This study was carried out to investigate the general characteristics such as volume, sperm concentration, sperm motility, sperm abnormality on whole semen, removed seminal plasma(RSP) semen and fractional semen of small dogs, and the effect of temperature and preservatio time and cryopreservation on motility of whole and removed seminal plasma semen. Multiple ejaculates were collected from small dogs by the digital manipulation of penis. 1. Average sperm concentration, sperm motility and abnormal sperm rates of whole semen and RSP semen were 5.07$\pm$2.32$\times$10$^{6}$ cells/$m\ell$, 95.42$\pm$2.65%, 4.42$\pm$0.157% and 4.69$\pm$3.27~4.25$\pm$3.65$\times$10$^{6}$ cells/$m\ell$, 91.17$\pm$3.85~88.52$\pm$3.85%, 6.57$\pm$0.43~5.54$\pm$0.52%, respectively. 2. Average semen volume per ejaculate, sperm concentration, sperm motility and abnormal sperm rate of 1st fractional semen were 0.92$\pm$0.7$m\ell$, 4.57$\pm$0.78$\times$10$^{6}$ cells/$m\ell$, 10.72$\pm$3.21% and 5.50$\pm$0.70%. Average semen volume per ejaculate, sperm concentration, sperm motility and abnormal sperm rate of 2nd fractional semen were 2. 14$\pm$0.19$m\ell$, 2.01$\pm$0.12$\times$10$^{6}$ cells/$m\ell$, 95.44$\pm$4.21% and 4.31$\pm$0.53%. Average semen volume per ejaculate, sperm concentration, sperm motility and abnormal sperm rate of 3rd fractional semen were 2.66$\pm$0.23$m\ell$, 2.35$\pm$0.21$\times$10$^{6}$ cells/$m\ell$, 90.71$\pm$2.63%, 6.33$\pm$0.91%, respectively. 3. Motility of whole semen and RSP semen were higher at 2$0^{\circ}C$ than at 4$^{\circ}C$ or 37$^{\circ}C$. When preservation temperature was 2$0^{\circ}C$, sperm motility were 98.32% at 1 hr, 92.15% at 5 hrs, 90.23% at 10 hrs 82.08% at 15 hrs 70.07% at 20 hrs 60.02% at 20 hrs 37.19% at 40 hrs respectively. 4. Average sperm motility of frozen 2nd fraction semen and RSP semen were 33.3$\pm$8.7, 54.7$\pm$9.5%, respectively. Sperm motility was significantly higher in frozen 2nd fraction semen and RSP semen compared with control group.
Kim, Sung Woo;Lee, Jinwook;Kim, Kwan-woo;Kim, Chan-Lan;Jeon, Ik Soo;Lee, Sung-soo
Journal of Embryo Transfer
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v.32
no.3
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pp.235-241
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2017
To preserve genetic materials, cryopreservation of the semen from live animals is the main technique to establish cryo-banking system which could be used for artificial insemination and embryo transfer. However, the population of Korean black goat (KBG) becomes to dwindle in number and is now faced genetic erosion by crossbreeding with non-native breeds in small KBG farms. In this study, simple freezing method was used to preserve frozen semen from KBG using spermatozoa of cauda epididymis (CE) and electro-stimulated semen (ES). The negative effects of seminal plasma on fresh sperm was confirmed using precipitation test of Triladyl egg yolk diluent and sperm viability after thawing was compared between CE and ES spermatozoa. When seminal plasma of fresh ES semen was washed with semen washing media (SWM), the rates of live sperm shown no significant difference between CE and ES spermatozoa before freezing. However, the survival rate of frozen/thawed CE sperm was higher than ES ($74.6{\pm}10.6%$ vs $53.8{\pm}5.2%$) with significant difference (p < 0.05). The results of longevity test on frozen/thawed sperm from CE showed healthier sperm than ES. Therefore, spermatozoa from CE could be used for cryo-banking system in KBG lines. The more studies are needed to increase survival rate of ES semen.
