• Journal of Veterinary Clinics
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• v.23 no.1
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• pp.9-13
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• 2006

Anaplasma phagocytophilum major surface protein-2 (Msp2 or p44) is the immunodominant outer membrane protein of the bacterium. Recently, we disclosed that Msp2 was an A. phagocytophilum adhesin for binding to host neutrophils and HL-60 cells, probably mediated by attachment to platelet selectin glycoprotein ligand-1 (PSGL-1). In this study, we further elucidated that Msp2 bound to PSGL-1/FucT IV-transfected BJAB but not nontransfected BJAB cells. Binding of recombinant Msp2 or cell (lee bacteria to the surface of PSGL-1/FucT IV-transfected BJAB cells was significantly higher than to nontransfected BJAB cells (p<0.01 and p<0.01). Also, Msp2 monoclonal antibody and soluble recombinant Msp2 as antagonist led to concentration-dependent reductions in A. phagocytophilum adhesln (p<0.05 and p<0.01) to transfected BJAB cells. Thus, we conclude that Msp2 of. A. phagocytophilum acts as an adhesin by which the bacterium binds to PSGL-1 on host neutrophils and myeloid cells.

• Journal of Periodontal and Implant Science
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• v.33 no.2
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• pp.127-137
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• 2003

치과용 임플란트 실패의 주요 원인은 임플란트 표면에 부착되는 세균의 침착의 결과로 생기는 임플란트 주위염이다. 구강 내에서 세균성 치태의 침착은 치태가 부착하는 기질 표면의 물리적 성상과 타액성 피막의 성분에 영향을 받으며 형성된 피막의 유기질 성분의 차이가 치태의 성분과 병원성에 영향을 미친다. 최근 연구에 의하면 생체재료의 표면에 침착되는 치태세균은 사용되는 재료에 따라 특이한 세균 침착을 보이며 이는 초기 타액성 피막의 차이에 의한 것으로 알려져 있다. 이 연구의 목적은 플라즈마분사법으로 표면 처리된 타이태늄 임플란트에 흡착되는 타액성 단백질 피막의 특성을 정성적인 방법으로 분석하는 데 있었다. 법랑질 조각과 플라즈마분사법으로 표면 처리된 타이태늄 임플란트를 스프린트에 치실을 이용하여 연결한 장치를 구강 내 장착하여 2시간 동안 피막이 침착되게 한 후 피막을 분리 추출하여 냉동 건조시켰다. 재수화 과정을 거치고 나서 전기 영동법과 Western transfer 분석을 통해 단백질 성분에 관한 분석을 시행하였다. 사람의 총 타액과 이하선 타액 및 악하선-설하선 타액을 수집기를 이용하여 채취하고 같은 방법으로 처리한 후 성분분석을 실시하였다. 피막 흡착 전후의 표면변화를 주사전자현미경을 이용하여 관찰하였다. 실험결과 타이태늄 임플란트에 흡착된 피막은 법랑질 표면의 피막과는 다른 단백질 성분을 가지고 있었으며, 주로 악하선-설하선 타액에서 유래하였다. 임플란트와 법랑질 표면 모두에서 흡착된 피막에는 아밀라제, 분비성 면역 글로불린A 및 락토페린이 존재함을 알 수 있었으나 법랑질의 경우는 blotting이 약하게 나타났다. 주사전자현미경 관찰결과 시편의 표면에 균질한 피막이 덮고 있었으며 세균의 부착은 거의 관찰되지 않았다. 이상의 실험 결과들을 통하여 플라즈마분사법으로 표면 처리된 타이태늄 임플란트 표면에 부착된 타액성 단백질 성분은 법랑질과는 차이가 있음을 알 수 있었으며, 이러한 차이는 치태세균의 종류 및 병원성에 영향을 미칠 것으로 생각된다. 법랑질과 타이태늄 임플란트는 기질과 표면구조가 다르므로 표면에 형성 되는 치태성분도 다르다는 사실과 본 연구 결과를 종합하여 볼 때, 타이태늄 임플란트 표면에 흡착되는 초기 타액성 단백질의 성불이 타이태늄 표면에 침착되는 미생물 군의 조절에 중요한 역할을 가지고 있으며, 임플란트 치료 시에 올바른 치태 관리법의 교육을 통하여 환자 스스로 적절한 관리를 하도록 함으로써 임플란트 치료의 성공률을 높일 수 있을 것으로 생각된다.

• Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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• v.19 no.1
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• pp.94-106
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• 1990

사람들이나 동물의 소화관의 상재균으로서 중요한 Lactobacillus acidophilus의 여러균주를 사용하여 세포표면의 성상을 조사하였다. 불리한 세포벽의 negative 염색한 표본을 전자현미경으로 검토한 결과 사용한 21주중 15주는 세포벽외층에 단백질로 구성딘 regular array를 생산하고 있음을 알았다. RA를 구성하는 단백질의 분자량은 41KDa-48KDa이었다 아미노사노성 및 Staphylococcus au-reus V8 protease로 한정분해 후 및 N-chlorosuccini-mide로 부분절단후의 peptide map에서 Johnson등의 분류의 subgroup A-1에 속하는 균주가 생산하는 RA단백질은 불균질하였으나 그외 균주의 RA단백질은 같은 subgroup에 속하고 있어도 불균질하였음을 알았다 따라서 RA단백질은 불균질하였으나 그외 균주의 RA단백질은 같은 subgroup에 속하고 있어도 불균질하였음을 알았다 따라서 RA생산의 유무 및 RA단백질의 분자량측정과 peptide mapping을 행하면 지금까지 행해온 DNA-hybridization과 같은 복잡한 절차를 사용하지 않아도 subgroup A-1의 L. acidophilus가 동정 가능함을 알았다 L acidophilus의 세포표면소수성은 일반적으로 RA를 생산하지 않는 균주보다는 RA를 생사하는 균주에 높은 것이많았다 RA생산균주에 있어서는 RA단백질은 세포표면소수성과 직접관계하고 있는 것은 적었다.

• Journal of Periodontal and Implant Science
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• v.35 no.1
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• pp.153-161
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• 2005

파이브로넥틴은 세포외기질에 존재하는 당단백질로 세포의 부착, 이동, 성장 및 분화에 관여하며, 섬유아세포 성장인자는 세포의 증식 이동 및 분화에 영향을 주는 중요한 성장인자로 알려져 있다. 최근 연구에 의하면, 파이브로넥틴은 조골세포의 타이태늄 임플란트 표면으로 이주와 증식 및 골생성을 촉진하며, 섬유아세포 성장 인자는 파이브로넥틴에 상승작용을 한다고 보고된 바 있다. 이 실험의 목적은 파이브로넥틴 및 섬유아세포 성장인자의 복합 단백질을 이용하여 타이태늄 임플란트의 골 반응을 알아보는 것이다. 체중 2.5 kg 내외의 건강한 18 마리의 웅성가토를 준비하여 무균 사육하였고, 순수 타이태늄을 절삭가공하여 직경 3.5mm, 길이 6mm 의 machined surface를 지니는 screw type 의 임플란트를 준비하였다. 사람의 유전자를 기초로, 유전자 재조합법을 통해, 적절한 primer를 이용하여 얻은 섬유아세포 성장인자를 파이브로넥틴 III 형 분절의 9-10 번 도메인에 결합시켜 얻은 복합 단백질을 준비된 임플란트에 표면처리하여 실험군으로 하였고, 표면처리하지 않은 임플란트를 대조군으로 하여, 가토의 좌우 경골에 각각 2 개씩의 임플란트를 식립하였다. 4주 후, 가토를 희생시켜 각 경골 당 한 개의 임플란트에서 뒤틀림 제거력을 측정하였고 나머지 임플란트 식립 부위 에서는 경골을 포함하는 조직표본을 제작하였다. 조직표본상에서 골접촉이 가장 좋은 3 개의 나사산의 길이를 측정하고, 나사와 접촉하는 골의 길이를 측정하여 골-임플란트 접촉도를 구하고, 같은 부위에서 나사산 사이의 면적과 골이 차지하는 면적을 비교하여 골생성률을 얻었다. 실험군과 대조군의 결과는 Student t-test 를 이용하여 신뢰도 95% 수준에서 통계학적 유의성을 검정하였다. 파이브로넥틴과 섬유아세포 성장인자의 복합 단백질로 표면처리된 임플란트와 표면처리를 하지 않은 임플란트는 뒤틀림 제거력에서는 통계적 유의성이 나타나지 않았으나, 골-임플란트 접촉도와 골생성률에서 복합 단백질로 처리된 임플란트가 통계적으로 유의하게 높은 결과를 보였다. 이상의 연구결과로, 섬유아세포 성장인자와 파이브로넥틴 복합 단백질로 처리한 타이태늄 임플란트가 주변 골 형성을 촉진시켜, 골유합을 증진시킴을 알 수 있었다. 따라서, 복합 단백질이 타이태늄 임플란트의 성공률을 높이기 위한 표면개질 물질로 이용될 가능성을 확인할 수 있었다.

