The early senescence mutant induced from Gihobyeo by $\gamma-ray$ irradiation was determined. The mutated gene expression was identified with comparing the characteristic of original cultivar. The mutant had so similar the morphological characteristics to original cultivar that it couldn't be distinguished until senescence occurred at about 20 days after heading. Suddenly yellow leaves were observed within a few days due to great decreases in total chlorophyll and various carotenoid contents. Transmission electron microscopy showed the formation of starch granules, distortion of fine structure of leaf cell organelles, especially grana structures, and the decrease in grain filled after senescence occurred. But banding patterns of total proteins and isozymes have not show any differences, The early senescence mutant will be very useful for study material not only on physiological and biochemical properties of plant senescence but also on gene expression regulating senescence which gives great influence on yield potential and its stability.
Kim, Woo-Jin;Yim, Jae-Joon;Lee, Jae-Ho;Yoo, Chul-Gyu;Chung, Hee-Soon;Han, Sung-Koo;Chung, June-Key;Shim, Young-Soo;Kim, Young-Whan
Tuberculosis and Respiratory Diseases
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제45권4호
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pp.760-765
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1998
Background: Glucose uptake has been found to be increased in cancer cells, and FDG-PET imaging is used for diagnosis of cancer using this phenomenon. However, the exact mechanism of increased glucose uptake in cancer cells has not been clarified. Recent studies demonstrated the presence of glucose transporter(GLUT) mRNA expression in gastrointestinal cancer and head and neck cancer, and suggested that GLUT may be associated with glucose uptake in cancer cells. In lung cancer cells, glucose metabolism is also known to be increased. We evaluated GLUT mRNA expression in human lung cancer cell lines in order to find out the mechanism of increased glucose uptake in lung cancer. Method: Total RNA was isolated from 15 human lung cancer cell lines and immortalized bronchial epithelial cell line(BEAS-2B). After electrophoresis of $20{\mu}g$ total RNA, Northern blot analysis was done using GLUT1 cDNA and GLUT3 cDNA as probes. Results: Thirteen of 14 human lung cancer cell lines expressed GLUT1 mRNA and 10 of 14 human lung cancer cell lines expressed GLUT3 mRNA. Eight human lung cancer cell lines expressed both GLUT mRNAs. BEAS-2B expressed GLUT1 mRNA and did not express detectable GLUT3 mRNA. Conclusion: The increase of glucose metabolism in lung cancer may be associated with GLUT1 and GLUT3 expression.
Aspergillus niger IFO 8541 (NRRL 3112) was investigated through a series of UV rays and N-Methyl-N'-Nitro-N-Nitrosoguanidine (NTG) treatments to induce mutants that produce highly active raw starch saccharifying enzyme, and two mutants with strong enzymatic productivity were obtained. The mutants obtained were investigated for their fungal characters, condition of enzyme production, and other activities. Furthermore, the raw starch saccharifying enzyme was purified and the characteristics of purified enzyme were studied. The results obtained were summarized as follows; 1. The color of conidial head of UV-46 mutant obtained from UV rays treatment was changed to tan type and the gelatinated starch saccharifying enzyme productivity and the raw starch saccharifying enzyme productivity increased up to twice and 1.8 times compared to the productivities of original Aspergillus niger IFO 8541 cultured on the wheat bran, respectively. 2. The conidial head color of NG-41 mutant obtained from NTG treatment became lighter than that of parent strain. The gelatinated starch saccharifying enzyme productivity and raw starch saccharifying enzyme productivity increased about 1.8 times, and twice over the Aspergillus niger IFO 8541 parent strain cultured on wheat bran, respectively. The productivity of ${\alpha}$-amylase increased about 3 times more than the parent strain. 3. Two peaks of glucoanlylase and a peak of ${\alpha}$-amylase were obtained when enzyme solution of mutants and parent strain were passed through DEAE-Sephadex A-50 column chromatography. Glucoamylase I showed only gelatinated starch saccharifying enzyme activity. However, glucoamylase II (raw starch saccharifying enzyme) showed both raw starch saccharifying enzyme activity and gelatinated starch saccharifying enzyme activity. 4. Mutant, UV-46 was strengthened in glucoamylase II productivity and mutant NG-41 was strengthened in ${\alpha}$-amylase productivity. 5. Glucoamylase II of mutants and parent strain were appeared to have the same enzymatic properties. 6. Glucoamylase II of mutants and parent strain were recognized as simple enzyme through electrophoresis. 7. The glucoamylase II crystallized showed rhombic board type. 8. The molecular weight, isoelectric point, optimum pH, and optimum temperature of the glucoamylase II crystallized were estimated as 76,000, 3.4, 3.5 and $60^{\circ}C$, respectively.
