• 제목/요약/키워드: 천잠

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천잠 세크로핀 항균펩타이드 분리 및 정제 (Isolation and purification of a cecropin-like antimicrobial peptide from the japanese oak silkworm, Antheraea yamamai)

  • 김성렬;구태원;최광호;박승원;김성완;황재삼;강석우
    • 한국잠사곤충학회지
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    • 제50권2호
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    • pp.145-149
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    • 2012
  • 세크로핀(cecropin)은 곤충의 체액성 면역에 있어서 효과적인 방어인자로 작용하는 항균 펩타이드로 잘 알려져 있다. 본 연구에서는 면역 유도된 천잠, Antheraea yamamai 유충 혈림프로부터 세크로핀 항균 펩타이드 분리 및 정제를 실시하였다. 먼저 항균 펩타이드를 분리하기 위해서, 면역 유도된 유충 및 정상 유충으로부터 추출된 혈림프 단백질 시료에 대한 단백질 전기영동(SDS-PAGE)를 통하여 비교분석하였다. 정상누에 혈림프 시료에 비해 면역 유도된 혈림프 추출물에서만 특이적으로 발현되는 분자량 4,223.01 Da의 펩타이드 밴드를 검출하였다. 선발된 면역유도 특이적 발현 펩타이드의 특성 분석을 위해서 이온교환 크로마토그래피 및 gel permeation 크래마토그래피을 수행하여 특이적으로 발현되는 펩타이드를 성공적으로 순수 정제하였다. 정제된 펩타이드는 Edman degradation법으로 N말단 아미노산 서열을 결정하였고 다른 나비목곤충의 세크로핀과 매우 높은 상동성을 나타내어 세크로핀으로 동정하였다. 또한 정제된 천잠 세크로핀 항균 펩타이드는 그람음성세균, 그람양성세균 및 곰팡이에 대해 폭 넓은 항균 스펙트럼을 나타냈었다.

실내외 사육에 의한 천잠 우량계통 육성 (Breeding of Major Characteristics of the Wild Silkmoth, Antheraea yamamai indoor-and outdoor-reared)

  • 윤형주;강필돈;김삼은;이상몽
    • 한국잠사곤충학회지
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    • 제48권2호
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    • pp.61-67
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    • 2006
  • 천잠의 우량형질 선발을 위하여 실내와 야외에서 사육하면서 수정율, 부화율, 용화율, 전견중 등을 비교 조사하였다. 실내사육 결과, 유충체색에 있어서 강건성은 담록체색이 우수하였으나, 견질은 암록체색이 우수한 것으로 나타났다. 전견중에 따라 분리된 등급간에는 약간의 차이가 인정되었다. 또한 $F_1$ 교잡종은 수정율과 부화율은 원종보다 떨어졌으나, 용화율과 견질 등에서 잡종강세효과가 확인되었으나 $F_2$ 교잡종은 효과가 인정되지 않았다. 야외사육의 경우 실내사육에 비해 감잠비율은 낮으나 유실잠이 많은 경향을 보였다. 또한 전견중, 전층중 및 견층비율 등 견질성적 이 실내사육보다 우수하였다.

피부세포 증식에 관여하는 실크단백질 탐색 (Effect of Bombyx mori, Antheraea Yamamai and Antheraea pernyi Silk Protein in Skin Fibroblast Cell Proliferation After Injury)

