• 미생물학회지
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• 제38권4호
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• pp.235-240
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• 2002

식품폐수처리장의 활성슬러지와 논, 밭의 토양에서 우수한 protease 생성 균주을 분리 선별하였다. 이 중 효소활성이 우수한 PB16은 그람 음성, 간균이며 protease activity는 6.49 U/ml이었다. 생리, 생화학적 특성 및 16S rRNA 염기서열분석을 실시한 결과, Aeromonas hydrophila (99.0%) 인 것으로 확인 되었다. Bioscreen C를 사용한 최적 성장조건 평가는 합성폐수에 vitamin과mineral을 첨가한 배지의 중식속도(0.26 $h^{-1}$)가 무 첨가배지(0.21 $h^{-1}$)보다 높았으며, 분리균주의 합성폐수 유기물 제거능 실험에서는 초기 soluble-CODcr 2,472 mg/l인 고농도 합성폐수를 1일, 3일 반응 후 각각 59, 87%의 제거율을 나타내었다.

• The Korean Journal of Ecology
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• 제17권2호
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• pp.143-148
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• 1994

The relationships between microbial activity and physico-KDICical characteristics of soils were investigated in three golf courses of Kwanak, Gold and Korea Country Clubs, with different open years. The soil samples were collected in tee, fairway and rough. There were ranges of 4.80-5.55 in pH, $25.55-98.50{\mu}S$ / cm in conductivity, 10.96-16.73% in moisture content, 0.18-0.36g / g in water holding capacity, 3.68-5.39% in organic matter, and 0.10-0.25% in total nitrogen. Dehydrogenase activity(DHA) as an index of soil microbial activity was determined. DHA values of soil were $69.83-314.43{\mu}$g / g in three courses and showed the order of Kwanak>Gold>Korea Country Club with open year. This indicates that DHA was affected by several fertilizer treatments rather than herbicide and pesticide treatments. DHA was significantly different with golf clubs as well as golf courses and positively correlated with water holding capacity and total nitrogen.

• The Korean Journal of Ecology
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• 제16권2호
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• pp.191-198
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• 1993

The relationships between microbial activity and disturbance level of soil were investigated from 15 parks in Seoul and undisturbed area. The physico-chemical characteristics of soil and dehydrogenase activity(DHA) as an index of soil microbial activity were analysed. There were ranges of 3.84~7.37 in pH, 9.63~40.33% in moisture content, 3.41~21.49% in organic matter, 0.36~0.79g/g in water holding capacity and 0.03~0.53% in total nitrogen investigated sites. DHA values of soil were 8.64~$146.76{\mu}g/g$ in park soil and 545.14~$1, 198.80{\mu}g/g$ in undisurbed area. DHA of park soil with high traffic density and contamination source from human activities was much lower than that of undisturbed area. DHA was positively correlated with moisture content, organic matter, water holding capacity and total nitrogen.

• 한국균학회지
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• 18권2호
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• pp.70-76
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• 1990

Cellulose를 분해하는 균주를 자연토양으로부터 분리하여 형태적 관찰, 생리적 특성 등을 검토하였고 F.P Cellulase, CMCase, ${\beta}-glucosidase$의 활성을 측정하였다. 11속, 21종이 동정되었으며 속분류검색에 있어 기본적인 차이점을 보이는 5종을 선정하였다. 동정 결과는 Acremonium sp., Trichoderma viride., 미동정된 Trichoderma SP., Verticillium intertexum., verticillium malthousei 이었다. 효소활동은 Trichoderma viride로 동정된 균주가 비교적 높아보였다.

• 한국식품과학회지
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• 제29권5호
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• pp.1028-1032
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• 1997

Cellulose를 효과적으로 분해하는 효소를 생산하는 미생물인 strain No. 33 균주를 토양으로부터 분리하였다. 본 균주의 배양상등액을 2.0%의 CMC가 함유된 agar 평판배지에 paper disc법을 이용하여 loading 후 cellulose 분해활성을 검토하였을 때, disc 주위로 노란색의 환이 형성되는 것을 확인할 수 있었다. 본 균주를 동정하기 위하여 전자현미경으로 그 형태를 관찰한 결과 본 균주는 간균의 형태였으며, 생리학적 특성을 검토한 결과 Bacillus속으로 동정되었다. 이에 본 균주를 Bacillus sp. No. 33으로 명명하였다. 본 균주는 1.0% glucose, 3.0% yeast extract, 0.5% $KH_2PO_4$, 0.02% $MgSO_4{\cdot}7H_2O$가 함유된 pH 7.0의 배지에서 $30^{\circ}C$로 39시간 동안 진탕배양하였을 때 최대 균체생육을 나타내었다. 효소생산은 4.0% CMC, 2.0% yeast extract, 0.5% $KH_2PO_4$, 0.04% $MgSO_4{\cdot}7H_2O$, pH 7.0의 조건에서 $30^{\circ}C$, 42시간 동안 진탕배양하였을 때 최대 효소생산을 나타내었다.

