To study the capacity of callus and shoot formation on seedling stage in soybean, excised hypocotyl, epicotyl, shoot tip, cotyledonary node and primary leaf were cultured on artificial media (MS and B$_{5}$ medium) supplemented with several hormones. Regeneration of shoots was fairly successful from shoot tip and cotyledonary node tissues in soybean. These shoots could be rooted in vitro through tissue culture technique and transplanted normally into soil. Hypocotyl and epicotyl tissues formed only callus, of which growth and appearance were different according to the kinds of media and additives. A small number of shoots were formed from primary leaf tissues, but they did not develop further.r.
Grapevine leafroll-associated 3 closterovirus (GLRaV-3) is phloem limited virus, and one of the most severe viral diseases found in Korea. However, nonhomogenous distribution and low concentration and seasonal variations of GLRaV-3 in grapevines remain as main problems which prevent the introduction and molecular biology or serology experiments. Virus-infected plantlet in vitro was obtained from node tissue cuttings, which was GLRaV-3 infected 'kyoho' vines. The amount of purified virus was highest in vitro plantlet. Moreover, viruses seem to be relatively homogeneously distributed in all organs including leaf, stem and callus derived from in vitro plantlets. RT-PCR detection using in vitro plantlet tissue as template was most effective. When comparing ELISA to RT-PCR, RT-PCR detection was 1,000 times as effective as ELISA. These results can be explained by improved quality such as tenderness or less tannins in plantlet in vitro. In conclusion, until infected herbaceous host will be available, tissue culture can be usefully adopted as a technique for a good source of GLRaV-3 closterovirus for further studies.
The competence of callus formation and plant regeneration from root derived callus was higher in japonica cultivars than those of Tongil-type cultivars of rice. A japonica type cultivars Yeongdeogbyeo, showed the highest capacity (13%) for plant regeneration from root calli of 6 cultivars tested. The callus induced from seed and root tissues maintained higher capacity for plant regeneration during 7 passages of subculture on N$_{6}$ solid media at 2-week intervals. The maximum frequency (2 x 10$^{5}$ mL) of round cells and their cell colonies showed about 24 days after suspension culture of root-derived callus in N$_{6}$ medium with lmg/L 2,4-D, 300mg/L casein hydrolysate, 10mM L-proline, 20g/L sucrose and 30g/L sorbitol. The frequency of somatic embryo formation in suspension cultures of root-derived callus increased with prolonged advance of subculture time from 30 to 90 days, but their regenerative capacities decreased.
Chinese foxglove(Rehmannia glutinosa) is receiving much attention as one of the principal medicinal crops and the crud drug. This study was conducted to obtain the basic breeding information of Chinese foxglove derived from tissue culture. To compare plant characteristics between local variety and tissue cultured seedlings, plant growth and root yield has been investigated. In addition, catalpol and free sugar contents were also analized. The ability for the storage of root stock originated from tissue culture seedlings were better than that of local variety. The growth and root yield of in vitro propagated plants were superior to those of conventionally propagated plants. Root yield of 1-year-old and 2-year-old seedlings investigated 112% and 246% respectively than Seacheon local shows 384 kg/10 a. Although there were no significant different between tissue culture seedlings and conventionally propagated one, slight decline of component contents in tissue culture plants were still existed. Investigated sugar content among Seocheon local, 1-year-old tissue culture seedlings, and 2-year-old tissue culture seedlings were 1.86%, 1.21%, and 1.10% respectively. Catalpol content as one of standard materials indicates 0.46% in Seocheon local and 0.40% in tissue cultured ones.