Background: Inactivation of retinoblastoma gene (Rb) has been observed in a variety of human cancers. Loss of heterozygosity (LOH) of Rb which is a common mode of allelic inactivation of Rb, has been known as a frequent genetic event in small cell lung cancer but it has been detected less frequently in non-small cell lung cancer. To define the role of Rb deletion in lung cancer, we investigated the genomic DNAs of 43 non-small cell lung cancers and 1 small cell lung cancer paired with normal lung tissues obtained by thoracotomy. Methods: The genomic DNAs were obtained by the digestion with proteinase K followed by phenol-chloroform extraction method. The genomic DNAs were digested by restriction endonuclease (EcoRI), separated by agarose gel electrophoresis, transferred to nylon membrane by Southern blot transfer and then hybridized with labelled Rb 1 probe which contains. 1.4 kb sized DNA sequence containing N-terminal portion of Rb. Results: In 26 squamous cell lung cancers, 16 cases were informative after EcoRI digestion and LOH of Rb was found in 10 cases (62.5%). In 17 adenocarcinomas of lung, 11 cases were informative and LOH of Rb was found in five cases (45.4%). The analysis of clinical parameters revealed no significant differences between the two groups with or without LOH of Rb in the aspects of age, sex, degree of differentiation, stage and smoking amount. Conclusions: These results suggest that Rb inactivation is also significantly involved in the molecular pathogenesis of non-small cell lung cancer.
Kim, Ho-Joong;Kim, Young-Whan;Han, Sung-Koo;Shim, Young-Soo;Kim, Keun-Youl;Han, Yong-Chol
Tuberculosis and Respiratory Diseases
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제39권6호
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pp.517-525
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1992
Background: Since its development by Saiki et al, polymerase chain reaction (PCR) has been very useful in various fields of molecular biology. PCR can be used for the detection of a very small amount of microbial agent, and is especially useful in those patients who are difficult to diagnose microbiologically or serologically. Mycobacterium tuberculosis is a very slowly growing organism and AFB staining frequently shows false negative results, and therefore PCR would be a very rapid, easy, and sensitive diagnostic method for the diagnosis of Mycobacterium tuberculosis. Method: To compare PCR with conventional methods in diagnosing Mycobacterium tuberculosis in sputum, we used sputa of patients who visited or were admitted to Seoul National University Hospital. The amplification targets were 383 base pair DNA, a part of 2520 base pair DNA encoding 65 kD Mycobacterium tuberculosis specific protein (the primers are TB-1, -2), and 123 base pair DNA, a part of IS6110 fragment, which multiple copies are known to exsist PCR one genome (the primers are Sal I-1, -2). We also requested AFB staing and culture to the lab of Seoul National University Hospital with the same sample and compared the results. Results: 1) Using TB-1, -2 primers, PCR was positive in 73.1% (19/26) of culture positive sputa, in 12.5% (1/8) of culture negative. but clinically diagnosed tuberculous sputa, and was negative in all sputa of patients who were clinically diagnosed as non-tuberculous etiology. 2) Using Sal I-I, -2 primers, PCR was positive in 94.1% (32/34) of culture positive sputa, in 23.1% (6/26) of culture negative, but clinically diagnosed tuberculous sputa, and was negative in 87.5% (14/16) of sputa from patients who were clinically diagnosed as non-tuberculous etiology. Conclusion: PCR could be a very rapid, sensitive and specific method for the diagnosis of Mycobacterium tuberculosis in sputa, and further studies should be followed for the development of easier method.