• Proceedings of the Korea Information Processing Society Conference
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• 2019.05a
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• pp.631-634
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• 2019

단백질의 구조적 동등성을 평가를 위한 형태 기반의 기술자에 대한 연구는 제한적으로 이루어지고 있으며 대부분 지역적 특성 값으로 표현된 지역적 접근 방법이 다수를 이루고 있다. 지역적 특성과 전역적 특성을 포함하는 형태기술자의 경우 각 특성들이 동등한 중요도로 결합되어 있다. 본 연구에서는 선형 회귀분석을 적용하여 각 특성에 대한 중요도를 최적화하여 형태기술자를 재정의 하였다. 최적화된 형태기술자를 단백질의약품인 인슐린 모델에 적용하여 구조적 동등성을 평가할 수 있는 방법론을 제시하였다. 최적화된 형태기술자는 동일한 그룹에 속한 인간 인슐린 단백질 모델과 지역적으로 다른 구조를 가지는 인슐린 아날로그 그룹을 명확히 구분할 수 있음을 확인하였고 이러한 성능은 이전 연구의 형태기술자와 3D 저니크 기술자보다 더 좋은 성능을 보였다. 또한 제안한 방법은 고해상도 단백질 3차 구조 정보를 활용하여 유사성을 판별한 RMSD 방법과 유사하게 서로 다른 표면 구조를 가지는 단백질을 구별할 수 있음을 확인하였다. 이러한 결과로부터 본 연구에서 제시하는 형태기술자 및 최적화된 동등성 평가 함수는 SAXS 분석과 같이 저해상도 단백질 표면 모델을 확보할 수 있는 분석에 적용하여 단백질의 구조적 동등성을 판별할 수 있는 기반을 제공할 수 있을 것으로 판단된다.

• Proceedings of the Korean Institute of Surface Engineering Conference
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• 2012.11a
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• pp.84-85
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• 2012

Poly(ethylene glycol) (PEG)는 Hydrophilic하면서 독성이 없기 때문에 약물과 관련된 연구가 많이 이루어졌다. 초기 PEGylation은 약물과 관련된 연구가 주를 이루었지만, 최근에는 PEG의 non-fouling 효과 때문에 표면에 적용하여 biomedical 장비에 세포나 단백질이 붙지 않도록 하는 개질하는 방법에 많은 연구가 진행되고 있다. Native Chemical Ligation(N.C.L.)은 단백질을 합성할 때, Protecting group을 사용하지 않고 반응을 진행시킬 수 있기 때문에 많은 주목을 받고 있다. N.C.L.은 합성한 두 물질이 Thioester와 Cysteine을 갖고 있으면, mild condition에서 amide bond를 형성하면서 반응이 쉽게 진행되기 때문에 다양한 분야에 적용할 수 있다. 이 논문에서 우리는 N.C.L.을 표면에 적용시켰으며 그 중 한 예로 표면 PEGylation진행하였다.

• The Korean Journal of Zoology
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• v.32 no.4
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• pp.412-419
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• 1989

Monoclonal antibodies (MAbs) reacting with the plasmalemma of Amoeba proteus were produced. Specificity of the 3 MAbs was determined by transfer blotting of the SDS polvacryfamide gel. AMS antibody reacted with the mucopolysaccharide bands of the spacer gel, 220 KD and 50 KD proteins of the resolving gel. The maior glycoprotein bands (175 KD, 165 KD) and 50 KD protein of the plasmalemma were recognized by AUG antibody. A third, AMP antibody reacted with the 50 KD protein only. In immunofluorescence microscopy of the enzyme treated cells, the antigens of these MAbs were sensitive to proteases, but not sensitive to neuraminidase. In the assay of cell to substratum attachment after binding with the antibody, AMG and AMP antibodies exerted no effect, but AMS hindered the attachment and cell spreading. Thus the effective components of the plasmalemma in cell to substratum attachment appear to be the mucopolysaccharides and 220 KD protein. The membranes of latex particle infested phagosomes did not show any distinction from the plasmalemma in fluorescence microscopy. Phagosome membranes of amoebae appear to be derived from the plasma membrane without selection in terms of the antigen composition. Amoeba Proteus의 세포막과 반응하는 단세포군 항체를 생산하였다. SDS polyacrylamide gel을 transfer blotting하여 이들 항체의 반응 특이성을 조사해 본 결과 AMS 단항체는 PAS로 염색되는 spacer gel의 mucopolysaccharide 린드, resolving gel의 220 KD 및 50 KD 단백질과 반응하였으며, 세포막의 주요 당단백질인 175 KD 및 165 KD 빈드와 50 KD 단백질은 AMG 단항체에 의해서 인지되었다. 그리고 AMP단항체는 공통인 50 KD 단백질과 특이하게 반응하였다. 효소처리한 아메바의 면역형광칠미경적 조사에서 이들 항체에 대한 항원분자들은 모두 단백질분해효소에 민감하였으며 neuraminidase에 대해서는 변화가 없었다. 이들 항체를 결합시킨 아메바의 용기표면 부착 가능성을 분석한 결과 AMP 및 AMG 단항체는 아무런 영향을 미치지 못하였으며 AMS 단항체는 세포의 용기표면 부착 및 세포의 펴짐을 저해하였다. 따라서 아메바의 용기표면 부착은 mucopolysaccharide 및 220 KD 단백질에 의해서 매게되는 것으로 나타났다. 그리고 latex particle을 담고 있는 식포막은 면역형광형미경적 조사에서 세포막과 차이가 없었다. 따라서 겐포막은 항원 조성에 있어서 비 선택적으로 세포막에서 유도되는 것으로 나타났다.

