In this study, pooled whole semen and diluted semen with skim milk lactose solution and yolk skim milk lactose solution were inseminated at 6 and 7 days interval during 90 days. Egg production, fertility and hatchability were investigated. The results obtained from this study are summarized as following: 1. The average fertility of 57.8% for whole semen was clearly higher than that of 35.2% for diluted semen during 90 days insemination trial. 2. The highest fertility was a, pp.ared from 35 to 99 days after insemination for the whole semen, but from 28 to 60 days for the diluted semen during 90 days insemination trial. 3. In case of 7 days insemination interval, highest fertility of 86.6 and 70.0% for the whole semen and the diluted semen was a, pp.ared on 2 days after insemination and thereafter the fertility was gradually decreased according to passage of insemination. The lowest fertility of 35.0 and 0.0% for the whole semen and diluted semen was a, pp.ared on 1 day after insemination. 4. In case of 6 days insemination interval, highest fertility of 80.0 and 55.8% for the whole semen and the diluted semen was also a, pp.ared on 2 days after insemination and thereafter the fertility was slowly decreased according to passage of insemination. However, lowest fertility of 25.0 and 20.0% for the whole semen and the diluted semen was a, pp.ared on 0 day after insemination. 5 It suggests that there was no difference in fertility between the skim milk lactose and the yolk skim milk lactose dilutors. 6. In case of whole semen, average fertility of 7 days insemnaition interval was a, pp.rently lower than that of 6 days, however there was no difference in fertility between 6 and 7 days insemination interval. 7. Insemination interval of 6 and 7 days and passage day after insemination did not alter egg production and hatchability of fertilized egg production and hatchability of fertilized egg in both whole and diluted semen.
세계적으로 멸종위기종인 따오기 (Nipponia Nippon)는 한국에서도 멸종위기종으로 구분되어 있으며, 이를 복원하기 위해 2008년 10월에 중국에서 따오기 1쌍을 도입하여 한국 최초로 인공번식에 성공하였다. 이 후 우포늪 따오기 종 복원을 통해 2017년까지 개체수가 200마리 이상으로 늘어났다. 본 연구에서는 우포늪 따오기 228 개체를 대상으로 성별을 결정하고, microsatellite 마커를 이용하여 유전적 유연관계를 분석하였다. 그 결과, 115마리의 암컷과 113마리의 수컷으로 판별되었으며, 2016년보다 2017년에 서식하고 있는 개체의 이형접합도와 다형성 정보지수가 모두 감소한 것으로 나타났다. 이는 작은 집단으로부터 개체 수를 늘려나가다 보니 2017년에 근친율이 증가한 것으로 사료된다. 향 후 본 연구는 한국 따오기의 번식사업 및 복원사업을 위한 기초자료로 유용하게 활용될 것으로 기대된다.
돼지 인공수정센터에서 사육중인 인공수정용 종모돈을 이용하여 1995년부터 2000년까지 보존액 종류, 보존온도 및 보존기간에 따른 정액성상 변화와 번식성적을 조사하여 돼지 인공수정시 번식성적 향상과 실용화에 기여코자 본 연구를 실시하였다. 1. 돼지 액상정액의 보존액 종류에 따른 보존기간별 활력은 Androhep 보존액은 3일째부터, BTS 및 Modena는 5일째부터 현저하게 감소하는 경향을 보였고 (P<0.05), pH변화는 6.24~7.06 범위에서 변이가 심하게 관찰되었으며 Androhep 보존액이 산도가 낮은 경향을 보였으나 전반적으로 규칙 적 인 경향을 나타내었다. 보존액 종류별 보존기간에 따른 분만율은 BTS, Modena 및 Androhep 보존액 모두 5일 보존까지 차이가 없었다. 보존액별 분만율은 Androhep 보존액이 BTS 보존액과는 차이가 없었으나 1일 보존과 5일 보존에서 Modena보존액 보다 우수하였다 (P<0.05). 산자수는 보존 기간별 보존액간에 차이는 없었으나 Androhep 보존액은 3일 보존부터 산자수가 유의적으로 감소하였다 (P<0.05). 2. 보존온도에 따른 액상정액의 운동성과 정상첨체 비율에서 17$^{\circ}C$ 보존정액의 운동성은 3일째부터, 정상 첨체율은 4일째부터 감소하였으나 5$^{\circ}C$ 보존정액은 4일 보존까지 정액성상의 변화가 크지 않은 것으로 나타났다. 17$^{\circ}C$에 보존한 액상정액이 5$^{\circ}C$에 보존한 것보다 분만율은 현저히 높았으나 산자수는 비슷한 경향을 보였고, 분만율은 보존 2일째부터 산자수는 3일째부터 감소하였다. 5$^{\circ}C$ 보존정액은 4일까지 분만율에 큰 변화가 없었으나 산자수는 다소 감소하는 경향을 보였다.
