The ultimate objective of periodontal treatment is to stop disease progression and to regenerate destroyed periodontal tissues and thereby regain normal function. Growth factors are naturally found polypetides which stimulate many cellular activities pertaining to wound healing by acting as signal molecule in controlling cell movement, proliferation, and matrix production. Platelet derived growth factor (PDGF) is 28,000-35,000 Da molecular weight dimeric protein with 2 long positively charged polypeptide chains connected by sulfide bonds. The purpose of this study is to evaluate histologically the initial guided tissue regeneration in a periodontal defect f a beagle dog treated with a biodegradable membrane formed with polylactic acid (poly-L-lactic acid) and polyglycolic acid loaded with 200ng/$cm^2$ platelet derived growth factor. 2 beagle dogs were used in he experiment. $5mm{\times}6mm$ alveolar bone defect was formed in upper and lower canines and third premolars and a reference notch was placed. PDGF-BB non-containing membrane was used as control. Each defect was randomly assigned to the test roup or the control group. The dogs were sacrificed 3 weeks after membrane placement. Toluidine blue and multiple staining was done for histological analysis. In the 3 week specimen in the control group, no new one formation could be seen. Small amount f bone resorption below the notch could be seen. In the notch, loose connective tissue with infiltration of inflammatory cells could be seen. Also thin discontinuous new cementum could be seen and the membrane still retained its structure. Where PDGF-BB containing membrane was used, new bone formation could be seen in the notch at weeks and also continuous thin cementum could be seen. PDL cells were observed between new bone and new cementum and some were attached to bone and cementum. These results suggest that new bone and cementum formation seen when PDGF-BB loaded membrane was used was due to inhibition of downgrowth of epithelial cells and also due to continuous release of the growth factor. Further study on the resorption characteristics of the membrane nd the release characteristics of the PDGF-BB is necessary. Also, development of a membrane easier to use clinically is necessary.
V(z)곡선법을 이용한 코발트기 초내열합금강의 열화도 평가 유용성 유무를 고주파 초음파 탐촉자를 이용하여 실험적으로 검증하였다. 코발트기 초내열 합금이 고온에서 장시간 노출되었을 때 일어나는 미세조직의 변화를 모사하기 위해서 인공열화를 실시하였다. 여로하에 미치는 초음파 음속의 영향을 고찰하고자 10 MHz를 이용하여 펄스-에코법으로 종파의 음속을 측정하고 200 MHz를 사용하여 V(z)곡선법으로 누설탄성표면파의 음속을 측정하였다. 두 초음파의 음속은 열화시간에 따라서 감소하였다 더욱이, 저주파수 종파의 음속변화는 거의 없었지만, 고주파수 누설탄성표면파의 음속변화는 열화시간에 따라서 최대 4.7%의 변화를 나타내었다. 열화에 따른 경도의 변화와 누설탄성표면파의 음속 변화는 양호한 상관관계를 나타내었다. 따라서 열화도 평가에 고주파 탐촉자를 이용한 초음파 현미경의 V(z)곡선법이 유용함을 알 수 있었다.
유치의 치수 절단술에 이용되는 약제들(formaldehyde, formocresol, paraformaldehyde, ferric sulfate)이 농도 변화에 따라 치수 섬유모세포의 활성, 단백질 기질의 합성 및 무기질 침착에 미치는 영향을 규명하고자, 각각 0.01, 0.05, 0.10, 0.25, 0.50, $1.00{\mu}l/ml$의 농도로 사람의 치수 섬유모세포에 24시간 적용시킨 후 세포활성검사와 함께, 조직의 재생과정 중 유기기질이 되는 단백질의 합성능과 무기질 침착에 관여하는 알칼리성 인산효소의 활성에 미치는 영향을 완충액만을 투여한 대조군과 비교 평가한 결과 다음과 같은 결론을 얻었다. 치수 절단술 약제를 첨가한 후 24시간 배양하였을 때, formaldehyde, formocresol, paraformaldehyde등의 경우 약제 농도가 증가함에 따라 대조군에 비하여 치수 섬유모세포의 세포활성이 크게 저하되었으며, ferric sulfate를 이용한 경우에는 세포활성이 유지되거나 약간 촉진되었다. formaldehyde, formocresol, paraformaldehyde사이의 세포활성간에는 유의성 있는 차이가 보여지지 않았다. 치수 절단술 약제 첨가 후 배양액내의 총단백질양에는 큰 변화가 없었으나, paraformaldehyde에 의해 총단백질양이 약간 감소하였다. 약제 첨가 후 세포내의 단백질양을 측정하였을 때, ferric sulfate의 경우, 약제의 농도가 증가하였을 때도 지속적으로 단백질 합성이 저해됨을 알 수 있었다. formaldehyde, formocresol, paraformaldehyde, ferric sulfate는 치수 섬유모세포의 알칼리성 인산효소 활성을 약간 저해하였다.
