• Applied Biological Chemistry
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• v.32 no.2
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• pp.116-125
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• 1989

Bowman-Birk type protease inhibitors of soybeans were purified with gel filtration on Sephadex G-75. Significant differences were found in the content and in the electrophoretic patterns of the purified protease inhibitors. Ten among fourteen electrophoretic bands appeared as protease inhibitors. The chymotrypsin and trypsin inhibiting activities in soybeans showed three and four fold variation respectively. And the cultivars with higher chymotrypsin inhibiting activities seemed to have higher cysteine contents.

• Proceedings of the Korean Society of Postharvest Science and Technology of Agricultural Products Conference
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• 2003.04a
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• pp.145.1-145
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• 2003

대두 단백질을 효소로 가수분해 하였을 때 생성되는 peptide의 항균활성을 조사하고 천연항균제로서 이용 가능성을 검토하기 위하여 분리 대두 단백질에 5종의 단백질 가수분해 효소를 작용시켜 생성된 가수분해물의 항균력을 측정하고 한외여과하여 분자량별로 분리된 각 fraction의 항균활성과 HPLC로 정제하여 항균성 peptide 의 아미노산 결합순서를 분석하여 다음과 같은 결론을 얻었다. 분리대두 단백질에 5종의 단백질 분해효소를 작용시켜 제조한 가수분해물 중 Asp.saitoi protease로 작용시킨 것이 항균활성이 높았다. Asp. saitoi protease로 작용시킨 대두 단백질의 가수분해물을 membrane filter로 여과한 결과 분자량 1000-3000 fraction에서 항균활성이 가장 높았다. 분자량 1000-3000 범위을 가진 가수분해물의 MIC는 0.5-0.8mg/$m\ell$ 이었으며 그람 양성균과 음성균 모두의 증식을 억제하는 경향을 보였다. 분리 대두 단백으로부터 얻어진 항균성 peptide는 121$^{\circ}C$, 10분간 열처리하여도 안정하였으며 한외여과에 의하여 분자량 1000-3000범위의 가수분해물을 동결건조하여 gel filteration하였을 때 2개의 fraction에서 항균 활성을 나타내었다. HPLC결과 RT 16.02 의 peak에서 항균활성이 확인되었고 질량은 1,633이었으며 아미노산 결합순서는 H$_2$N-G-P-P-G-V-V-A-T-V-V-A-A-R-COOH 이었다.

• Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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• v.25 no.2
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• pp.193-198
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• 1996

담즙산과 결합을 하여 콜레스테롤 농도에 영향을 주는 것으로 보고된 대두 단백질의 생체내 효소에 의한 미분해성 분획물 개량 메주로부터 분리하였다. 개량 메주로부터 pH 6.8 과 pH 4.5의 분획물들을 분리하여, 초음파 처리와 투석을 행한 후 Sephadex G-75 column chromatography를 실시하여 부분 정제하였다. 부분 정제된 분획물들을 chemiluminescence 방법에 의해 in vitro에서 검색을 한 결과, pH 4.5 분획물중의 하나가 담즙산과 강하게 결합하는 것으로 밝혀졌다. 또한 대두 기원의 pepsin 비분해성 분획물 또한 pH 4.5 분획물의 chemiluminescence 결과와 일치하였다. 따라서 본 연구에서 고안한 chemiluminescence 법은 in vitro에서 담즙산 결합 활성도 측정 및 콜레스테롤 대사에 관한 연구의 기본적인 연구 수단을 평가되며 따라서 본 연구 결과는 이 분야의 연구에 기초 자료로 제공될 수 있는 가능성을 제시하였다.

• Korean Journal of Poultry Science
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• v.37 no.1
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• pp.69-80
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• 2010

Hypocholesterolemic effect of soy protein was examined in comparison with casein and three other dietary protein sources in chicks. In two feeding trials, 40 (Expt.1) or 50 (Expt. 2), three-day-old, male chicks were forced-fed each of five semi-purified-type diets containing isolated soy protein (ISP, cp 82%), casein (cp 92%), rice protein (RP, cp 70%), corn gluten meal (CGM, cp 65%) or fish meal (FM, cp 70%) for two weeks. The diets for Expt. 2 were supplemented with 0.3% cholesterol by replacing glucose. Each protein source was the only source of protein of each diet. Essential amino acids were added to the diets to satisfy their requirements according to NRC. The diets were forced-fed to equalize the intake of all nutrients except the amino acids which were inherently variable in the diets. Chicks fed casein showed lower body weight gain than those fed the other proteins in both experiments. Birds fed ISP and FM gained better body weight than the others. Chicks fed casein showed significantly higher levels of plasma total cholesterol, non-HDL cholesterol and triacylglycerol (TG) than those fed ISP and the other protein sources. Meanwhile, the chicks fed ISP, RP, CGM and FM showed comparable levels of plasma total cholesterol, non-HDL cholesterol and TG. In Expt. 2, the birds fed casein and FM showed markedly elevated plasma total cholesterol and non-HDL cholesterol levels. Liver weight and levels of total lipids and cholesterol of chicks fed casein appeared significantly higher than those of the other protein diets, whereas those of the chicks fed ISP, RP, CGM and FM appeared comparable except cholesterol in FM group. In conclusion, only the chicks fed casein diets in both experiments always showed significantly higher levels of plasma cholesterol and TG compared to those fed ISP and the other protein sources. These results support the views that casein, which has unique lysine-arginine ratio, is inherently hyper-cholesterolemic, and ISP is hypocholesterolemic only when compared to casein.