본 연구는 돼지정자의 동결보존에 있어 0.5 ml straw에 비해 5.0 ml straw가 가지고 있었던 제한적인 요소들을 극복하기 위하여 동결속도, 융해온도 및 융해 시간을 확립하기 위하여 실시되었다. 동결속도는 정자가 -140℃까지 도달하는 시간을 8분 30초인 동결법(FR-1)과 14분인 동결법(FR-2)으로 나누어 각각 0.5 ml 및 5 ml straw를 이용하여 동결하였으며, 동결-융해한 정자는 CASA 장비를 이용하여 정자 성상을 비교 분석하였다. 동결속도 만큼 융해 온도 및 시간 또한 매우 중요한 요소이기 때문에 융해 방법을 37℃, 50℃ 및 70℃에서 각각 115초, 45초 및 25초간 실시하여 정자 성상을 비교하였다. 그 결과 FR-2의 동결속도 보다 FR-1의 동결속도에서 높은 생존율과 운동성을 보였고, 50℃에서 45초간 융해 하였을 때 가장 높은 생존율과 운동성을 보였다(73.4±3.6; 74.5±2.2%, p<0.05). 정자의 첨체 충실성 및 형태학적 특징에서는 처리구간에 유의적인 차이가 없었다. 본 연구를 통해 얻은 데이터를 종합해볼 때, 그 동안 동결정액을 이용한 돼지 인공수정 시 5.0 ml straw가 0.5 ml straw 비해 저조한 정자 생존율 및 활력을 나타냄으로써 번식성적이 떨어져 사용을 기피하여 왔지만 개선된 프로토콜을 활용하면 동결정액을 이용한 돼지 인공수정에 있어 여러 straw를 융해해야 하는 불편함 대신에 인공수정 시 1 straw를(dose) 융해하여 사용함으로써 사용자의 편리성을 높일 뿐만 아니라 인공수정에 있어 집중력을 높여 번식성적 향상에도 기여할 것으로 사료된다.
참나무속(Q. serrata, Q. dentata, Q. mongolica var. crispula, Q. aliena)의 인공교배에 의 한 종간잡종의 묘목을 조취(鳥取)대학농학부 구내의 묘포장에 식재하였다. 또한 조취(鳥取)대학 산산(蒜山)연습림에서 자연교잡종(Q. fabri와 $Q.{\times}mccormickii$) 가계의 묘목을 선발하여 조취(鳥取)대학 산산(蒜山)연습림에 식재하였다. 인공종간잡종 $F_1$은 4년생, 자연교잡종 $F_1$은 3년생 때에 개화하였다. 2001년도에 이 중에서 개화한 개체로부터 화분과 종자를 채취하여 화분의 크기와 임성, 종자의 활력을 조사하였다. 인공종간잡종 화분의 발아율은 1개체를 제외하고 84% 이상이었고, 화분관의 신장도 양호하였다. 인공종간잡종의 건전한 종자의 발아율은 90% 이상으로 양친과 비슷한 높은 발아율을 보였다. 자연잡종 가계의 종자도 건전한 종자의 발아율은 각 가계의 평균이 64% 이상이었고, Q. fabri, $Q.{\times}mccormickii$의 자식종자도 높은 번식 능력을 유지하는 것으로 나타났다.
본 실험은 성숙가토의 정자와 정장의 항원성을 조사하여 면역적 불임원인 규명에 필요한 기초자료를 얻고자 시도하였다. 인공질로 채취한 정액을 원심분리하여 얻은 정자와 정장을 항원으로 사용하였으며 항원성의 측정방법은 크로마토그라프에 의한 단백질 분리, SDS-PAGE, HPLC, 한천확산법, 전기영동, 수동적혈구응집방법 및 부동화시험이었다. 얻어진 결과는 다음과 같다. 1. SDS-PAGE 전기영동시 정상가토 정장에서 약 23개의 단백질이 분리되었고, 그중 분자량이 약 20,000되는 단백질부분이 정관절제 수술한 정장에서 나타나지 않았다. 2. 정상가토 정장을 HPLC를 이용한 분석에서 3개의 peaks을 볼 수 있었고, 정관절제수술한 것에서는 peak 1에 해당하는 단백질이 소실되었다. 3. 한천확산시험에서 정상정장은 이종혈청과는 4개의 침강선을 나타냈고, 전기영동에서는 7개의 침강선을 나타냈다. 4. 이종면역에서 정자 및 정장은 항체가 상승이 용이하였지만, 동종면역시는 추가면역이 필요하였으며 개체간의 역가차이를 보였다. 정자면역한 자성가토에서는 수동적혈구응집반응을 나타냈지만, 한천확산 및 전기영동반응은 보이지 않았고, 같은 처치를 받은 웅성가토에서도 역시 같은 반응양상을 나타냈다. 5. 동종 및 이종항혈청을 이용한 교차전기영동방법으로 정장의 항원적 구성요소를 구별할 수 있었다. 사출된 정액에서 분리된 정장은 일부 항원을 포함하고 있었으며 이는 성숙한 정자에서 기인한 것으로 사료되었다.
