It is the most important step to screen soluble and insoluble proteins when we attempt to improve the solubility of recombinant proteins through directed evolution approach. Here we show that the solubility of a recombinant protein in vivo can be examined by expressing the recombinant protein with beta-lactamase as a fusion partner. First we constructed an expression system which can produc a fusion protein with the C-terminal of beta-lactamase. Two soluble proteins, i.e. adenine deaminase and aspartate aminotransferase, and insoluble GlcNAc-2-epimerase were cloned into the developed expression vector, respectively. We investigated the effect of the expression of the three recombinant fusion proteins on the growth of E. coli, and confirmed that the solubilities of the recombinant proteins correlated with cell growth rates.
ATSC (Advanced Television System Committee) has specified 18 video formats for DTV (Digital Television), e.g., scan format, size format, and frame rate format conversion. Effective MPEG-2 video transcoders should support any conversion between the above-mentioned formats. Scan format conversion Is hard to Implement because it may often induce frame rate and size format conversion together. Especially. because of picture type conversion caused by scan format conversion, the computational burden of motion estimation (ME) in transcoding becomes serious. This paper proposes a fast ME algorithm for MPEG-2 video transcoding supporting scan format conversion. Firstly, we extract and compose a set of candidate motion vectors (MVs) from the input bit-stream to comply with the re-encoding format. Secondly, the best MV is chosen among several candidate MVs by using a weighted median selector. Simulation results show that the proposed ME algorithm provides outstanding PSNR performance close to full search ME, while reducing the transcoding complexity significantly.
Kim, In-Ki;Kim, Ji-Ho;Chang, Woo-Jin;Lee, Cheol;Yun, Myung-Hwan
한국HCI학회:학술대회논문집
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2007.02a
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pp.143-149
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2007
영상은 동적인 시각 이미지와 청각의 결합에 의해 감성적인 반응을 유도한다. 다양한 영상 기법을 통하여 감성적 반응의 극대화를 추구하는 영화는 영상의 시청각적 요소들을 감성의 관점에서 효과적으로 설계하는데 본보기가 된다. 그러나, 제품의 설계속성들에 대한 감성적 평가결과를 모형화하는 감성공학적 관점에서 볼 때 영화는 시청각적 자극의 수준이 극히 다양하고 동적인 경험재로 모형화의 어려움이 있다. 본 연구에서는 영화의 감성 모형을 구축하기 위한 사전연구의 단계로 영화에서의 시청각적 요인들을 문헌조사를 통해 수집, 정리, 선별하고 이러한 시청각적 요인들 중에 영화를 관람하는 관객의 감성적, 인지적 반응에 영향을 주는 유효한 요인들을 객관적이고 체계적으로 탐색하고자 하였다. 이를 위해, 감성 및 인지적 반응의 변화를 생체신호를 통해 측정하는 한편, 생체신호의 측정 시 사용된 영화의 시청각적 자극요인을 Video/Audio Processing방법에 의해 연속적인 수치로 정량화하였다. 생체신호와 정량화된 시청각적 자극요인을 동기화하고 통계적으로 분석함으로써, 생체신호의 반응과 시청각적 자극요인과의 인과관계를 통계적으로 신뢰성있는 수준에서 검증하고자 하였다. 생체신호를 종속변수로, 시청각적 자극요인을 독립변수로 하는 896개의 부분선형회귀모형(Partial Linear Regression Model)들 중 통계적으로 유의한 선형관계에 있는 경우의 빈도분석에 의하면, 시각적 요인들 중에는 밝기(Brightness), 대비(Contrast), 색상(Color), 움직임(Motion), 장면전환속도(Shot change Rate), 주요대상의 상대적 크기가, 청각적 요인들 중에는 Peak주파수, Peak주파수의 음량, 평균음량, 소음비(Sound-to-Noise Ratio)가 생체신호의 변화에 통계적으로 유의한 영향을 주는 것으로 나타났다. 이는, 위의 시청각적 자극 요인들은 특히 관객의 감성 및 인지적인 반응에 유의한 영향을 주는 요소로 작용할 수 있음을 시사하고 있다. 이를 토대로, 위의 시청각적 자극 요인들이 가지는 다양한 조합들을 설명변수로 하는 통계적인 영화의 감성 모형을 구축할 수 있을 것으로 기대한다.
In this paper, we propose a Time Delay Traceback Scheme for the TDOA location estimation performance enhancement in NLOS environment and analyze the performance in various conditions. We place multiple readers in a square($300m{\times}300m$) searching area for reuse of received signal. Also, we use more active NLOS reader detection methode for NLOS error mitigation. when NLOS time delay 70 m, the number of the NLOS reader is 3 and the received sub-blinks number 3, proposed time delay trace-back scheme improve the RMSE about 16 m. From these results, we confirm that the proposed time delay traceback scheme is well-suited for the high precision location estimation to offer the location based service.
