• 과학교육연구지
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• 제46권3호
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• pp.293-311
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• 2022

본 연구는 분자생물학 기초 소양 함양을 위한 제한 효소 지도 작성의 탐구실험을 구성하였고, 일반계 고등학교 2학년을 대상으로 학생 중심의 제한 효소 지도 작성 탐구실험 수업을 통해 탐구실험 능력과 과학긍정경험에 미치는 영향을 분석하였다. 우선, 탐구실험 수업이 일반계 고등학생의 과학긍정경험에 있어 '그렇다' 이상으로 응답한 비율이 사전에 비해 사후에서 높은 것으로 보아 유의미하게 효과가 있는 것으로 나타났다. 제한 효소 지도 작성을 위한 연속의 5단계로 구성하여 적용한 결과 학생들의 과학 분야 학업에 대한 흥미 유발뿐만 아니라 학생들의 수업 참여도가 높아졌고, 구체적인 과학 학습 동기, 과학 진로 포부 및 체험 자료로도 효과적인 것으로 나타났다. 탐구실험 수업의 과학 환경이 학생들의 학습 태도와 과학긍정경험의 향상으로 이어져 수업의 집중과 수업의 질적 향상, 학생간의 적극적인 의사 소통과 상호 협력의 중요성에 긍정적인 영향을 끼쳤다. 또 탐구실험 수업이 진로 체험의 기회를 제공함으로써 분자생물학의 기초 소양 함양과 이공계 진학의 토대가 될 것이다.

• Animal Systematics, Evolution and Diversity
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• 제11권4호
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• pp.469-477
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• 1995

Drosophila virilis section 중 D. robusta 종군내에서 D. lacertosa 아군의 D. lacertosa 와 D. robusta 아군의 D.sordidula 에 대한 형태학적 특징 및 세포학적 특징(핵형분석)간에 차이가 크기 때문에 이 두종을 대상으로 종의 분화정도와 종형성 과정을 알아보기 위한 연구의 일환으로 10가지 제한효소를 사용하여 mtDNA 의 절단인식부위를 분석하였다. 그 결과, D.lacertosa 와 D.sordidula 의 전체 genome size는 공히 15.7kbp 인 것으로 나타났으며, mtDNa 의 제한효소 fragment 수는 각각 26개와 32개인 것으로 조사되었다. 또한 2 종류의 제한효소를 동시에 처리하여 제한효소 지도를 작성하여 보았을 때, 이들 두종의 제한효소 지도의 형태에서 매우 큰 차이가 있는 것으로 나타났다. 같은 종군내에서 형태학적 , 세포학적 차이 및 mtDNA 의 제한효소 지도에 의한 차이로 볼 때 이들 2종의 차이는 아군수준으로까지 분류할 수 있을정도로 두종의 분화가 오래전에 이루어졌음을 시사하였다.

• 미생물학회지
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• 제30권6호
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• pp.539-545
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• 1992

Lactobacillus casei SM-M1 의 플라스미드로부터 phospho-$\beta$-galactosidase gene 을 갖는 DNA 를 E. coli 에 클로닝한 pPLac15(13kb) 의 재조합 플라스미드를 제조하였다.(15). pPLac15 DNA 를 분리하여 제한효소로 처리하여 제한효소 지도를 작성하였다. Phospho-$\beta$-galactosidase 유전자의 발현을 높이기 위하여 lac promoter 를 가진 pUC18 의 PstI 위치에 클닝하여 pPLac18 을 제조하였으며, 이것을 다시 EcoRI 으로 절단하여 pUC 18 에 클로닝하여 얻은 pPLac23 (7.6 kb) 를 얻었다. Phospho-$\beta$-galactosidase 효소활성은 pPLac23 의 형질전환주인 E. coli SW-23 에서는 pPLac15 를 가진 형질전환주인 E. coli SW-15 보다 약 1.8 배의 효소의 활성을 나타내었으며 pPLac18 을 가진 E. coli SW-18 보다는 약간 높은 활성을 나타내었다.

