Loss of the Retinoblastoma Gene in Non-Small Cell Lung Cancer

비소세포폐암에서의 망막모세포종유전자의 소실

Background: Inactivation of retinoblastoma gene (Rb) has been observed in a variety of human cancers. Loss of heterozygosity (LOH) of Rb which is a common mode of allelic inactivation of Rb, has been known as a frequent genetic event in small cell lung cancer but it has been detected less frequently in non-small cell lung cancer. To define the role of Rb deletion in lung cancer, we investigated the genomic DNAs of 43 non-small cell lung cancers and 1 small cell lung cancer paired with normal lung tissues obtained by thoracotomy. Methods: The genomic DNAs were obtained by the digestion with proteinase K followed by phenol-chloroform extraction method. The genomic DNAs were digested by restriction endonuclease (EcoRI), separated by agarose gel electrophoresis, transferred to nylon membrane by Southern blot transfer and then hybridized with labelled Rb 1 probe which contains. 1.4 kb sized DNA sequence containing N-terminal portion of Rb. Results: In 26 squamous cell lung cancers, 16 cases were informative after EcoRI digestion and LOH of Rb was found in 10 cases (62.5%). In 17 adenocarcinomas of lung, 11 cases were informative and LOH of Rb was found in five cases (45.4%). The analysis of clinical parameters revealed no significant differences between the two groups with or without LOH of Rb in the aspects of age, sex, degree of differentiation, stage and smoking amount. Conclusions: These results suggest that Rb inactivation is also significantly involved in the molecular pathogenesis of non-small cell lung cancer.

연구배경 : Retinoblastoma 유전자(Rb)의 비활성화는 여러 종류의 암에서 관찰되어 왔다. Rb의 이형성의 소실(loss of heterozygosity)은 Rb의 비활성화의 가장 흔한 기전으로 소세포폐암에서는 거의 모든 예에서 관찰되나 비소세포폐암에서는 훨씬 낮은 빈도로 관찰된다고 알려져 있다. 이에 저자들은 개흉수술시 얻은 한국인의 비소세포폐암 및 정상폐조직의 DNA 에서 Rb의 변화를 관찰하였다. 방법: 폐암조직 및 정상폐조직에서 proteinase K에 의한 소화 및 phenol-chloroform 추출 방법으로 genomic DNA를 추출한 후 제한효소인 EcoRI으로 소화시키고 agarose gel 에서 전기영동분리시켰다. Southern blot 방법으로 DNA를 nylon 막에 흡착시킨 후 Rb 1 탐식자로 hybridization 시켜 stringent condition에서 세척하여 X-ray 필름에 적당기간 노출시켜 현상하였다. 결과 : 26예의 편평상피세포암중 16예에서 정상폐 DNA 에서 RFLP에 의한 Rb의 이형성이 관찰되었으며 이중 10예 (62.5%)의 폐암조직 DNA 에서 이형성의 소실이 관찰되었다. 17예의 폐선암중 11예의 정상폐 DNA 에서 RFLP에 의한 Rb의 이형성이 관찰되었으며 이중 5예 (45.4%)의 폐암 DNA 에서 이형성의 소실이 관찰되었다. Rb의 비활성화 유무에 따른 두 군 사이에 연령, 성별, 암의 병기, 암의 분화도 및 흡연력의 차이가 없었다. 결론: 이상의 결과로 Rb의 비활성화는 비소세포폐암의 발생기전에 중요한 역할을 하리라 생각된다.