내열설 미생물, Thermus caldophilus CK24에 대한 탄수화물 생합성을 연구하는 과정에서 다양한 탄수화물 관련효소를 탐색하고 그레 대한 생화학적 및 분자생물학적 연구를 수행하고 있다. 일차로 내열성 미생물내 1) 당핵산염 합성효소와 당전이 효소, 2) 탄수화물 대사효소. 3)탄수화물 분해 및 전환효소의 존재를 HPLC/Bio-LC분석을 통하여 확인하고 이들에 대한 연구를 진행하고 있다. 본 연구발표에서는 포도당을 과당으로 전환하는 이성화효소(xylose isomerase), 그리고 맥아당을 트레할로스로 전환하는 트레할로스 합성효소(trehalose synthase)를 소개하고저 한다. 이성화효소는 이미 산업적 과당 생산에서 대규모적으로 사용되고 있는 식품산업효소이다. 본 연구에서는 Thermus caldophilus GK24, Thermus thermophilus HB8, Thermus flavus AT62 3종의 내열성 미생물에 대한 이성화효소 유전자를 클로닝 하고, 각 재조합하고 이성화효소를 대량생산하였다. 이 내열성 이성화효소는 최적 반응 온도가 8$0^{\circ}C$이고, 포도당을 과당으로 전환하는 수유른 55%이었다. 이러한 과당전환률은 이미 산업적으로 사용되고 있는 이성화효소의 과당전환률(43%)보다 훨씬 높은 것으로 과당 생산공정의 단순화의 생산성 향상에 결정적인 요인이라 할 수 있다. 한편 본 이성화효소의 산업적 특성을 증대하기 위하여 구조-기능관계 연구를 착수하였다. 우선 내열성 이산화 효소의 입체 구조를 결정하였고, 구조조정에 따른 기능적 특성을 조사하기 위하여 특정 위치의 선택적 변이 연구를 진행하고 있다. 끝으로 포도당 전이 효소를 추적하던 과정에서 맥아당을 트레할로스로 전환하는 새로운 효소를 Thermus caldo-philus GK24에서 발견하였다. 그 트레할로스 합성효소는 분자량이 약 110kDa이고 최적 반응온도가 75$^{\circ}C$이면, 조효소없이 맥아당을 트레할로스로 80%이상 전환해 주는 가역효소이었다. 본 연구에서는 효소반응의 조건과 특성을 조사하였고, 효소 아미노-밀단의 서열결정정보를 통하여 효소의 유전자를 클로닝 하고 그 유전자의 구조와 발현연구를 진행하고 있다.
To compare the quality of genomic DNA extracted from potato for PCR detection, four different methods, such as silica-based membrane method, silica-coated bead method, STE solution treatment, and CTAB-phenol/chloroform method, were evaluated. Also, to remove an excessive carbohydrate from the potato, ${\alpha}$- and ${\beta}$-amylase were used individually and in combination. When used both silica-based membrane method and silica-coated bead method combined with enzymes, the genomic DNAs were extracted from the raw potato with high purity for PCR. However, the silica-coated head method combined with enzyme treatment was the most efficient for extraction of the genomic DNA from the frozen fried potatoes. When applied with STE solution, the highly purified DNA was extracted from the raw potatoes without enzyme treatment in adequate yield for PCR. In cases of processed potatoes, such as frozen-fried potato and fabricated potato chips, CTAB-phenol/chloroform method is mostly feasible for DNA extraction and PCR efficacy at high sensitivity. As the results of PCR amplification, 216bp of PCR product was detected on 2% agarose gel electrophoresis, but any amplicons derived from New leaf and New leaf Y gene was not detected in any sample.
We are trying to develop a transgenic carrot with aims of production and delivery of oral vaccine against microbial enteropathogen using a K88ac pilin gene. A K88ac antigen (pilin) gene was isolated by PCR from the K88ac genomic DNA. The pilin gene was constructed in pGA748 and introduced via Agrobacterium tumefaciens to the explants of carrot hypocotyl and then 494 transgenic lines were established. The amounts of the K88ac antigen produced in each of the cell lines were determined by western and two elite cell lines (M1-17, Y14-1) were selected based on higher levels of expression of the antigens as well as rate of cell growth and efficiency of embryogenesis. In order to test an immunization induced by oral administration of the transgenic carrot, serum of the mice fed with the carrot vaccine were tested in ELISA. It tumed out that the mice fed with 3 g of transgenic carrot showed a similar level of antibody compared to those applied with 10 $\mu\textrm{g}$ of the purified recombinant pilin protein. Besides, various clinical responses were measured after challenging with ETEC K88ac strain to the piglets experiencing an oral immunization with the transgenic carrot. The piglets fed with carrot vaccine showed a lower level of diarrhea in fecal score compared to those fed with non-transgenic carrot. A higher level of increase in weight of the piglets fed with the transgenic carrot vaccine was observed comparing to those fed with non-transgenic carrot as control.