임신기간은 주요 경제형질 중 하나로서, 임신기간의 단축은 생산비를 감소시켜 한우산업의 경쟁력을 재고시킬 수 있다. 따라서 본 연구는 임신기간에 영향을 미칠 것으로 예상되는 요인들의 효과를 분석하고 대안을 제시하기 위하여 실시하였다. 빈우의 임신기간은 빈우의 산차에 의해 영향을 받지 않았으나, 사육농가와 수정년도 및 종모우에 따라 유의한 차이가 있었다 따라서 임신기간을 단축시키기 위해서는 빈우의 사양환경을 최적화하고 영양관리를 적정화하며 적절한 종모우를 선택하여 인공수정에 사용하여야 한다.
Erythropoietin(EPO)는 혈액의 구성성분 중에서 적혈구 세포 증식에 중요한 기능을 한다고 알려져 있으며, 최근에는 암, 에이즈의 치료 등에도 효과가 있는 것으로 확인되고 있다. 따라서 본 연구팀은 지금까지 hEPO 유전자를 이용하여, 형질전환 돼지 "새롬이"의 생산에 성공한바 있다. 새롬이의 정액을 활용하여 인공수정을 실시 새롬이의 Fl를 24두 생산하였다. 이에 대하여 "형질전환 돼지의 계대번식시 유전자 전이효율에 관한 연구"라는 제목으로 발표 할 예정이며, 형질전환에 사용된 promoter가 WAP이므로, Fl이 임신, 분만을 하여야만 유즙을 통하여 hEPO물질을 생산할 수 있다. 따라서, Fl(♂)$\times$Fl(♀)의 교배에 의하여 5두가 임신, 분만을 하였으며, 이들 중 1두는 분만 후 21일에 폐사하였으며, 나머지는 현재 정상적으로 사육되고 있다. 이들 5두에 대하여 분만 후 유즙을 채취하여 유즙속에 EPO의 발현여부를 검토하였다. EPO-ELISA kit(medac)를 사용하여 분석결과, 유즙을 8,000배로 희석을 하여야만 Standard curve(1.25~160 mIU/$m\ell$)안에서 EPO의 단백질 발현을 검출할 수 있었다. 5두의 각각 농도는 28, 58, 17, 37, 27 IU/${\mu}\ell$ 였다. 또한 cDNA EPO와 genome EPO를 CHO 동물세포에서 생산하여 10배로 농축한 결과 5.5와 11 IU/${\mu}\ell$의 농도로 유즙과 비교하면 약 20~30배의 낮은 발현양을 나타내었으며, 또한 이러한 결과는 소변에서의 결과(1.1 IU/$m\ell$)보다는 약 30,000배 이상 높은 발현량을 화인 할 수 있었다. 현재, 이들 유즙 물질을 활용 빈혈 질환실험동물을 이용하여 생리활성을 검정, 체내에서 metabolic clearance rate(MCR)를 검토 중에 있다. 또한 F2의 자돈생산은 모돈 5두에서 총 25두가 생산되었는데, 이중 20두 약 80%가 EPO 유전자의 전환율을 나타내었다. 이상을 종합하면, 1) 돼지이용 생리활성물질(EPO)을 유즙에서 대량으로 생산할 수 있는 system의 활용가능성을 국내에서 처음으로 확인하였으며, 2) EPO에 있어서는 국제적으로도 형질전환 가축생산은 최초로 성공하였으며, 현재로서는 생산되어진 물질의 정제수준에 따라 활용가치가 결정되어 질 것으로 사료된다. 생리활성 물질을 생산할 수 있는 형질전환 돼지 생산의 성공은, 앞으로 형질전환 가축생산 뿐 만 아니라, 장기이식 및 복제돼지 생산의 활용 면에서의 응용가능성이 기대된다.
더러브렛종 암말의 번식 능력을 향상시키기 위해 호르몬 투여 및 인공 조명에 의한 인위적으로 발정 조절을 실시한 결과는 다음과 같다. 발정 주기에 있는 암말의 $PGF_2{\alpha}$ 또는 altrenogst투여에 의한 발정 발현율은 100%이었으며, 수태율은 각각 95.2% 및 71.4%였다. 전년도 공태마에 대하여 altrenogest단독 또는 altrenogest과 estradiol 병행 투여시 3월 이내 100% 발정이 발현되었으며, 발정 발현일은 altrenogest 투여 종료 후 단독 투여군이 4.3일, estradiol 병행 투여군이 3.7일이었고, 배란일은 발정 발견 후 각각 2.7일과 2.5일이었고, 처리군간의 유의적인 차이는 없었다. 그리고 수태율은 altrenogest 단독 투여군이 80.0%를 나타내었다. 인공 조명에 의한 발정 발현율은 92.9%였고 수태율은 76.9%였다. 이상의 결과로 보아 번식 계절에 있는 암말에 대한 발정 동기화는 수태율을 높일 수 있는 수단으로 활용될 수 있고, 전년도 비임신으로 공태중인 암말에 altrenogest 투여는 경주마의 조기 번식 및 수태율 향상에 기여할 수 있을 것으로 사료 된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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