• Proceedings of the Korean Society of Applied Pharmacology
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• 1993.04a
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• pp.135-135
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• 1993

신호전달과정에 중요한 역할을 하고 있는 다기능 serinei/threonine 단백질인산화효소인 protein kinase C(PKC)의 연구를 위해 이 효소의 정제를 뇌에서 착수하였다 PKC의 활성측정을 myelin basic protein을 기질로 하여 20 mM Tris 완충용액 PH 7.5, 0.15 mM [${\gamma}$-$^{32}$P]ATP(3 $\times$ $10^{5}$ cpm), 0.1 mM $Ca^{2＋}$, 10$\mu\textrm{g}$ phosphatidylserine과 2$\mu\textrm{g}$ diolein을 넣어 반응시켰다. 반응은 TCA로 정지시킨 후 방사성 단백질을 Millipore filter paper로 걸러 섬광 계수기로 읽었다. Cytosol PKC의 정제과정은 첫 단계에서 DEAE-cellulose를 사용하였으며, phenyl sepharose CL-4B와 protamine agarose를 연속적으로 이용하여 800배의 정제에 성공했다. SDS-PACE 상에서 80 kD로 나타났으며 순도는 95 % 이상이였다. 이를 이용 PKC의 각종 기질 연구에 착수하기 시작했으며, 이중 MBP의 인산화연구를 통한 myelin의 안정성과 MBP와의 구조 관계가 일부 수행되고 있다 연차적으로 PKC와 이와 관련된 단백질의 특성을 살피기 위해 뇌의 PKC 기질 중 cold stress를 통해 환경에 민감한 것을 찾고 있으며, 현재 autoradiography를 이용해 80 kD, 54 kD, 49 kD와 35 kD의 단백질이 연구대상이 되고있다. 그 중 49 kD는 B-50(또는 GAP43, neuromodulin이라고도 함)일 가능성이 높아 이 단백질 조절과 PKC 활성화 사이의 관계 정립이 흥미로운 과제로 대두되고 있다.다.

• Journal of the Korea Academia-Industrial cooperation Society
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• v.8 no.1
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• pp.156-166
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• 2007

Soybean meal was widely used as a protein source in pig feedstuff because it has a good amino acid balance compared with other vegetable sources. However, soybeans contain trypsin inhibitors and other antinutritional factors which can lead to lower the digestibility of amino acid, and consequently reduce the growth performance. Heat treatment of soybeans is helpful shown to decrease the antinutritional factors and elicit an improved growth performance. Additionally, microbial processe using(HP 100, HP 200 and HP 300), and non-protein constituent removal are suggested to improve the growth performance and nutrient digestibility. Inadequate heat treatment of soybeans gives no damage to adult pig, but it has been shown to decrease nutrient digestibility in young pig. So, soy protein concentrate (SPC) and Isolated soy protein(ISP) were more widely used for nursery pigs than growing and finishing pigs, since SPC and ISP have similar characteristics as milk product.

• Proceedings of the Korean Society of Life Science Conference
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• 2001.06a
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• pp.3-41
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• 2001