  • 한상미;이광길;여주홍;권해용;우순옥;백하주;박관규
    • 한국잠사곤충학회지
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    • 제46권2호
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    • pp.72-76
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    • 2004
  • 가잠과 천잠 및 작잠의 실크 단백질 분획물로부터 피부섬유아세포에 대한 증식 효과를 알아본 결과 다음과 같은 결과를 얻을 수 있었다. 1. 가잠 및 천${\cdot}$작잠 단백질로부터 다양한 분자량대의 실크 단백질을 순수 분리 분획화 하여 사람 피부세포(human skin fibroblast; CCD-986sk)에 기계적 상처를 준 후 처리한 결과, 평균분자량(Mw)이 300-500 및 950-1500 분획군이 세포 증식에 뛰어난 효과가 있음을 확인${\cdot}$선발하였다. 2. 가잠의 경우 평균 분자량 590(BM-1), 1400(BM-2)에서, 천잠은 340(AY-1), 940(AY-2), 작잠에서는 300(AP-1), 1440(AP-2)에서 $10\;{\mu}g/ml$의 농도로 처리했을 경우 피부섬유 아세포의 증식이 무처리구에 비하여 40% 이상의 증식 효과를 갖았다. 또한 유효 농도 범위에서 대식세포인 RAW 264.7 세포에 대해서는 세포독성을 지니지 않았다. 3. 아미노산 조성에 있어 저분자량 AY-1 분획의 전아미노산 및 유리아미노산은 Tyr 함량이 매우 높게(25-48 g/100g)나타났으며, 작잠의 저분자 분획인 AP-1에서는 Lys 함량이 높게(5.2 g/100g) 나타남을 확인하였다. 4. 동일한 실크 단백질일 경우 저분자량 분획물에서 피부 세포 증식에 좀 더 효과적이였다.

작잠(Antheraea pernyi) arylphorin의 항체를 이용한 수종의 나비목 야생 견사곤충들 간의 면역학적 비교 (Comparison of Arylphorin of Antheraea pernyi with Those of Several Lepidopteran Wild Silkmoths by Western Blot Analysis.)

  • 박남숙;김미애;박현철;김근기;진병래;이상몽
    • 생명과학회지
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    • 제18권3호
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    • pp.409-413
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    • 2008
  • 작잠 arylphorin 항 혈청을 사용하여 천잠, 가중나무 산누에 나방 및 옥색긴꼬리 산누에나방의 5령 유충의 혈림프, 피부, 지방체, 중장 및 실샘에 대한 종(species) 공통항원의 존재 여부를 비교${\cdot}$검토하였다. 4개종은 혈림프, 피부, 지방체, 중장 실샘 등 종별 조직에 따라 다소간 검출유무의 차이는 있으나 작잠 arylphorin 항 혈청에 대한 공통항원의 존재는 4종의 야생곤충 모두에서 확인되었으며, 특히 혈림프에서 가장 강력한 항원-항체 반응이 관찰되었다. 이상의 결과에서 A. pernyi arylphorin은 천잠 등 4개의 공시곤충들의 공통 조상유전자로부터 유래한 단백질일 가능성이 높은 것으로 사료된다.

천잠 후부 견사선 유래 발현 유전자 꼬리표 작성 및 분석 (Analysis of Expressed Sequence Tags Generated from the Posterior Silkgland cDNA Clones of Antheraea yamamai)

  • 윤은영;구태원;강석우;이혜원;황재삼;김호락
    • 생명과학회지
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    • 제10권2호
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    • pp.188-195
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    • 2000
  • In order to understand molecular events during silk synthesis and provide genetic resources for molecular breeding, we had analyzed the cDNA library constructed from the posterior silkgland of Antheraea yamamai and partially sequenced 276 randomly selected genes from the cDNA library. Database comparisons of the expressed sequence tags (ESTs) revealed that 26 non-redundant clones showed a high similarity with previously identified genes. Among them, 17 clones exhibited a homology with previously identified insect genes and 9 clones were identical to genes that were previously identified from other organisms. A functional categorization showed that silk synthesis-defense- or stress-related genes, as well as genes involved in the metabolic pathways and in the transcriptional or translational apparatus are represented. In this report, the clone (AY479) which had high similarity with fibroin from A. pernyi was particularly analyzed in detail. The AY479 clone was carboxyl terminal region of fibroin. The 472 bp cDNA has 123 amino acids that shared 85% homology with the fibroin from A. pernyi and its deduced peptide had unique feature, that is, sites of alanine rich residues.

