기존 방법보다 우수함을 나타낸다.

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TEM Sample Preparation for Cultured Neurons on a Glass Coverslip (Hydrofluoric acid 용액을 이용한 유리 커버글라스에 배양된 신경세포의 전자현미경 시료제작법)

  • Oh, Hyun-Woo;Park, Ho-Yong
    • Applied Microscopy
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    • v.35 no.4
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    • pp.10-15
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    • 2005
  • Cultured neurons from Drosophila brain on a glass coverslip to understand the structural basis of synapse were prepared for TEM observations. Neurons on a coverslip were fixed, dehydrated and embedded in Epon without separating from coverslip. After polymerization, the block was placed in 49% hydrofluoric acid to remove the coverslip. The block was examined under a light microscope to select exact neurons, then trimmed and sectioned for TEM observation.

Observation of Dendritic Spines of Purkinje Cell Using High-Voltage Electron Microscopy (고압전자현미경을 이용한 소뇌 조롱박세포 가지돌기가시 관찰)

  • Rhyu, Im-Joo;Lee, Kea-Joo;Suh, Young-Suk
    • Applied Microscopy
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    • v.31 no.1
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    • pp.1-8
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    • 2001
  • The morphological features of neuronal dendritic spines are changed their shapes, sizes and density in response to physiological or pathological conditions . Therefore, exact analysis of spines warrants understanding of neuronal function. The size of the spine is at the borderline of resolution with light microscopy. High voltage electron microscopy Provide excellent resolution of the spines with proper stain techniques thanks to its higher resolution and penetration power. We evaluated more effective staining method for observing dendritic spines after labeling Purkinje cells with anti-calbindin 28 kD immunohistochemistry or Golgi staining methods. 4 fm thickness sections were observed with high voltage electron microscopy and some morphometric analyses were performed. Both Golgi staining and immunohistochemistry revealed the detail structures of the Purkinje cell such as soma, dendrites, and dendritic spines. High voltage electron micrographs with Golgi staining provide more precise morphology and are easy to measure. Average density of spine is $24.5{\pm}3.6/10{\mu}m$ and its length is $1.12{\pm}0.22{\mu}m$. For quantitative analysis of the spines, high voltage electron, micrographs with Golgi staining are more effective. This preliminary result is expected to be useful for further study of spine plasticity in various conditions.

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Surface Morphology Characterization of Nonpolar ZnO Thin Films Grown by Plasma-Assisted Molecular Beam Epitaxy (플라즈마 분자선 에피탁시 법으로 성장된 비극성 ZnO 박막의 표면 형상 분석)

  • Lee, Jae-Uk;Lee, Jeong-Yong;Han, Seok-Gyu;Hong, Sun-Gu
    • Proceedings of the Korean Institute of Surface Engineering Conference
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    • 2007.04a
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    • pp.161-162
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    • 2007
  • (1-102) R-면 사파이어 기판 위에 플라즈마 분자선 에피탁시 법으로 성장시킨 비극성 ZnO 박막의 표면 형상을 원자력간현미경(AFM) 및 투과전자현미경으로 분석하였다. AFM 관찰 결과 ZnO<0001> 방향으로 길쭉한 제방 모양의 표면 형상이 나타남을 알 수 있었고, 고분해능 투과전자현미경 관찰을 통해 박막 성장 중에 관찰되는 V(chevron 모양) 형상의 in-situ RHEED 패턴을 야기시키는 박막 표면의 facet 면을 원자 level에서 확인하였다.

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Crystallization of srAl2O4 Synthesized by the Polymerized Complex Method (착체중합법으로 합성한 srAl2O4의 핵생성 관찰)

  • 김형준;박정현
    • Journal of the Korean Ceramic Society
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    • v.41 no.6
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    • pp.439-443
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    • 2004
  • SrAl$_2$O$_4$ powder was prepared by polymerized complex method and its nucleation was observed at different temperatures and times. Problems of inhomogeneity and high synthesis temperature induced by solid state reaction could be solved by using polymeric precursors. The process of decomposition by heat treatment above 40$0^{\circ}C$ was observed by Scanning Electron Microscopy (SEM) and elemental analyzer. Crystallization of SrAl$_2$O$_4$ occured at about 90$0^{\circ}C$ and its crystalline size. which was determined by using Transmission Electron Microscopy (TEM) and X-Ray Diffractometer (XRD). was about 30∼50 nm.