Proceedings of the Korean Society for Bio-Environment Control Conference
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1999.11a
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pp.225-228
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1999
기내 조직배양묘의 생육에 가장 큰 영향을 미치는 주요 환경 요인으로 광, 온도, $CO_2$, 배지 등이 있다. 이중 광, 온도 및 $CO_2$ 가스는 기외로 부터 공급을 받거나 제어 할 수 있는 요인으로써 배양체의 생육에 있어 매우 중요하다. 배양 챔버내의 환경 제어는 용이하지만, 배양체에 직접적인 영향을 주는 용기내의 환경 계측은 용이하지 않다. 실제 배양체의 생육에 가장 큰 영향을 미치는 용기 내 환경과 배양 챔버의 환경은 큰 차이를 나타내기 때문에 조직배양용기내의 미기상 환경에 대한 분석은 필요하다. (중략)
이 연구의 목적은 원래의 치수조직과 유사한 조직을 재생하기 위한 pulp tissue engineering의 한 방법으로 건전한 조직으로부터 배양된 치수세포와 쥐의 조섬유세포(NIH 3T3 cell)를 Rat tail type I collagen solution에서 3차원적으로 관찰하기 위한 것으로, 콜라젠 젤의 수축량과 세포의 증식 량을 비교하였으며, 또한 마모된 사람치아의 표면과 배양용기에서 두 세포의 증식 량을 비교하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 콜라젠 젤에 NIH 3T3 세포를 배양한 경우 그 수축량은 최소였으나, 치수세포를 배양한 경우 그 수축량은 현저하였다. 2. 서로 다른 수의 치수세포를 콜라젠 젤에서 배양시킨 경우 세포 수가 많을수록 수축량이 증가하였으며, 세포가 없는 콜라젠 젤은 수축하지 않았다. 3. 치수세포를 콜라젠 젤에서 18일간 배양시킨 후 세포의 증식은 거의 없는 반면, NIH 3T3 세포는 계속 증식하였다. 4. 마모된 사람 치아 표면과 배양 용기에서 치수세포와 NIH 3T3세포를 배양한 경우 NIH 3T3세포가 치수세포에 비해 빠르게 증식 하였으며 , 특히 사람 치아의 표면에서 NIH 3T3세포가 현저히 빠른 증식을 보였다. 이상의 결과는 치수세포를 type I collagen gel에서 3차원 적으로 배양 후 치수조직의 재생을 유도하는 pulp tissue engineering에 관한 연구에 발판이 될 것으로 사료된다.
chitosan은 골치유증진 및 골세포의 분화를 촉진하는 것으로 알려진 천연의 생분해성 고분자이다. 이연구에서는 chitosan 및 chitosan/tricalcium phosphate(TCP) 다공성 기질을 제조하여 골이식재 및 조직공학적 골형성을 위한 3차원적 세포배양 지지체로서의 가능성을 평가하고자 하였다. chitosan 용액 및 TCP가 포함된 chitosan 용액을 동결건조함으로써 소공의 크기가 $100-200{\mu}m$인 스폰지형태의 chitosan 및 chitosan/TCP 다공성 기질을 제작하였다. 골이식재로서의 효과를 평가하기 위하여 백서의 두개골 결손부에 제작된 chiosan 및 chitosan/TCP 다공성 기질을 각각 이식하고 2주 및 4주 후에 동물을 희생하여 조직학적으로 치유양상을 관찰하였다. 조직공학적 골형성을 위한 세포배양 지지체로서의 가능성을 평가하기 위하여 백서 태자의 두개골에서 분리된 골아세포를 chitosan 및 chitosan/TCP 다공성 기질에 각각 접종하고 56일간 배양하면서 각 기간 별로 세포수, 염기성 인산효소 활성, 축적된 calcium의 양을 측정하였고 배양된 세포-기질 혼합체를 광학현미경 및 주사전자현 미경하에서 조직학적 관찰을 시행하였다. 백서 두개골결손부에 이식된 chitosan 및 chiosan/TCP 다공성 기질은 별다른 이물반응 없이 자연 분해되면서 신생골조직 내에 매립되었으며 이식하지 않은 대조군에 비해 유의하게 높은 신생골형성 효과를 나타내어 우수한 골전도성이 있음이 확인되었다. 신생골형성 양상이나 형성된 양에 있어서 두 가지 기질간의 유의한 차이는 없었다. 골아세포-기질 혼합체의 배양결과, 접종후 배양 28일 경과 시까지 골아세포수는 지속적으로 증가하다가 이후에는 5 8일까지 성장정도가 둔화되었다. 염기성 인산효소의 활성 및 calcium 축적량은 접종후 배양시간경과에 따라 56일까지 지속적으로 증가하였다. 세포수 및 염기성 인산효소의 활성에서 두 기질간의 유의한 차이는 없었고, calcium 축적량에 있어서는 chitosan/TCP 기질에서 유의하게 높았고 증가속도도 컸다. 배양된 골아세포가 접종된 다공성 기질의 조직학적 관찰결과, 골아세포는 다공성 기질에 잘 부착하여 중층의 형태로 성장하면서 광화된 골기질을 형성함이 관찰되었다. 배양 14일부터 작은 골편형태의 골형성이 기질 표면에 부착되어 관찰되었고, 배양기간이 길어짐에 따라 성장하여 배양 56일째에는 상당한 양의 광화된 골질이 형성됨이 관찰되었다. 배양 56일 경과후의 광화된 골질의 양은 chitosan/TCP 기질에서 더 많았다. 이 연구의 결과, chitosan 및 chitosan/TCP 다공성 기질이 골이식재로서 뿐만 아니라, 조직공학적 골형성에 적용되는 골아세포의 배양을 위한 3차원구조의 세포지지체로 이용되어 골재생술식에 유용한 생체재료로 활용될 수 있음이 확인되었다.