Shin J. S.;Kim, C.;S. J. Uhm;Kim, N. H.;Lee, H. T.;K. S. Chung
Korean Journal of Animal Reproduction
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v.22
no.4
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pp.395-403
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1998
In this study we determined fertilization processes and developmental ability of porcine oocytes following injection of round spermatid in the presence and absence of artificial activation. Electrical stimulation at 2 h before spermatid injection significantly increased the incidence of normal fertilization as compared to those following injection without stimulation or with stimulation immediately after injection. The incidences of two pronuclear formation and apposition were not different in oocytes between following intracytoplasmic spermatid and spermatid nucleus injection. Indirect immunocyto chemistry and laser scanning confocal microscopy study revealed that microtubuels were organized from the oocyte cortex following round spermatid injection, and this seemed to move both male and female pronuclei into the oocyte center. At 6 days following injection blastocoele formation was seen in the eggs following round spermatid (25%) and round spermatid nucleus injection (27%). However, none of oocytes developed to the blastocyst stage at 6 days following sham injection. The average cell numbers of blastocysts at 8 days following injection of spermatid and spermatid nucleus were 87 to 99. These results suggested that either round spermatid or it's nudeus can be used to produce viable embryos by injection into unfertilized oocytes in the pig.
Kim, Gi-Young;Lee, Jae-Seok;Chi, Hee-Jun;Kim, Jong-Hyun
Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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v.37
no.3
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pp.245-251
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2010
Objective: Human sperm nucleus DNA damage may negatively affect pregnancy outcome, and the spermatozoa of infertile men have more DNA damage than that of fertile men. The aim of this study was to evaluate the effect of microsurgical varicocelectomy on human sperm nucleus DNA integrity. Methods: We reviewed the medical records of 18 subfertile male patients who underwent microsurgical varicocelectomy at our hospital from April 2006 to April 2007. Varicocele was diagnosed by physical examination and Doppler ultrasound. Standard semen analysis was performed in 18 patients before and 4 months after microsurgical varicoceletcomy using a computer assisted semen analyzer. Sperm nucleus DNA integrity was assessed by a single-cell gel electrophoresis (comet assay). Results: No recurrence of varicocele was observed after 4 months later. The DNA fragmentation index improved after varicocelectomy compared with pre-operatively (19.3 versus 13.7%, respectively, p<0.05). Semen analysis parameters (total count, concentration, motile sperm, viability, strict morphology) increased after varicocelectomy, but the difference did not reach statistical significance. Conclusion: Our data suggest that microsurgical varicocelectomy can improve semen analysis parameters and human sperm nucleus DNA integrity in infertile men with varicocele.
Kim, Nam-Hyung;Shin, Ji-Su;Jun, Soo-Hyun;Lee, Hoon-Taek;Chung, Kil-Saeng
대한생식의학회:학술대회논문집
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1999.05a
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pp.45-52
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1999
포유동물의 수정은 정자가 난자내로 침입함으로써 시작되는데 이때 정자는 부계의 유전물질 이외에도 다양한 후성적 요소들 (epigenetic factors), 즉 난활성 인자, 중심체, 부계 유래의 mitochondria 및 부계 특이 삽입 유전자 등을 난자에 전달해 준다. 하지만 수정 및 초기 배발달동안 정자에 의해 전달된 후성적 요소들의 역할과 기능적 발현 및 억제 기전에 관해서는 명확히 알려져 있지 않다. 수정보조기법인 ICSI 및 ROSI의 개발은 남성불임치료에 혁신적인 기술로 자리잡고 있을 뿐만 아니라 포유동물의 수정과정을 이해 하는데 많은 도움을 주고 있다. 본 연구실에서는 최근 몇 년간 돼지난자에 정자, 다양한 정자 구성 요소들, 정낭세포, 및 이종의 정자 등을 미세주입하여 수정을 유도한 후 핵질 및 세포질의 변화과정과 배 발달과정을 살펴 봄으로써, 수정시 정자에 의해 전달되는 후성적 요소들의 기능과 발현 기작을 규명하고자 하였다. 이러한 연구의 결과들은 체외수정, ICSI, ROSI 등의 임상치료기술의 개선에 기초자료로 활용될 수 있으리라 생각한다.
To investigate the influences on semen parameters and fertilizing capacity of immunoglobulin (Ig) isotypes and regional distribution of antisperm antibody (ASA) on the human sperm surface. Sixty-seven ASA-positive patients were compared with 96 ASA-negative donors. ASAs in semen showed significant negative effects on both semen parameters and fertilizing capacity; in those with ASAs in the sperm head and/or tail, the reductions were significant. In the head as well as the tail, there was close correlation between fertilizing capacity and both IgG and IgA. Both semen parameters and fertilizing capacity are significantly affected by the presence of ASA in semen. In particular, antibodies IgG to sperm head and/or tail, and antibodies IgA to sperm tail appeared to have a highly detrimental effect on fertilizing capacity.