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견사곤충에서 Mariner Transposase-like Element의 분자적 동정 (Molecular identification of Mariner Transposase-like Element from Four silkmoths)

  • 이진성;황재삼;김용성;서동상
    • 생명과학회지
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    • 제8권4호
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    • pp.457-464
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    • 1998
  • 누에, 멧누에, 천잠 및 작잠에서의 형질전환용 vector 개발을 위한 첫단계로 이미 인간을 포함한 여러 곤충에서 그 존재가 확인된 mariner transposable element가 이들 견사 곤충에 존재하는지의 여부를 탐색하기 위해서 이미 보고된Drosophila mauritiana와 Hyalophora ceropia의 mariner transposase 유전자의 고도로 보존성이 높은 부위에 대한 degenerctive primer pair를 제작하여 이들의 존재 여부를 탐색하였다. 결과적으로 예상되는 약 500bp의 PCR product가 관찰됨에 따라서 모든 견사곤충의 genome에는 maminer-like element(MLE)가 존재한다는 것을 간접적으로 확인할 수 있었다. 이미 cloning된 pBmoMAR를 probe DNA로하여 southern hybridization을 수행한 결과에서도 확인 할 수 있었으며, 각 견사층의 genome내에 high copy로 존재한다는 것을 추정할 수 있었다. 따라서 이와 같은 결과는 견사곤충에서 MLE가 vector system으로써 개발될 수 있는 기초자료로 제공될 수 있을 것이다.

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누에 난황소(Vitellin)의 분리와 면역학적 특성 및 발육에 따른 함량변화 (Purification and Immunological Properties of Vitellin, and its Quantitative Changes during Embyrogenesis in the silkworm, Bombyx mori)

  • 손기국;문재유
    • 한국잠사곤충학회지
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    • 제30권2호
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    • pp.96-104
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    • 1988
  • 누에 난황단백질의 주성분인 난황소(vitellin)를 분리하고 그 면역반응적 특성과 난소 이식과의 관계 및 배발생중의 양적 변화를 조사한 결과를 요약하면 다음과 같다. 1. 누에의 용혈액 vitellogenin과 난황소는 원심분리에 이은 DEAE-cellulose column chromatography에 의해 거의 순수하게 분리되었으며 두 단백질의 polyacrylamide gel 전기영동상의 이동도는 같았다. 2. 누에의 난황소와 이의 전구물질인 용혈림프 vitellogenin은 면역반응적으로 서로 동질임이 확인되었고, 가잠의 근록곤충인 상잠(Bombyx mandarina)의 난황단백질에는 가잠의 난황소와 면역학적으로 같은 반응을 나타낸 항원이 있는 반면, 천잠(Antheraea yamamai)의 난황단백질에는 가잠과의 공통항원이 없었다. 3. 수누에에 이식한 난소에서 생성된 난황단백질에는 난황소가 결여됨이 확인되어 난황소의 합성에는 난소이외의 다른 암컷 기관에서 생성된 전구물질이 필요함을 나타내었다. 4. 배발생중의 난황소는 배자발육 후기에 주로 기관의 형성에 이용되어 배자발육 초기부터 꾸준하게 이용되는 난특이단백질(ESP)과는 이용상 다른 특성을 보였다.

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충영을 형성하는 외줄면충 (진딧물상과: 매미목)의 생태 (Bionomics of Gall-Forming Paracolopha morrisoni(Aphidoidea: Homoptera))

  • 이원구;황창연
    • The Korean Journal of Ecology
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    • 제22권1호
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    • pp.31-37
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    • 1999
  • 1997년 4월부터 6월 사이에 전북 전주시 천잠산에서 외줄면충(Paracolopha morrisoni Baker, 1919)의 충영 형성과 1차 기주식물인 느티나무 잎의 생장과의 관계를 조사하였다. 외줄면충은 느티나무 가지의 3∼4번째 잎에 많이 분포하며, 주로 잎의 하단 엽맥에 충영을 형성하였다. 충영은 4월 20일 경에 형성되기 시작하였으며, 4월 23일에는 길이(2.98 mm)와 폭(2.24 mm)이 비슷하였으나 길이의 생장이 빨라져 5월 12일에는 길이(11.05 mm)와 폭(6.60 mm)이 최대로 생장하였는데 이는 잎의 길이 생장과 매우 밀접한 상관관계를 나타내었다. 충영을 절개하여 외줄면충의 발육상황을 조사한 결과, 간모가 3번 탈피하여 5월 8일에 간모 성충이 100% 나타났으며 제2세대를 체내에 간직하고 있었다. 5월 19일에는 간모 성충의 84.8%가 사망하였다. 제2세대인 이주형은 5월 12일에 약충이 나타나기 시작하였고 5월 하순에 4회 탈피하여 6월 3일에는 유시 성충이 나타났다. 6월 7일에는 충영의 기부가 열려 유시 성충이 탈출하고 그 후 충영은 갈색으로 변하여 쇠퇴하였다. 이상의 충영 형성과정을 볼 때 간모 세대가 충영의 형성과 생장에 관여하며 제2 세대는 충영의 생장과 관계가 없었다.