• 미생물학회지
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• 제30권4호
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• pp.246-251
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• 1992

대두 (Glycine max) 뿌리혹의 질소고정 공생균주 Bradyrhizobium japonicum SNU001 의 nod 유전자를 클로닝하였다. Rhizobium meliloti 의 4.5 kb EcoRI/ HindIII 절편을 탐침으로 한 게놈 혼성화 반응을 분리균주의 게놈상에 nod 유전자가 존재함을 확인하고, lambda EMBL3-BamHI vector 를 이용하여 genomic library 를 작성하였다. 작성된 library 로부터 1, 2 차 선별과정을 통해 nod 유전자가 있는 클론 1-5 를 선별하고, 클론 2로부터 nod DABC 탐침과 lambda DNA 탐침을 사용한 혼성화반응을 수행하여 삽입된 genomic DNA 에 대한 부분적인 제한효소 지도를 작성하였다. nod DABC 탐침과 가장 강한 혼성화반응을 보인 phage 클론 lambda CNS-1 의 3.9 kb BamHI 절편을 pBS KS(+) vector 에 subcloning 하고 동일한 탐침을 이용한 혼성화반응을 통해 subclone pBjCNS-1 을 선별하였다. 이 subclone 에 대한 부분적인 제한효소 지도를 작성하여 nod DABC 가 1.8 KpnI/SacI 절편에 존재함을 확인하였다.

• 한국수산과학회지
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• 제30권5호
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• pp.804-808
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• 1997

한국산 참굴의 유전적 특성을 조사하기 위하여 한국의 지역별 참굴을 대상으로 mtDNA 제한효소 절편분석과 클로닝을 수행하였다. 지역별로 각각 20개체의 mtDNA에 대하여 8가지 제한효소를 사용하여 DNA 절편양상을 분석한 결과 서해안산 참굴에서는 개체간 차이가 없는 단일 양상이었으며 남해안산의 경우는 두 가지 양상을 보였으며 차이는 HindIII 절단양상에서만 나타났다. 그 중 소수 개체들에서 나타난 양상은 서해안산 개체들에서의 양상과 동일하여 남해안에 서해안산 참굴이 유입되어 혼재하는 것으로 추정되었다. 한국산 참굴의 mtDNA를 대장균 E. coli HB101에서 클로닝하여 유전적 분석을 용이하도록 하였다. 전체 mtDNA를 제한효소를 사용하여 세부분으로 나누어 pUC19 유전자운반체에 클로닝하였다. 클로닝된 재조합 DNA를 제한효소들로 절단하여 한국산 참굴 mtDNA의 제한효소지도를 작성하였다. 남해안산과 서해안산 참굴 mtDNA에서 HindIII 적단 양상이 다르게 나타남을 확인하였고 이는 남해안산이나 서해안산에서 염기치환의 돌연변이에 의한 것으로 사료되었다.

• 미생물학회지
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• 제24권1호
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• pp.7-11
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• 1986

Pseudomonas의 분해계 플라스미드와 이들에 유용한 벡터를 개발하기 위해서 본 연구실에서 분리, 보존하고 있는 Pseudomonas 중에서 P.putita KU 190으로부터 하나의 플라스미드를 분리하여 그 특성을 해석코저 하였다. size marker로 RP4와 pSy343를 사용하여 플라스미드의 크기를 결정한 바 41Kb로 나타났으며, 이 플라스미드를 pKU 41라 명명하였다. 제한효소 Bglll, BamHl, Eco Rl, HindIII, Sall등으로 이 플라스미드를 소화하여 이들의 제한효소 pattern을 조사한 결과, Bg III가 1. BamHl 3, Hin dIll는 3, EcoRI은 6 그리고 SalI은 13개 이상의 절단부위를 가지고 있었다. 이 제한효소의 절단부위, 토막들의 크기로부터 BamHI, HindIII에 대한 지도를 작성하였다. 플라스미드의 생울학적 기능을 조사하기 위하여 탄화수소 자화능에 대한 큐어링 실험을 하였으나 이로부터 뚜렷한 관련성 여부를 관찰할 수 없었다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제15권6호
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• pp.436-440
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• 1987