Objective: To compare the clinical outcomes of ICSI with sperm retrieved from testicular tissue in patients with obstructive azoospermia (OA) or hypospermatogenesis (HS). Methods: From January 2003 through December 2006, 155 patients with OA (241 cycles) and 28 patients with HS (34 cycles) were included in this study. We compared clinical outcomes of ICSI with testicular sperm such as fertilization rate, implantation rate, clinical pregnancy rate and delivery rate. Data were statistically analyzed using t-test and ${\chi}^2$-test. Results: Testicular spermatozoa could not be retrieved in 1 out of the 21 cycles where fresh testicular sperm extraction in HS patients. Fertilization rate (FR) was significantly higher in OA than HS (75.6 % vs. 62.6%, p<0.001). Cleavage rate (CR) per fertilized zygote was also significantly higher in OA than that in HS (66.8% vs. 54.8% p<0.001). However, there were no significant differences in good embryo rate (GER), clinical pregnancy rate (CPR), implantation rate (IR) and delivery rate (DR). Conclusion: Our results show that testicular sperm of HS does not affect CPR, IR, and DR although it has shown reduced FR and CR.
흰쥐 정자의 성숙과정중에 일어나는 부정소 상피세포, 내강 및 정자 사이의 상호관계를 알아보기 위하여 각 실험군 별로 웅성호르몬 투여에 따른 탄수화물 관기의 함량 변화를 측정하였고, tunicamycin 투여 후 hexosamine의 할량 변화를 살펴봄으로써 glycosylation되는 장소를 확인하였다. 부정소두와 부정소이 상피세포내의 hexose 함량은 거세 후 5일군부터 유의성있게 감소하였고, testosterone 투여시는 각각 5일 , 10일군부터 유의하게 증가하였으며 , hexosamine과 sialic acid의 경우도 통계적으로 유의하게 변화하는 시기는 달랐으나 hexose와 유사하게 증가와 감소하는 경향이 나타났으므로 이러한 하나하나의 탄수화물 관기의 함량 변화는 웅성호르몬에 의존적임을 알 수 있었다. Tunicamycin을 투여하여 hexosamine의 함량 변화를 측정하였을 때 투여 기간에 따라 상피세포와 내강액에서 유의하게 감소하였으나, 정자에서는 일관성있게 감소되지 않았으므로 정자가 직접 hexosamine또는 여러 당단백질 합성에 관여하는 것은 아니며 부정소상피세포나 내장에 의하여 영향받을 수 있다는 가능성을 확인하였다.
Testosterone deficiency syndrome (TDS) is normally observed in elderly men and is a clinical and biochemical syndrome, characterized by a decline in plasmic testosterone levels resulting in a significant decrease in quality of life. The aim of this study was to evaluate the effect of a mixed extract of fenugreek seeds and Lespedeza cuneata (YHM) on TDS. Rats were divided into three groups: the negative control, YHM-40 (40 mg/kg), and YHM-80 (80 mg/kg) groups. After 4 weeks of YMH administration, an increase was observed in the plasmic testosterone levels, vastus lateralis muscular strength, forced swimming time, total sperm counts, and motile sperm counts in YHM-40 and YHM-80 groups compared to the negative control group. Moreover, sex hormone binding globulin, the epididymal fat pad, total plasmic cholesterol, and triglyceride levels were significantly decreased in the YHM-fed groups. However, prostate specific antigen, aspartate aminotransferase, and alanine aminotransferase levels did not differ among the groups. These results suggest that YHM may enhance testosterone levels in elderly men and alleviate TDS without common side effects.
This study was designed to evaluate the changes in sperm motility, viability, HOST(hypo-osmotic swelling test), IVP(in vitro penetration), SCSA(sperm chromatin structure assay) during storage of liquid semen collected from boars with different farrowing rates using AI, and to find the relationship between boar fertility through AI and sperm diagnostic parameters during semen storage. The results of HOST were significantly decreased according to the increasing of in semen storage days and the results of IVP were significantly decreased at 3 days of semen storage (P<0.05). The %Red was significantly different among the >80%, 7080% and <70% farrowing rate group at semen storage day 6(P<0.05). The correlation coefficients between the %Red and farrowing rate were increased according to the semen storage. In conclusion, these results suggest that the sperm parameters evaluated in these studies may be useful indicators to predict the fertility of AI and evaluate the semen quality in boars.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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