The 3 beagle dogs aged over one and half years and weighed 14 to 16 Kg were utilized in this study. Horizontal furcation defects were induced around 3rd, and 4th premolars bilaterally. BMP-4 in conjunction with EGF and BMP-4 only were applied in the right and left premolars respectively. 1 animal was sacrificed at 2nd week, 4th week, and 8th week, after regenerative surgery respectively. Semi-thin sections using glass-knife were stained with hematoxylin- eosin and trichrome for light microscopic study. The results were as follows : 1 . The long junctional epithelial downgrowth was observed in both area applied with BMP-4 and with BMP-4 and EGF at 2nd week after the surgery. 2 . The extensive regeneration of new bone and cementum was appeared at 4th week and the maturation of bone was observed at 8th week in both area applied with BMP-4 and with BMP-4 and EGF. 3 . The root ankylosis and resorption was presented along the exposed root surface at the coronal 1/3 of defect in the BMP-4 applied site, but it was not shown in the site applied with BMP-4 in conjunction with EGF at the 4th week. At 8th week, the root ankylosis was apparently appeared in the BMP-4 and EGF applied site as well as in the BMP-4 applied site. 4 . The periodontal ligament tissue including Sharpey's fiber inserted into cementum and alveolar bone, was formed along the exposed root surface in the area applied with BMP-4 only, but in the site applied with BMP-4 and EGF, the collagen fiber running parallel to the root surface without Sharpey's fiber, was observed in the periodontal ligament space at 4th and 8th week. Within the above results, BMP-4 had the remarkable capability to regenerate the periodontal tissue and EGF had possibility to prevent from the root ankylosis. Therefore, growth factors including BMP-4 and EGF may have the strong possibility to be utilized in the clinical periodontal treatments.
An ultimate goal of periodontal therapy is to stop the disease process and to regenerate a functionally-oriented periodontium destroyed as a result of periodontal disease. The purpose of this study was to observe the effect of grafting granulation tissue obtained from extraction socket on the regeneration of horizontal furcation defect. Six dogs were used in this study. All mandibular first and third premolars were extracted. At 2, 3, and 5 days after extraction, tissues were obtained from extraction socket of 1 mongrel dog and examined by light microscope. Granulation tissue obtained at 5 days after extraction was chosen as the graft material. Five days later, horizontal furcation defects were created surgically at mandibular second and fourth premolars in the right and left side of the 5 beagle dogs. The entrance area of the artificially prepared "key hole" defects were about $3\;4mm^2$. By random selections, 2 exposed furcation defects were grafted with granulation tissue obtained from extraction socket as experimental group and 1 furcation defect was as control. The flaps were replaced to their original position and sutured with 4-0 chromic cat-gut. Three dogs were sacrificed 4 weeks and two dogs 8 weeks after surgery, and the prepared specimens were examined by light microscope. At 4 weeks, furcations were filled with epithelial lining and fibrous connective tissue infiltrated with chronic inflammatory cells. New bone formation was observed in all groups. Only experimental group showed new cementum formation. At 8 weeks, new cementum, functional arrangement of new PDL fiber, root resorption, and some ankylotic union of newly formed alveolar bone and root surface were observed in all groups. Experimental group showed that epithelial downgrowth was inhibited and new bone formation was more active compared to control. The success rate of the furcation defect healing was higher in experimental group than control. These results suggested that grafting of granulation tissue obtained from extraction socket which combined with reconstructive periodontal flap surgery may promote periodontal regeneration of horizontal furcation defect.