Background : Rifampicin(RFP) is a key component of the antituberculous short-course chemotherapy and the RFP resistance is a marker of multi-drug resistant(MDR) tuberculosis. RPoB gene encodes the $\beta$-subunit of RNA polymerase of M. tuberculosis which is the target of RFP. And rpoB gene mutations are the cause of RFP resistance of M. tuberculosis. Although several reports showed that PCR-SSCP would be a rapid diagnostic method for identifying the RFP resistance, there were few reports Performed using direct, clinical specimens. So we Performed PCR-SSCP analysis of rpoB gene of M. tuberculosis in direct, clinical specimens. Methods : 75 clinical specimens were collected from patients at Asan Medical Center from June to August 1996. After PCR of IS 6110 fragments, 43 both AFB smear-positive and IS6110 fragment PCR-positive specimens were evaluated. The RFP susceptibility test was referred to the referral laboratory of the Korean Tuberculosis Institute. DNA was extracted by bead beater method. And heminested PCR was done using 0.1ul(1uCi) [$\alpha-^{32}P$]-dCTP. SSCP analysis was done using non-denaturating MDE gel electrophoresis. Results : The results of PCR of IS6110 fragments of M. tuberculosis were positive in 55(73%) cases of 75 AFB smear-positive clinical specimens. Of the 55 specimens, RFP susceptibility was confirmed in only 43 specimens. Of the 43 AFB smear-positive and IS6110 fragment-positive specimens, 29 were RFP susceptible and 14 were RFP resistant. All the RFP susceptible 29 strains showed the same mobility compared with that of RFP sensitive H37Rv in SSCP analysis of ropB gene. And all the other RFP resistant 13 strains showed the different mobility. In other words they showed 100% identical results between PCR-SSCP analysis and traditional susceptibility test. Conclusion : The PCR-sseP analysis of rpoB gene in direct clinical specimens could be used as a rapid diagnostic method for detecting RFP resistant M. tuberculosis.
생물학적 동등성 시험은 동일 성분을 동량 함유한 제제가 유사조건에서 투여되었을 경우 그 유효성분이 전신순환혈이나 작용부위에서 유용하게 되는 속도 및 양에 큰 차이가 없음을 입증하는 시험이다. 즉 이미 제조허가 되어 시판중인 의약품과 동일한 품목의 제조허가를 받기 위한 경우이거나 생체이용률이 동일함을 증명하기 위해 실시하는 시험이다. 우리 나라에서는 1989년 1월 1일 이후 허가된 전문의약품으로서 신약과 동일한 의약품, 패취제제, 제제개선을 통해 흡수율을 높이는 경우에 생물학적 동등성 시험을 하도록 의무화하고 있다. 미국 FDA는 1975년 6월 생체이용률, 생물학적 동등성에 관한 규제안을 발표하였고, 우리 나라에서도 1988년 10월에 생물학적 동등성 시험 기준을 제정하였다. 유럽에서는 1991년 12월 CPMP(Committee for Proprietary Medicinal Products)에 의해 최초로 "생체이용률 및 생물학적 동등성에 대한 가이드라인"이 채택되었다. 그후 전문가 회의를 거쳐 규정 전반에 관한 것과 일반적 항목에 대한 검토가 이루어져 최종 개정된 가이드라인이 만들어졌다. 현재 in vivo 생체 이용률을 비교하는 생물학적 동등성 시험의 중요성이 증대되고 있고, 국제적으로도 각 국가별 생물학적 동등성 시험의 평가방법이나 기준설정에 대한 연구가 다양하게 이루어지고 있다. 또한 ICH에서도 생물학적 동등성 시험의 국제적 조화를 위한 시도가 이루어지고 있다. 우리 나라의 현행 생물학적 동등성 기준은 1998년 개정된 것을 사용하고 있으나 국제적 발전 추세에 맞추어 기준의 제고를 모색하고 있다. 그 일환으로 유럽의 "의약품의 생체이용률 및 생물학적 동등성 시험 가이드라인"을 소개하고자 한다., globunlin II의 두 component로 분리(分離)되었고 oryzenin은 시료(試料) 육우(陸羽) 132호(號), 등판(藤坂) 5호(號), 관산(關山) 재건(再建)에서는 oryzenin I, oryzenin II, oryzenin III의 3 component를 분리(分離)하였고 팔달(八達), 진흥(振興), 서광(瑞光), 은방주(銀坊主), 다마금(多摩錦), Pin Galw56의 6시료(試料)에서는 oryzenin II, oryzenin III의 2 component만 분리(分離)하였다. 3. 