The Journal of the Institute of Internet, Broadcasting and Communication
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v.22
no.4
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pp.49-57
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2022
The government is making great efforts to prevent crimes such as missing children by using public CCTVs. However, there is a shortage of operating manpower, weakening of concentration due to long-term concentration, and difficulty in tracking. In addition, applying real-time object search, re-identification, and tracking through a deep learning algorithm showed a phenomenon of increased parameters and insufficient memory for speed reduction due to complex network analysis. In this paper, we designed the network to improve speed and save memory through the application of Yolo v4, which can recognize real-time objects, and the application of Batch and TensorRT technology. In this thesis, based on the research on these advanced algorithms, OSNet re-ranking and K-reciprocal nearest neighbor for re-identification, Jaccard distance dissimilarity measurement algorithm for correlation, etc. are developed and used in the solution of CCTV national safety identification and tracking system. As a result, we propose a solution that can track objects by recognizing and re-identification objects in real-time within situation of a Korean public multi-CCTV environment through a set of algorithm combinations.
Protein modification by N-acetyl-${\beta}$-D-glucosamine (O-G1cNAc) on the hydroxyl groups of Ser or Thr ubiq-uitously occurs in eukaryotic cells and is involved in many cellular phenomena. The level of O-G1cNAc-mod-ified protein is regulated by OGT and O-GlcNAcase enzymes. We have tried to produce recombinant O-GlcNAcase in E. coli as an effort to establish in vitro screening system for modulators of O-GlcNAcase. The culture conditions for improvement of O-GlcNAcase productivity, were as follows: induction temperature, $30^{\circ}C$; the concentration of L-arabinose, 0.02% and induction time, 5 hr. Under these culture conditions, E. coli cells containing O-GlcNAcase gene had no enzyme activity until up to 3 hr culture. However, O-GlcNAcase activity dramatically increased from 3 to 5 hr culture. It almost maintained the same level after 5 hr culture. Western blot analysis verified the amount of expressed O-GlcNAcase increased with culture time, being con-sistent with activity data. The optimal reaction condition determined in this study was as follows: protein quan-tity, $5{\mu}g$; reaction time, 30 min; reaction temperature, $45^{\circ}C$; substrate concentration, 2 mM; reaction pH, 6.5. Methanol had little effect on O-GlcNAcase activity and 90% of activity were retained at 10%. Only 15% resid-ual activity were detected at 5% of chloroform.
Ko, Myoung-Suk;Bae, Kee Hwa;Song, Gwanpil;So, In Sup
Journal of Plant Biotechnology
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v.40
no.2
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pp.79-87
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2013
The aim of this study was to establish plant regeneration from leaf explants of Sedum tosaense Makino, which is globally rare and endangered species. The leaf explants of S. tosaense were cultured on the MS medium supplemented with different concentration of BA and NAA for callus induction. Callus induction was showed the highest (100%) on MS medium containing $2.0mg{\cdot}L^{-1}$ BA and $1.0mg{\cdot}L^{-1}$ NAA. The highest number of shoots were regenerated when callus were cultured on MS medium containing $2.0mg{\cdot}L^{-1}$ BA and $1.0mg{\cdot}L^{-1}$ NAA for 5 weeks. The axillary bud were cultured on the MS media supplemented with combination of BA and NAA for in vitro propagation. The highest number of adventitious shoot (7.9 per explants) formed at $1.0mg{\cdot}L^{-1}$ NAA and $2.0mg{\cdot}L^{-1}$ BA. For rooting, MS medium supplemented with or without $2.0g{\cdot}L^{-1}$ activated charcoal was tested. The optimal results were observed using MS medium supplemented with $2.0g{\cdot}L^{-1}$ activated charcoal, on which 85.7 (No. of root), 4.6 cm (length of root). 1,200 ppm $CO_2$ and 350 ppm $CO_2$ were supplied for make certain the effects of $CO_2$ on pre-acclimatization by photoautotrophic culture. 1,200 ppm $CO_2$ treatment was established higher than 350 ppm $CO_2$ treatment. Soil acclimatization of in vitro plantlets was the best in mixture soil consisted of peat moss and perlite with 100% survival rate and they showed the maximum growth.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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