The totipotential spermatogonial stem cells of adult testis which give rise to mature sperm cells is well-known to incorporate foreign DNA as well as those of somatic cells. Also, the integration rates of foreign DNA after haploid stages are generally known to decrease and /or is simply bound foreign DNA into the sperm plasma membrane. To overcome these problems, liposome and DNA complexes were used to determine how direct injection of these complexes into testis were integrated into sperm genome and resulted in transgenic offspring. To study this purpose, cation liposome was gently mixed with WAF/hGH DNA (1 : 2) and the complexes were injected into testis. At 10, 20, 40, 60, and 80 days after direct injection into testis, mature sperm cells were recovered by using artificial virgin method from two goats and each semen except a part of semen used for DNA analysis such as PCR or Southern blotting was cryopreserved for the artificial insemination. The results obtained in this study are summarized as follows. 1. By PCR, the presence of exogenous DNA was confirmed up to 80 days after injection with liposome/DNA complexes. The highest integration rates were obtained at day 40 after direct injection. This results suggested that spermatogonial stem cells were integrated exogenous DNA into their genome. 2. Among 23 Korean Native Goats which were artificially inseminated, 4 goats resulted in pregnancy and produced 7 young goats. 3. Two young goats were confirmed as a transgenic by PCR and Southern blot analysis. Therefore, our results suggested that testis-mediated gene transfer can be used as a feasible tools for the production of transgenic livestock.
This experiment was conducted to find out the effects of the six different feeding methods on the development of body weight, testis, comb and pituitary gland, and the sexual maturity of White Plymouth Rock cockerels. From hatching to 22 weeks of age, the weights of whole body, testis, comb and pituitary gland, and the histological changes of testis and the semen characteristics were checked every other week. The results obtained in this expeniment were as follows: 1. The growth rates of the self-feeding groups were faster than those of the limited feeding groups (70 percent of the self-feeding) by about 2 weeks. The weights of testis and comb showed the most marked increase at 20 weeks of age in the self-feeding groups and at 22 weeks of age in the limited feeding groups, respectively. 2. The weights of pituitary gland from hatching to 22 weeks of age at all observation weeks were not recognised significantly among the compared groups except 4, 14 and 16 weeks of age. 3. Correlations between week of age, body weight, testis, comb and pituitary gland, in the course of 22 weeks, were highly significant. 4. The diameters of lumina and tubules in the seminiferous tubules increased very slowly until 10 weeks of age. They showed the most marked increase at 12 weeks of age in the self-feeding groups and at 14 weeks of age in the limited feeding groups, and then continuously increased until 32 weeks of. age. 5. Primary spermatocytes appeared at first at 8 weeks in the all treatment groups, Secondary spermatocytes appeared at first at 10 weeks in the self-feeding groups and at 12 weeks in the limited feeding groups. At 14 weeks of age spermatids and spermatozoa were found at first in the self-feeding groups but spermatids were found in the limited feeding groups. 6. Age of the first ejaculation was between 14 and 16 weeks of age in the all treatment groups. The Average semen. volume and sperm concentration ranged from 0.1-0.2$m\ell$/ ejaculate and 5.6-9.8${\times}$10$\^$8/ sperm/$m\ell$ at the age of the first ejaculation but 0.30-0.35$m\ell$/ ejaculate and 22.4-42.7${\times}$10$\^$8/ sperm int at the 20 weeks of age in the all treatment groups.
Journal of the Korea Academia-Industrial cooperation Society
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v.17
no.10
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pp.199-203
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2016
Apolipophorin-III (apoLp-III) was isolated and purified from the last larval hemolymph of Galleria mellonella by KBr gradient ultracentrifugation and gel chromatography (Sephadex G-100). After KBr gradient ultracentrifugation, the lipophorin-free fractions were used as the samples for gel chromatography. The purity of the finally purified apoLp-III was confirmed by SDS-PAGE after gel chromatography. In this study, we found that apoLp-III is taken up into the adult testes in Galleria mellonella. The testes were dissected from day-1 or -2 adults in cold Ringer's solution and used for tissue culture. The protein moiety of apoLp-III was labeled with FITC dissolved in dimethyl sulfoxide (DMSO) at room temperature under conditions of continuous stirring for 1 h. The FITC-labeled apoLp-III was purified with a Sephadex G-25 PD-10 column. The tissues of the adult testes were incubated at room temperature for 30 min with fluorescein isothiocyanate (FITC)-labeled apoLp-III. Fluorescein microscopy and sodium dodecyl sulfate (SDS)-polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) revealed that the adult testis tissues internalize the FITC-labeled apoLp-III. The results showed that apoLp-III is taken up by the adult testes.
Park, Y.S.;Song, S.J.;Lee, H.J.;Lee, S.J.;Kim, N.H.;Lee, H.T.;Chung, K.S.
Korean Journal of Animal Reproduction
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v.23
no.1
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pp.29-36
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1999
This study were performed the effect of methylxanthine derivatives on hamster epididymal sperm motility. To assess the effect of methylxanthine derivatives on motility kinematics of epididymal sperm, pentoxifylline, 2-deoxy-adenosine and hypoxanthine were added to TALP medium. 1 mM of pentoxifylline, significantly increased VCL, VAP, VSL of spermatozoa obtained from corpus and cauda epididymis. With 1 mM of 2-deoxyadenosine, VCL, VAP, VSL of spermatozoa obtained from corpus and cauda epididymis were significantly increased, but 2 mM ADE for cauda spermatozoa was effective than 1 mM. In the case of hypoxanthine, various concentrations were not significantly effective, but 2 mM HX showed higher effect than other concentrations. pentoxifylline 1 mM and 2-deoxyadenosine 1 mM significantly increased VCL, VAP of corpus and cauda epididymal spermatozoa and VSL of cauda epididymal spermatozoa. From these results it could be concluded that the addition of methylxanthine increase motility kinematics of hamster spermatozoa collected from epididymis.
동물에서 활성산소계(reactive oxygen species, ROS)의 지속적이고 과도한 노출과 산화스트레스는 생리적 기능의 저하, 노화 또는 많은 질환의 원인이 되고 있으며 항산화제의 투여효과에 대한 연구가 최근 많이 이뤄지고 있다. 본 연구는 Vit. C의 공급이 절대. 필요한 guinea pig를 공시하여 녹차 추출물 중 항산화제인 polyphenol과 Vit. C의 경구 투여에 따른 정소 내 정자형성과 항산화기능의 변화 및 액상 돼지정액에 첨가 후 정액성상 변화에 대하여 조사하였다. (중략)
사람을 포함한 포유류의 정자형성과정은 시상하부에서 분비된 생식소자극호르몬 방출호르몬 (gonadotropin releasing hormone)의 영향 하에 뇌하수체에서 합성 분비되는 난포자극호르몬 (follicle stimulating hormone; FSH) 과 황체화호르몬 (luteinizing hormone; LH)에 의해서 조절된다. LH의 라이디히 세포 (Leydig cells) 자극으로 인한 testosterone 의 합성분비가 성체(adult)의 정자형성과정과 그 유지(maintenance)에 매우 결정적이다. 반면, FSH는 미성숙 개체의 정소에서 일어나는 예비적 정자형성과정에 있어 중요한 역할을 하며, 성체에서도 질적인 면에서의 정자형성과정에 관여하는 것으로 사려된다. 그러므로, 시상하부-뇌하수체-정소의 축(axis)을 이루는 어느 한 성분에서라도 이상이 생기면 정자의 형성과정은 치명적인 영향을 받을 수 있다. (중략)
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[게시일 2004년 10월 1일]
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