단백질의 부분 가수분해는 산성 음료에서의 용해도 증가, 환자들의 소화력과 알러지 내성의 개선, 다른 기능적 특성의 개발 등을 위하여 식품산업에 널리 이용되고 있다. 그러나 우유 단백질이나 대두 단백질과 같은 몇 가지 단백질들은 가수분해에 의하여 강한 쓴맛을 형성한다, 단백질 가수분해물의 쓴맛에 관한 연구는 1950년대 초에 시작되었으며, 여러 가지 원료로부터 쓴맛물질이 분리되었다. 이들 단백질 가수분해물의 쓴맛 물질은 올리고펩타이드로 알려져 있으며, 펩타이드 분자를 구성하는 소수성 아미노산의 존재와 밀접한 관계가 있는 것으로 보고되고 있다. 본 연구에서는 최근에 발달된 분석기술과 생명공학적 기법으로 E. coli에서 생산한 콩 단백질 단일 subunit를 이용하여 효소적 가수분해물의 분자구조를 확인하고자 하였다. 탈지대두박으로부터 115 glycinin와 E.coli떼서 발현된 proglycinin을 각각 90%, 97%의 정제도로 분리하여 이들 단백질을 trypsin으로 각각 가수분해하였다. 115 glycinin은 효소/기질 비 3%에서 4시간 가수분해에 의해 $14.0{\times}10^{-5}$ M quinine-HCI equivalent의 강한 쓴맛을 나타내었으며, 12%의 가수분해도(DH)를 나타내었다. 대두 단백질의 쓴맛 성분을 확인 위하여 이미 아미노산 서열이 밝혀진 11S glycinin과 proglycinin 가수분해물에서 GP-HPLC, $C_{18}$ RP-HPLC 등을 통하여 쓴맛 peptide들을 분리하였다. 각각의 분획은 다시 21개의 peptide로 분리되어 그 서열이 결정되었으며 이중 RP와 GI는 이미 알려진 쓴맛 dipeptide였고, LAGNQEQE, SAEFG, NALPE, KLHENIAR, GMIYPG 등이 주된 쓴맛 Peptide로 확인되었다. 이들은 11S glycinin의 5개의 subunit 중에서 그 위치가 확인되었다. Proglycinin 가수분해물에서도 11S glycinin과 같은 방법으로 7개의 쓴맛 peptide가 분리되었다. 이들은 $A_{1a}B_{1b}$의 아미노산 서열 중에서 37-42, 103-110, 164-167, 323-327, 367-373의 위치에 분포하고 있었으며, NALKPD, IYPGCPST, SlDT, HNIGQT, NAMFVPH의 서열을 나타내었다. 분리된 쓴맛 peptide 중에서 가장 쓴 두 분회의 peptide를 합성하여 관능 검사한 결과, NALPE는 매우 쓴맛을 내는 peptide로 확인되었다.

• Korean Journal of Food Science and Technology
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• v.27 no.3
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• pp.313-317
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• 1995

Ion exchange process was optimized to purify ultrafiltrated bean cooking water(BCW) for the production of soy-oligosaccharides. The ultrafiltrated BCW with cutoff MW(COMW) 20,000 membrane was treated with various ion exchange resins. Protein and ash were mostly removed by anion and cation exchange resins, respectively. Based upon removing capabilities for ash and protein, a cation exchange resin(SK1B) and an anion exchange resin(WA30) were selected. Protein and ash were more efficiently removed at low extract/resin ratios(ERR), but part of the oligosaccharides were concomitantly lost. When 2-step-ultrafiltrated BCW first with COMW 20,000 membrane and successively with COMW 5,000 membrane was treated with a mixed resin(SK1B : WA30 =1 : 2) at ERR 5.0, most oligosaccharides were recovered in a clear protein- and ash-free liquid.

• Korean Journal of Food Science and Technology
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• v.14 no.2
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• pp.106-111
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• 1982

To investigate the soybean trypsin inhibitors from seven varieties of soybeans and their twenty one $F_1-hybrids$, water soluble proteins were extracted. Trypsin inhibitors were isolated from those proteins and purified by sephadex G-75 column chromatography and polyacrylamide gel electrophresis. Total 16 kinds of trypsin inhibitors were isolated. From each variety of soybeans, $5{\sim}12$ kinds of trysin inhibitors could be detected and among them, 5 kinds of trypsin inhibitors were mainly distributed.

• Journal of Life Science
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• v.6 no.3
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• pp.185-192
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• 1996

Bacteriophage T7 gene 2.5 protein, a single-stranded DNA binding protein, is required for T7 DNA replication, recombination, and repair. T7 gene 2.5 protein has two distinctive domains, DNA binding and C-terminal domain, directly involved in protein-protein interaction. Gene 2.5 protein participates in the DNA replication of Bacteriophage T7, which makes this protein essential for the T7 growth and DNA replication. What gene 2.5 protein makes important at T7 growth and DNA replication is its binding affinity to single-stranded DNA and the protein-protein important at T7 DNA replication proteins which are essential for the T7 DNA synthesis. We have constructed pGST2.5(WT) encoding the wild-type gene 2.5 protein and pGST2.5$\Delta $21C lacking C-terminal 21 amino acid residues. The purified GST-fusion proteins, GST2.5(WT) and GST2.5(WT)$\Delta$21C, were used for whether the carboxyl-terminal domain participates in the protein-protein interactions or not. GST2.5(WT) and GST2.5$\Delta$21C showed the difference in the protein-protein interaction. GST2.5(WT) interacted with T7 DNA polymerase and gene 4 protein, but GST2.5$\Delta$21C did not interact with either protein. Secondly, GST2.5(WT) interacts with gene 4 proteins (helicase/primase) but not GST2.5$\Delta$21C. these results proved the involvement of the carboxyl-terminal domain of gene 2.5 protein in the protein-protein interaction. We clearly conclude that carboxy-terminal domain of gene 2.5 protein is firmly involved in protein-protein interactions in T7 replication proteins.