앞서 보고한 바와 같이 토양으로부터 분리한 K. pneumoniae NFB-320의 pullulanase 유전자를 pBR 322을 이용하여 E. coli에 cloning한 결과 약 14.4kb 의 재조합 plasmid DNA pYKL451을 얻었다. 이러한 pullulanase 유전자에 대한 유전적 정보를 얻기 위해 여러 가지 제한효소로 단일 혹은 이중 절단을 행하여 삽입된 pullulanase 유전자의 제한효소 절단지 도를 작성하였으며, E. coli(pYKL451)과 K. pneumoniae NFB-320이 생산하는 pullulanase의 효소적 특성을 조사하였다. 생산되는 두 균주의 효소는 50-55$^{\circ}C$ 부근에서 최적온도를 나타냈으며 최적pH는 모두 6.0이었다. 효소 안정성에 미치는 pH의 영향은 4$0^{\circ}C$에서 90min 간 방치했을 때 pH 5.0-10.0에서 안정하였으며 열안정성은 (pH6.0) 각 온도에서 한시간 처리하였을 때 4$0^{\circ}C$까지는 안정하였으나 5$0^{\circ}C$ 이상에서는 효소의 활성이 급격히 감소하였다.

• 미생물학회지
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• 제28권1호
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• pp.35-40
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• 1990

Thiostrepton 내성 유전자(tsr)를 포함하는 multi-copy 재조합 플라스미드 pJY7J2의 제한효소 절단지도를 작성하였다. pJY, 712는 Streptomyces에서 넓은 host range를 나타내었으며 cloning 목적에 사용할 수 있는 단일 BgtIl 제한효소 인식부위를 갖고 있었다. 플라스미드 pJY 712는 lethal zygosis(Ltz+) 현상을 보였다. pJY 712의 혁질전환빈도는 S. lividans에서 $5.0\times 10^{4}$ TFU였다. pJY 712의 Bell 제한효소 인식부위에 tyrosmase 유전자(mel)를 삽입하여 플라스미드 PJY713을 제조하였다. met 유전자를 포함한 재조합 플라스미드 pJY 714는 pJY 713의 일부분(1.9kb BgllI-BelI 단편)을 제거하여 제고하였다.

• 미생물학회지
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• 제24권1호
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• pp.12-17
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• 1986

A new computer algorithm is described to order the restriction fragments of plasmid DNA which has been cleaved with several restriction endonucleases in single or double digestions rapidly with realistic error rates. The permutation and high weight on small fragments methods construct all logical circular map solutions. The program is written in Apple BASIC and run on an Apple II plus microcomputer with 64K memory. Several examples are presented which indicate the high efficiency of the profram in construction possible restriction map for YEp24.

• 한국응용약물학회:학술대회논문집
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• 한국응용약물학회 1993년도 제2회 신약개발 연구발표회 초록집
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• pp.61-61
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• 1993

사람의 혈액의 백혈구로부터 Polymerase Chain Reaction 방법으로 $\beta$$_2$-adrenergic receptor 유전자를 증폭하였다. 이 증폭된 유전자를 pbluescript KS(＋)에 cloning하였으며, 제한효소지도 작성과 부분적인 염기배열 확인으로 증폭된 유전자가 사람의 $\beta$$_2$-adrenergic receptor 유전자임을 확인하였다. $\beta$$_2$-adrenergic receptor 유전자를 N말단의 아미노산이 21개 제거되도록 결손시킨후 yeast의 pSec5의 Killer toxin signal sequence의 뒤에 in-frame으로 연결하였다. 현재 효모에서의 발현양상 및 발현된 단백질의 활성을 조사중이다.