각(各) fraction을 여지전기영동(濾紙電氣泳動)하여 각(各) component의 농도곡선(濃度曲線)에 의해 함량(含量)을 구(求)한 결과(結果) albumin 0.26%, globulin I, 0.35%, globulin II, 0.32%, prolamin, 0.41%, oryzenin I, 0.30%, oryzenin II, 2.23%, oryzenin III, 2.66%이었다.미국의 경우 3일 이내 전화나 FAX로 보고하고, 10일이내 문서로써 보고하도록 되어 있다. 이러한 임상적 안전성 자료 관리에 대한 신속 보고 정의 및 기준에 대해서는 ICH에서도 논의가 되어 Step 4까지 다다르고 있으므로 앞으로 각 국에서의 적용만 남아있는 상태이고 보면 신약의 개발과 더불어 임상시험에서의 부작용등의 안전성 자료 관리에 대한 중요성은 더욱 강조될 것이다.공하는 음식의 섭취정도에도 영향을 주고 있으므로 학생들에게 학부모와 전담교사 및 학교영양사는 학생들에게 이상적인 아침식사에 대한 교육은 물론이고 아침식사를 실천할 수 있도록 다양한 방안에 대해 함께 연구해야 하겠다. 정부차원에서 학교급식에 아침식사 프로그램을 도입할
Kim, Jong-Rae;Jung, Chang-Ho;Kim, Yong-Ho;Yoon, Jong-Man
Development and Reproduction
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제10권4호
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pp.227-238
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2006
Genomic DNAs(gDNAs) were isolated from the venus clam(Gomphina aequilatera) from Samcheok(venus clam from Samcheok; VCS) and Wonsan(venus clam from Wonsan; VCW) located in the East Sea of the Korean Peninsula. The amplified products were generated by agarose gel electrophoresis(AGE) with oligonucleotides primer, detected by staining with ethidium bromide and viewed by ultraviolet ray. The seven arbitrarily selected primers BION-21, BION-23, BION-25, BION-27, BION-29, BION-31 and BION-33 generated the shared loci, polymorphic, and specific loci, with the molecular sizes ranging from 150 bp to 2,400 bp. In this study, 147 polymorphic loci(147/954 loci, 15.41%) in VCS population and 274(274/996 loci, 27.51%) in VCW population were generated with seven primers. These results suggest the genetic variation in VCW population is higher than in VCS population. Especially, the 700 bp bands generated by the primer BION-21 were identified commonly in two Gomphina populations, which identified populations and/or species. This specific primer was found to be useful in the identification of individuals and/or population, resulting from the different DNA polymorphism among individuals/species/population. Two Gomphina populations between the individual SAMCHEOK no. 03 and WONSAN no. 22 showed the longest genetic distance(0.696) in comparison with other individuals used. The complete linkage cluster analysis indicating three genetic groupings and dendrogram revealed close relationships among individual identities within two geographical populations of venus clam(G. aequilatera) from the Samcheok and Wonsan. The intra-species classification and clustering analyses inferred from molecular markers supported the traditional taxonomy of the species based on morphological characters such as shell size, shape and color. Accordingly, as mentioned above, RAPD analysis showed that VCS population was more or less separated from VCW population.