• 유기물자원화
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• 제10권2호
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• pp.100-116
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• 2002

농작물에 영양분을 공급하거나 식물의 생장촉진, 식물 병원균의 억제 등을 위하여 토양에 미생물이 투입된다. 대표적인 예가 질소고정 공생세균과 Pythium, Rhizobium 등이다. 이들이 투입되어 성공적으로 작용하려면 생존하여 충분한 밀도로 집략을 형성하여야 한다. 이들의 생존과 집략화에 미치는 영향은 생물적인 인자와 비생물적 인자에 의해 좌우된다. 생물적 인자중에서 중요한 것은 포식과 경쟁, 비생물적 인자 중에서 중요한 것은 물의 장력 유기탄소, 무기영양분(N, P), pH 등이다. 토양의 토성과 소공극 분포도 투입된 미생물의 생존과 활착에 중요한 역할을 담당한다. 또한 미생물에 대한 토양생태계의 선택성은 접종 세포 개체군의 활착에 있어서 중요하다. 예를 들면 항생제의 사용에 의한 토착미생물의 제어, 계면활성제를 분해하는 Psendomonas종을 투입하는 경우이다. 투입미생물의 활착을 증진시키기 위하여 이탄, 점토 등의 수송체를 동시에 첨가할 수 있는데 이들은 투입미생물에게 보호적인 미소서식지를 만듦으로서 토양중에서 세균을 보호할 수 있다. 또한 세균이나 공업용 효소를 부동화시키기 위한 수송체로서 유기성 중합체가 사용되고 있다. 이러한 물질들의 예를 들면 아질산칼륨, agarose, k-carrageenan 등이다. 이들도 미소서식처를 제공하므로서 투입미생물의 활착을 돕는 역할을 한다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제5권4호
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• pp.177-184
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• 1977

Arylsulfatase는 간단한 Phenols류의 황에스테르 화합물로부터 S $O_{4}$$^{[-992]}$ - 이온의 유리를 촉매한다. 이 효소는 토양센균을 포함한 많은 미생물과 동식물의 조직등에 널리 분포하여 있으며 이와 같은 넓은 분포는 이 효소의 기본적 기능이 환경학적으로 매우 중요한 의미를 갖는다고 하겠다. Arylsulfatase에 대한보고는 Klebsiella sp를 사용하여 몇몇 보고가 있다. 본 연구는 6종의 Serratia sp를 사용하여 arylsulfatase 합성조건을 검토하고 효소의 정제조건과 성질에 대하여 조사하여 Serratia marcescens를 선정하였다. Serratia mrcescens는 탄소원으로서 xylose rhamnose, glucosamine 그리고 arabinose등과 같은 몇몇 당을 이용하지 못했으며 glucose와 mannitol을 잘 이용하였으나 glucose methioniue의 경우 효소 합성을 억제시키었다. 유황원으로서는 무기유황염과 methionine의 첨가는 억제되었으며 tyramine의 첨가에 의해서 효소 함성의 억제효과는 해제되었다. 효소의 정제는 황산암모늄 포화용액의 분획과 DEAE-Cellulose, CM-Cellulose 그리고 DEAE-Sephadex A-25로 연결되는 구분 분획에 의해서 행하여졌다. 효소의 분자량은 SDS-gelelectrophoresis와 Sephadex G-100 column chromatography에 의하여 각각 46,000과 49,000으로 측정되었고 최적 PH는 6.8이었다. P-Nitrophenyl sulfate를 사용한 Km과 Vmak치는 각각 2.5$\times$$10^{4-}$M과 20 nmoles/min/mg protein이었다. 기질에 대한 특성은 phenylsulfte와 ο-, p-nit-rophenyl sulfate 그리고 p-nitro catechol sulfate에 대해서 높은 활성을 보였다. Hydroxylamine, inorganic fluoride, sulfide 그리고 Phosphate등은 강한 효소 저해작용을 나타내었고 무기유산염은 저해작용을 보여주지 않았다. Tyramine, octopamine그리고 dopamine과 같은 amino acid 또한 강한 저해 작용을 보였다.