The assessment of alveolar bone changes on dental radiographs to indicate progression of periodontal diseases or healing response to therapy is routine procedure. However, the diagnostic accuracy in detecting small alveolar bone changes is very limited. Recently, guided bone regeneration therapy is popular, but the quantification of new bone is somewhat difficult with conventional evaluation method. To quantificate the amount of new bone, various evaluating methods have been introduced including histomorphometry, radiomorphometry, biochemical analysis, X-ray probe microanalysis, scanning electron microscope backscatter method. In this study, guided bone regeneration using resorbable membrane with & without PDGF-BB is quatificated through histomorphmetry to evaluate the efficacy of histomorphometric analysis. 4 beagle dogs and 8 Sprague-Dawley rats were selected as experimental animals. In beagle dog experiment, $4{\times}4mm$ Class II defects were created in maxillary both second premolars, and biodegradable membrane containing PDGF-BB(experimental group) were covered over one defect, and same membrane without PDGF-BB(control group) were covered over the other defect. At 2 weeks, 5 weeks after surgery, each beagle dogs were sacrificed, and the tissues were treated by undecalcified fixation. In Sprague-Dawley rat experiment, 5mm round defect were created in temporal bone, the same membranes were covered on the defects. At 1 week, 2 weeks after surgery, each rats were sacrificed, and undecalcified fixation were taken. After grinding tissue specimen, we analyse them histomorphometrically using image analysis system. In beagle dog 2 weeks specimens, new bone formation area were $0.03123mm^2$ in experimental group,and $0.03012mm^2$ in control group. At 5 weeks specimens, $0.15324mm^2$ in experimental group, and $0.09123mm^2$ in control group. In Sprague-Dawley rat specimens, new bone fomation area were $0.20448mm^2$ in 1 week experimental group, $0.03604mm^2$ in 1 week control group. At 2 weeks specimens, $0.46349mm^2$ in experimental group, $0.17741mm^2$ in control group. The results indicated that histomorphometric analysis of new bone formation using image analysis system is very effective quantification method to evaluate the efficacy of treatment modalities.
치주인대섬유모세포들은 완전탈구 된 치아의 성공적인 재식을 위한 중요한 요소이다. 따라서, 외상으로 인해 완전탈구된 치아의 보존을 위한 보관액을 선택하는 것이 중요하다. 성장인자들과 호르몬들은 치주인대섬유모세포들의 생존을 위한 치료적 제제로 고려되고 있다. Epidermal growth factor(EGF)는 다른 조직에서 재생과 상처 치유 과정의 중요한 역할인자로 대두되고 있다. 따라서, 완전탈구 된 치아를 위한 치료적 적용을 위해 EGF의 세포 증식에 미치는 영향을 평가하였다. 또한 EGF와 tri-iodothyronine(T3)의 혼합액, EGF와 Heparin-binding epidermal growth factor-like growth factor(HB-EGF)의 혼합액이 세포 증식에 미치는 상승 효과를 평가하였다. 치주인대섬유모세포의 세포증식은 EGF 농도가 증가함에 따라 증가하였고, 10 ng/ml 농도에서 최대 세포증식을 보였다. EGF는 상처치유분석에서 상처 치유촉진과 이동성을 보여주었다. EGF에 T3와 HB-EGF를 첨가한 혼합액에서 배양한 세포는 EGF만 처리한 경우보다 세포 증식이 상승되었다. EGF와 T3 혼합액의 상승효과 기전을 유추하기 위해서 RT-PCR로 EGF 수용기의 발현을 확인하였고, T3가 EGF 수용기 발현을 증가시켰음을 확인하였다. 따라서 EGF와, EGF와 T3, EGF와 HB-EGF의 혼합액은 완전탈구된 치아의 치료에 있어 유용한 선택이 될 것이다.
