Renin-angiotensin system (RAS)은 혈압 조절에 중요한 역할을 수행하는 생리적 조절계로써, 이 system 을 구성하는 유전자들의 이상은 본태성 고혈압의 발병과 유의하게 관련된 것으로 알려졌다. RAS의 주요한 구성 성분인 angiotensin II는 2종류의 수용체인 angiotensin II type I receptor(AT₁R)와 angiotensin II type I receptor(AT₂R)에 의해 그 효과가 매개되기 때문에, 이 수용체를 암호하는 유전자는 본태성 고혈압의 유력한 후보 유전자라고 볼 수 있다. 현재가지의 연구에 의하면, AT₁R 유전자에 존재하는 유전적 변이와 본태성 고혈압과의 관련성에 관해서는 많은 보고들이 있었지만, AT₂R 유전자에 존재하는 유전적 변이 가 본태성 고혈압에 유의한 효과를 나타내는 지에 관해서는 이렇다할 연구 성과가 별로 없는 실정이다. 이에 본 연구에서는 한국인 집단을 대상으로 하여, AT₂R 유전자에 존재하는 C3123A 다형성이 한국인 집단에서 본태성 고혈압과 유의한 관련성이 있는 지를 분석하였다. 이 유전자는 인간의 X 염색체에 존재하기 때문에, 여성인 경우에는 CC, CA및 AA로 이루어진 3유전자형이 존재하지만, 남성인 경우에는 C와 A로 이루어진 2종류의 대립 유전자로 구성되어 있기 때문에, 본 연구에서는 남성과 여성을 개별적으로 나누어서 분석하였다. 연구 결과, AT₂R 유전자에 존재하는 C3123A 다형성은 남녀 모두에서 본태성 고혈압과 유의한 관련성을 나타내지 않았다(P>0.05). 그렇지만, 이 다형성에 대한 대립 유전자 빈도를 서양인 집단과 비교했을 경우에는, 한국인을 대상으로 한 본 연구에서 A 대립 유전자 빈도가 0.33인 반면에 서양인 집단은 그 빈도가 0.43~0.48로 한국인 집단보다 높은 값을 나타내었다. 따라서, AT₂R 유전자에 존재하는 C3123A 다형성과 본태성 고혈압과의 관련성에 대해서는 한국인과 유전적 배경이 다른 서양인 집단을 대상으로 한 추시가 필요할 것으로 사료된다.
Journal of Korean Society of Environmental Engineers
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v.32
no.8
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pp.795-801
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2010
The acute toxicity of arsenic compounds was assessed and compared using following four bioassays; bioluminescence activity of the recombinant strain RB1436, germination of four different seeds, ${\alpha}$-glucosidase activity produced by Bacillus lichemiformis, acute genetic revertant mutation using mutant strain Salmonella typhimurium. Different sensitivities were observed among tested bioassays, but generally the toxicity by arsenite was greater than that of arsenate. Among tested four seeds, sensitivities of Lactucus and Raphanus were greater than others, and these two seed types were appeared as proper type for bioassay. High revertant mutation ratio (5.1) was observed with 1 mg/L arsenite, indicating high mutagenicity. The sensitivity of ${\alpha}$-glucosidase activity on arsenic compounds was much lower than other methods. The evaluation of interactive toxic effects using various bioassays may comprise a useful tool for the bioassessment of environmental pollutants.
Recombinant bioluminescent bacterial strains that use specific promoters fused to the bioluminescence genes (lux genes) have been applied in environmental monitoring. Advantages of using recombinant bioluminescent bacteria as blosensing cells include rapid responses, low costs, and improved reproducibility. In this study, a recombinant Escherichia coli, GC2, containing a lac::luxCDABE fusion immobilized with solid agar media and glass beads was used to estimate the effect of this soil flushing technique. This bacterium constitutively emits light under normal conditions (no toxic chemicals). When growth and metabolism of these bioluminescent bacteria is inhibited by their exposure to toxic chemicals, the bioluminescence (BL) is reduced. A biosurfactant, rhamnolipids, was used to extract phenanthrene from the soil after flushing.
The CYP1A gene is one of Cytochrome P450 drug-metabolizing enzymes with dose-dependant manner of gene expression and is useful to get the information of alterations on gene expression upon environmental contaminants as well as the biomarker of environmental contamination at the specific places. In this report, we further discuss the usefulness of CYP1A gene in relation to aquatic environmental contamination at several aspects.