• Korean Journal of Food Science and Technology
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• v.21 no.5
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• pp.714-720
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• 1989

Effects of acetylation on conformational changes of glycinin was studied using solvent perturbation, second derivative spectroscopy, near uv circular dichroism spectra and viscosity. Glycinin with purity of more than 93% was used for the experiment. Modification was carried out with acetic anhydride and glycinin with lysine residue modification of 0%, 28%, 65%, 85%, and 95% were used for the experiment. The result of solvent perturbation using some selected perturbants, such as glycerol, ethylene glycol, and dimethyl sulfoxide revealed that acetylation has caused increase In solvent accessibility of tyrosine residues from less than 40% in native protein to more than 70% for 95% acetylated glycinin. This was confirmed by second derivative spectroscopy. Near ultraviolet circular dichroism revealed that the spectra of native and acetylated glycinin were almost identical differing only in intensity and no other useful information could be derived from it. However, in the case of 95% acetylated glycinin the influence of tryptophan on the spectrum was more pronounced Specific viscosity of glycinin also increased by modification, the extent of which depended upon the degree of acetylation. These results supported that acetylation had caused globular conformation of glycinin to be expanded and denatured.

• The Korean Journal of Zoology
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• v.26 no.4
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• pp.235-251
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• 1983

Several approaches have been made to access the mechanism of fusion in chick myoblast in vitro. Lactoperoxidase-catalyzed iodination was applied to labell cell surface proteins during myogenesis. Quantitative as well as qualitative changes were observed in $^131$I surface components of prefusion and postfusion cells. Two proteins with a molecular weight of 165K and 93K daltons were observed to appear at the onset of fusion as compared to prefusion stage. At the same time, 245K dalton protein decreased whereas the low molecular weight proteins increased consistently. The decrease of high molecular weight proteins appears to be associated with the cell cycle of myoblast during differentiation. The increased appearance of low molecular weight proteins might be due to the proteolytic cleavage of the high molecular weight proteins. Examination of intracellulr cAMP levels during fusion has revealed that a large but transient increase in cAMP occurs before the onset of fusion. This result suggests a causal relationship between the increase of cAMP and the onset of fusion, and further, that differentiating myoblasts are synthronized to a high degree. During the course of myoblast differentiation, at least four lowe molecular weight proteins, which different from major surface proteins iodinated, were identifiable in the culture medium. These proteins could be ascribed to be released from the membrane by proteolytic cleavage of surface proteins in the course of myoblast fusion. The significance of cell surface alterations and the released proteins during the fusion, the involvement of cAMP in the onset of fusion and the possibility that fusion is promoted by external factor(s) are discussed.

• Korean Journal of Food Science and Technology
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• v.25 no.5
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• pp.571-575
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• 1993

Effect of surface hydrophobicity of soybean peptides on serum cholesterol in rats was investigated. Soybean protein(ISP), casein(CNP), and their peptic hydrolyzates fractionated by acid precipitations (SHT, SH8, SH6, SH4, CHT, CH6, CH5, CH4) were fed to rats and the concentration of serum cholesterol and the fecal steroid excretion were measured. And surface hydrophobicities of the peptide fractions were measured by determining by the ANS flourescence intensity and SDS binding capacity. It was found that the higher the surface hydrophobicity of peptides was, the more the fecal steroids excreted(r=0.801) and the lower the concentration of serum cholesterol became(r=-0.868). However, there was no relationship between SDS surface hydrophobicity and fecal steroids or serum cholesterol. ANS surface hydrophobicity of soybean protein was increased by enzymatic hydrolysis. These results suggest that high surface hydrophobicity of peptides formed during digestion is responsible for the hypocholestrolemic effect of soybean protein through the hydrophobic interaction between the peptides and bile salts in rats.