함치성 낭종은 치관이 형성된 후 성상세망(stellate reticulum)의 변성으로 인하여 치관과 환원법랑질상피 사이에 유동물질이 축적되어 나타난다. 연령별로는 10대 또는 20대에서 발생율이 높고 거의 미맹출 치관과 관련되어 나타난다. 일반적으로 무증상이지만 낭이 크거나 염증이 동반된 경우 종창과 통증을 유발한다. 함치성 낭종은 방사선 검사 시 미맹출 치아의 치관을 둘러싸는 경계가 명확한 단방성의 방사선 투과성 병소로 나타나며, 인접치의 변위나 치근흡수가 관찰되기도 한다. 함치성 낭종의 치료 목적은 비정상조직을 완전히 제거하되 낭종내 전위된 치아를 가급적 보존하여 맹출을 유도하고 악궁 내에서 기능할 수 있도록 하는 것이며, 제거술식으로는 적출술과 조대술이 널리 이용되고 있다. 조대술은 낭벽의 일부분을 제거하여 구강점막과 연결시켜 주는 술식으로 낭내의 압력이 감소함에 따라 결손부 골 재생이 일어나며 낭벽은 정상적인 점막으로 변하게 된다. 특히 이는 인접 주요 구조물을 보호할 수 있고, 맹출 공간이 충분하다면 낭에 포함된 영구치의 맹출을 유도할 수 있는 가장 보존적인 치료이다. 본 증례들에서 임상 및 방사선학적 검사소견상 함치성 낭종으로 판단하고 조대술을 이용하여 낭종을 제거하였으며 전이된 치아를 보존하고 자연맹출을 유도하여 양호한 결과를 얻었기에 보고하는 바이다.
수도기계이앙재배를 위한 상자육묘에 있어서 발생하기 쉬운 입고병이나 생리적 장해인 뜸묘를 방지하기 위한 예방적 기술대책으로서 3-Hydroxy-5-methylisoxazole(상품명 : 다찌가렌)을 비롯한 채소의 로균병방제약제인 SF 8002와 벼의 도열병방제약제인 Isoprothiolane(상품명 : 후지왕)등을 상토 또는 육묘중에 처리함으로서 입고병과 뜸묘의 발생억제효과와 함께, 이들 약효가 묘의 생육과 생리적 활력 증대(건묘육성)에 미치는 영향을 연구 검토한 바 그 결과를 요약하면 다음과 같다. 1. 묘의 지상부를 절단하고 뿌리로부터 흡수된 수분이 야간에 엽초부에 있는 통도조직을 통해서 절단부에 맺치는 일필량의 다소로서 뿌리의 생리적 활력을 진단한 바 Hydroxyisoxazole 19%, SF 8002 24%, Isoprothiolane 35%, Metalayl 41%의 순으로 일필량이 많았다. 2. 20일묘의 뿌리를 절제 사경재배조건에 삽식하여 활착과 관련이 있는 신근발생량을 보면 약제처리에 의한 신근의 발근력이 크게 증가하였으며, 신근발근력과 일필량간에는 고도의 정의 유의상관 관계를 인정할 수 있었다. 3. 35일묘를 대상으로 묘를 뽑아 수평으로 높이고 뿌리를 포수상태로 흡수시키면서 지상부의 굴기력을 측정한 바, 공시약제간 차이는 있으나 무처리에 비해 현저히 빠른 것으로 보아 이들 약제처리에 의한 묘의 활착력이 크게 증대됨을 확인할 수 있다. 4. 광합성능력과 직접 관계가 깊은 기공의 개도에 의한 절단한 지상부의 수분감소율의 추이를 보면 Hydroxyisoxazole 및 SF 8002 처리구가 다같이 수분감소율이 큰 것으로 보아 생리활성의 증대가 큰 것으로 해석되었다. 5. 파종후 20일묘를 립모상태하에서 지상부를 절단한 후 지상부의 재생능력을 보면 Isoprothiolane을 제외한 다른 약제처리에서 다같이 높았으며, 특히 SF 8002 및 Metalaxyl이 현저하였다. 6. 이들 살균제처리구는 묘의 생리적 장해인 뜸묘의 방제효과가 뚜렷하였으며, 이같은 효과는 앞에서 지적한 바와 같이 이들 약제가 가지는 생육조절작용으로서의 생리적 활력 증대가 뜸묘의 발생을 예방적으로 방제하는 간접효과라고 해석된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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