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야잠사의 구조특성 및 물리적 성질 (Structural Characteristics and Physical Properties of Wild Silk Fibres; Antheraea pernyi and Antheraea yamamai)

  • 권해용;박영환
    • 한국잠사곤충학회지
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    • 제36권2호
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    • pp.138-146
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    • 1994
  • 야잠사, Antheraea pernyi와 Antheraea yamamai의 구조특성을 살폅기 위하여 x-ray 회절 분석, IR 분광법, 편광현미경 관찰, 아미노산 분석을 행하였으며 섬유밀도, 열적 성질 및 동점탄성 성질을 살펴보았다. 그들의 구조 및 물리적 성질에 대한 결과를 가잠사(Bombyx mori)의 특성과 비교하여 요약하면 다음과 같다. 1. 작잠견사와 천잠견사의 아미노산 조성에는 큰 차이가 없었으나 천잠견사의 경우 반응성이 높은 극성아미노산이 다소 많은 것으로 나타났으며 가잠견사의 경우 glycine, 야잠사는 alanine 함량이 가장 많으므로 이들의 견사의 결정구조 특성에 관여되었다고 할 수 있다. 2. 섬유밀도 측정결과 천잠사(1.265~1.301g/㎤), 작잠사(1.308~1.311g/㎤), 가잠사(1.355~1.356g/㎤) 순으로 나타났으며 계산된 결정화도 값도 천잠사(51%), 작잠사(52%), 가잠사(64%) 순으로 나타났다. 3. 작잠사와 천잠사의 x-ray 회절곡선은 차이점이 없이 2$\theta$기호 16.7。와 20.5。에서 (002)면과 (201)면의 특징적인 double peak이 관찰되었으며 가잠사의 경우 2$\theta$기호 20.5。 부근에서 강한 회절 peak이 나타나 결정 구조가 서로 다른 것으로 나타났다. 4. IR spectrum 관찰결과 작잠사와 천잠사는 공히 alanine-alanine sequence에 관계되는 흡수 peak이 나타나며 가잠사는 glycine-alanine sequence에 관련된 group의 흡수 peak이 나타났다. IR 결정화도는 밀도측정에 의한 결과와 동일하게 천잠사(53.9%), 작잠사(54.3%), 가잠사(70.4%) 순으로 계산되었다. 5. 복굴절률은 가잠사의 경우 0.0556에 비하여 야잠사는 0.0216으로 낮은 값을 나타내며 광학배향도값도 가잠사가 2배 정도 높은 것으로 나타났다. 편광현미경에 의한 표면특성은 야잠사의 경우 섬유축방향으로 microfibril들이 줄무늬 모양으로 뚜렷하게 관찰되었다. 6. DSC 및 TGA 분석에 의하여 열분해특성을 살펴본 결과 열분해온도는 가잠사, 작잠사, 천잠사 순으로 350。 부근에서 나타났으며 각각의 구조특성에 따라 열분해가 진행되는 단계가 달리 나타나는 것으로 관찰되어 열안정성의 차이를 보여주었다. 7. Dynamic storage modulus와 loss modulus를 측정하여 얻은 유리전이온도는 가잠사 22$0^{\circ}C$, 천잠사, 24$0^{\circ}C$ 및 작잠사 255$^{\circ}C$의 값을 나타냈으며 이것은 비결정영역의 전이형상이 각 견사의 구조특성에 따라 다른 거동을 하고 있음을 의미한다.

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