Proceedings of the Korean Society for Agricultural Machinery Conference
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2002.07a
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pp.345-350
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2002
바이오테크놀로지(BT, biotechnology)는 21세기의 첨단과학기술로서 생명공학, 생물공학, 생물이용기술 등으로 불리우고 있으며(일농기학회, 2000), 이 중 실용화되고 있는 기술중의 하나가 식물조직의 배양기술이다(백, 1993), 현재 우리나라에서는 나리, 호접란 등의 우량묘 대량증식을 위하여 조직배양기술을 이용하고 있으나 배양공정의 대부분이 인력에 의존하고 있고 배양묘 생산에 소요되는 비용의 약 60% 정도가 노동비용에서 발생되고 있다(정, 1995). 따라서 배양묘 생산의 여러 과정 중에서 수작업에 의한 작업부분을 로봇 화하여 배양묘 생산비용을 절감하려는 연구개발이 활발히 수행되고 있으며, 이중 주목을 받고 있는 것은 배양기에서 증식된 소식물체의 적출, 절단, 이식과 같은 추후의 증식과정이다 이 공정은 노동집약적일 뿐만 아니라 공정의 수작업에 따른 절단의 불균일성, 품질저하, 조작의 미숙련성, 잡균오염의 위험성 등의 문제점이 로봇화로 해결 가능하기 때문이다. (중략)
Seo, Mi-Suk;Cho, Chuloh;Choi, Man-Soo;Chun, JaeBuhm;Jin, Mina;Kim, Dool-Yi
Korean Journal of Plant Resources
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v.33
no.5
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pp.536-549
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2020
Soybean (Glycine max (L.) Merrill) is one of the most important crops of the world. With the completion of the soybean genome sequence, the Korean soybean core collection consisted of 430 accessions with genetic and phenotypic diversity was constructed in recent year. The availability of genome sequences and core collection will result in the crop improvement by molecular breeding using the various accessions and genome editing approaches. Efficient tissue culture techniques, such as haploid production, protoplast culture and plant regeneration from various organs are essential for the successful molecular biological approach and crop improvement. However, soybean is still considered to be recalcitrant in tissue culture because of the low frequency of regeneration and limitation of available responsive cultivars. In this study, we discuss the recent studies of tissue culture technology and methodology for efficient tissue culture to genetic improvement and application of molecular biotechnology in soybean.
As the molecular breeding was progressed, many plant transformation techniques were attained for improving transformation accuracy and used to produce useful transgenic plants. Day by day, new varieties were developed so new transformation techniques required for these newly developed varieties. Carnation (Dianthus caryophyllus L.) is a popular and economically important ornamental plant, all over the world. Keeping this in view, we selected 18 varieties of D. caryophyllus L. commonly available in the market and did optimization of culture conditions for more efficient tissue culture and to get higher number of plants via micro-propagation. Four varieties namely Yellowdotcom, Jakarta, Belmonte, Polartessino etc. were selected for organ culture studies from single cell line. The optimum growth was recorded in the MS media supplied with sucrose 3%, NAA 1.0 mg/L and TDZ 1.0 mg/L. except Belmonte, in which, BA 1.0 mg/L was found to be the best combination, in place of TDZ, rest ingredients were same. The most efficient coagulating agent used to obtain higher number of plant from callus was phytagel 0.3%. The most effective explant for higher shoot formation was stem in which 80.2% shoot formation was recorded. It also reduced culture periods by 6 days.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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