• 미생물학회지
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• 제32권1호
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• pp.91-95
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• 1994

토양에서 분리된 Enterobacter agglomerans CBNU45는 type II 제한효소인 EagBI을 생산하고 있음을 발견하였다. EagBI을 DEAE-cellulose, phosphocellulose P11, hydroxylapatite column chromatography를 거쳐 부분 정제하여 그 특성을 알아보았다. EagBI은 여섯개의 염기배열 5’-CGAT${\downarrow}$CG-3’을 인식하고 T 와 C 사이를 절단하여 두개의 염기가 3’-말단쪽으로 돌출된 cohesive end를 형성하였다. EagBI의 반응 최적조건은 10mM Tris-HCl(pH 7.8), 6~10mM $MgCl_2$, 37${\circ}C$이었으며 NaCl이 없는 반응 완충용액에서 가장 좋은 활성을 보였다. EagBI은 $dam^-$와 $dam^+$ 메칠화 DNA도 절단할 수 있으며 65${\circ}C$에서 10분 동안 열처리하였을 때 효소의 활성을 상실하였다. 따라서 EagBI은 PvuI의 isoschizomer이나 NaCl 요구성과 열안정성에서 PvuI보다 편리한 제한효소로 확인되었다.

• 미생물학회지
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• 제40권4호
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• pp.320-327
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• 2004

대전 근교의 유류로 오염된 토양으로부터 유류를 분해하는332개의 세균 콜로니를 분리한 후 이 중 lipase 활성이 우수한 한 균주를 최종 선별하여 생리생화학적 조사와 16S rRNA 염기서열분석 등을 통하여 동정한 결과 Acinetobactor sp. B2로 확인되었다. 최종 선별된 Acinetobactor sp. B2는 trehalose, mannitol을 제외한 다양한 당을 이용하였고, kanamycin, streptomycin, tetracycline, spectinomycin의 항생제에 대해서 약한 내성을, 그리고 Ba, Li, Mn, Al, Cr, Pb 등의 중금속에 대해서는 mg/ml 단위까지 강한 내성을 나타냈고 생장 최적 온도는 $30^{\circ}C$로 확인되었다. Acinetobactor sp. B2에서 정제된 lipase의 분자량은60 kDa이었고, 이 효소의 최적 온도와 PH는 각각 $40^{\circ}C$와 pH 10이었다. 그리고p-nitrophenyl palmitate (pNPP)를 가수분해하는데 필요한 활성에너지는 $4-37{\circ}C$의 범위에서 2.7 kcal/mol 이었고, $60^{\circ}C$ 이상의 온도에서는 불안정한 효소임이 확인되었다. 또 pNPP에 대한 이 효소의 Michaelis constant (Km)와 최대속도상수 $(V_{max})$값은 각각 21.8 ${\mu}M$과 $270.3\;{\mu}M\;min^{-1}mg^{-1}$ 이었고, 이 효소는 $Cd^{2+},\;Co^{2+},\;Fe^{2+},\;Hg^{2+},$ EDTA, 2-mercaptoethanol에 의해 강하게 억제되었다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제18권6호
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• pp.599-606
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• 1990

근해 연안 토양으로부터 Chitinase 활성이 우수한 균주를 분리하여 Aeromonas salmonicida로 동정하였으며, 분리균주의 효소생산 최적조건은 colloidal chitin 1.26, tryptone 2.95, $MgSO_4-7H_20$0.15, $K_2HP0_4$, 0.15, pH8.5, 27'C에서 48시간 진탕배양하였을 때였다. 효소의 정제는 배양액으로부터 ammonium sulfate 침전, affinity adsorption, hydroxylapatite chromatography, gel filtration을 통해 수율 29.7, 정제도 18.5배의 정제효소를 얻었다. 정제된 chitinase의 최적온도와 pH는 $50^{\circ}C$와 7.0이었고 pH 안정성은 pH5.0-9.0 사이였고 $50^{\circ}C$까지 안정하였으며 Km값은 1.276mg/ml, 분자량은 200,000 daltons으로 확인되었다.