To determine the optimum application of fertilizers for the cultivation of tomato in plastic film house, eighteen soils which contained different salt contents were taken from four different areas under plastic film house cultivation, Youngdong, Boeun, Cheongweon county, and Cheongju city. The dry weight and the amount of N, P, and K uptakes of tomato in the plot with no fertilization were considered as the factors representing the fertility of the soil. The differences in the dry weight and in the amounts of N, P, and K uptakes of plants between the plots with fertilization and with no fertilization were considered as the factors representing the total effect of fertilizer and the effects of fertilizer N, P, and K, respectively. These factors of soil fertility and fertilizer effects were estimated by correlation and regression with the chemical properties of the soil in order to find the critical levels and recommended method for optimum fertilization of tomato. The standardized partial regression coefficients of inorganic nitrogen ($NO_3-N+NH_4-N$) contents in soil for the factors of fertility ranged from 247 to 1,159, showing the best, while those of the others ranged from 0.02 to 4.02. Those of inorganic nitrogen ($NO_3-N+NH_4-N$) contents in soil for the electrical conductivity were also the best and were ranged from 35.2 to 36.0 compared with the values of less than 1.0 of the others. These results demonstrate that the content of inorganic nitrogen in the soil is the best index for both soil fertility and electrical conductivity of the soil. The critical level of inorganic nitrogen ($NO_3-N+NH_4-N$) in the soil for maximum productivity with zero value of fertilizer effects for tomato, estimated through Cate-Nelson split method was $220mg\;kg^{-1}$. This was the same value as evaluation for the cultivation of chinese cabbage. In conclusion, for optimal application of fertilizer in plastic film house, 1) no fertilization is recommended when the contents of inorganic nitrogen in the soil is more than $220mg\;kg^{-1}$; however, 2) in the case of less than $220mg\;kg^{-1}$ of inorganic nitrogen content in the soil, the optimal level of fertilization could be estimated through the regression equation between fertilizer effects and content of inorganic nitrogen in the soil.
These studies were done to find out any difference, ultrastructural, physical or chemical, between the shells of diapausing and non-diapausing eggs of the silkworm, Bombyx mori L. 1. From the electron-microscopic observation, the egg shells have four distinctive layers. In addition to the four layers, the shells in the diapausing eggs has another layer with low electron density on its surface. 2. The permeability of the egg shell to hydrochloride was much lower in diapausing egg than in non-diapausing egg. Also the permeability changed in the opposite directions with the egg age: the diapausing eggs decreased while non-diapausing ones increased. 3. The permeability increased when the diapausing egg shell was treated with HCl. When they were treated with ether, however, the increase in permeability was much smaller. It seems there was an ether soluble material involved in the content of the egg shell. 4. The diapausing eggs were also much more resistant to desiccation than the non-diapausing ones. The former, when treated with HCl or chilling, became less resistant to desiccation. 5. The positive histochemical response of the egg shell to PAS-Alcian blue and protein stainings suggests presence of abundant proteins and carbohydrates in the egg shell. On the other hand, the staining response to lipid was more positive in the inner layers than in the outer layer of the shell. 6. The egg shell adhesives seems to be mucopolysaccharides produced by colleterial glands, since the oviposited eggs showed a positive responses to carbohydrate and negative to lipid-staining chemicals, but not the mature oocytes in the ovarioles. 7. There were two bands on the electrophoretic pattern of the SH proteins extracted from the egg shells both in the diapausing egg and non-diapausing one: a slow moving major component and a fast moving minor one. However, the electrophoretic mobility showed a difference in the minor components between them. It is evident that the fast moving minor one of non-diapausing egg ran a little further than that of diapausing egg. 8. In amino acids analysis, no significant differences were found in their composition between diapausing and non-diapausing egg and SH proteins contain relatively more glycine and less cystine.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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