Cytolethal distending toxin(CDT)은 세포 주기 중 G2에서 M 기로의 전환을 막아 세포의 증식을 억제할 수 있는 세균 단백 독소의 일종이다. 구강 미생물 중 유일하게 Actinobacillus actinomycetemcomitans (A. actinomycetemcomitans)만이 이 CDT를 생성 할 수 있는 것으로 알려져 있다. A. actinomycetemcomitans는 localized aggressive periodontitis (LAP)의 원인균으로 여겨지며 비 운동성의 그람 음성 구간균이고 $37^{\circ}C$, 5% $CO_2$ 하에 성장이 왕성하다. A. actinomycetemcomitans의 CDT는 3개의 인접한 유전자인 cdtA, cdtB, cdtC에 의해 형성 되며 각각의 유전자에 대한 단백질의 기능은 아직 완전히 밝혀지지 않았다. 현재까지 연구에 의하면 cdtA는 CDT의 세포부착과 관련이 있는 것으로 여겨지며 이 유전자의 기능 이상 시 CDT의 독성 효과가 현저히 감소한다고 알려져 있다. 따라서 본 연구는 A. actinomycetemcomitans의 cdtA 유전자를 클로닝, 단백질 발현하여 향후 치주질환의 발병 과정에서 CdtA의 역할을 규명하고 질환의 예방 및 치료법에 도움을 주고자 하였다. A. actinomycetemcomitans Y4균주를 cdtA 유전자 클로닝을 위해 사용하였다. A. actinomycetemcomitans의 genomic DNA는 genomic DNA 추출 kit를 사용하여 분리하고 cdtA에 특이적인 primer를 이용하여 PCR을 통해 cdtA 유전자를 증폭하였다. 증폭된 cdtA 유전자를 T-vector에 클로닝 하였으며, 클로닝 된 cdtA 유전자는 단백질 발현을 위해 pRSET Avector에 서브클로닝 한 후 발현 균주인 BL21(DE3)를 이용하여 발현시켰다. 발현 후 Ni-NTA AP conjugate를 이용한 Western blot을 통해 pRSET-CDTA를 확인하였다.
We have now constructed a novel recombinant baculovirus producing fusion protein with Autographa californica nuclear polyhedrosis virus (AcNPV) polyhedrin and Bacillus thuringiensis(Bt) cryIA(c) crystal protein. The fusion protein expressed by the recombinant baculovirus in insect cells was characterized. The N-terminal of cryIA(c) gene of Bt subsp. kurstaki HD-73 was introduced under the control of polyhedrin gene promoter of AcNPV, by fusion in the front of intact polyhedrin gene or by insertion into the HindIII site in polyhedrin gene. The recombinant baculoviruses were named as BtrusI or BtrusII, respectively. Although single transcript from the fusion protein gene was apparently observed. BtrusI was produced the two proteins, 92 kDa fusion protein and only polyhedrin. In addition, fusion protein produced by BtrusI did not form polyhedra. Interestingly, however, the cells infected with BtrusII did not show a 33 kDa polyhedrin band as a cells infected with BtrusI. Cells infected with BtrusII were only produced fusion protein, but the polyhedra formed by fusion protein was not observed. To determine the insecticidal toxicity of fusion protein, therefore, Sf9 cells infected with BtrusI were inoculated to Bombyx mori larvae. Sf9 cells infected with BtrusI that expressed the fusion protein caused larval mortality although the insecticidal toxicity was low. In conclusion, our results clearly demonstrated that the fusion protein with polyhedrin and Bt cryIA(c) crystal protein have a insecticida toxicity.
Yeo bin Kim;Jeong-eun Baek;Yeon Ha Kim;Young Hee Kim;Ah Young Yoo;Ho Young Kang
Journal of Life Science
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v.34
no.2
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pp.79-85
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2024
SlyA is known as a transcriptional regulator that regulates the expression of hemolysin (HlyE) in E. coli, a member of the Enterobacteriaceae family such as Salmonella. However, Salmonella has the slyA gene but lacks the hlyE gene. Then, because we were curious about the role of SlyA in Salmonella, we constructed and explored a mutant strain with a deletion of the slyA gene. S. Typhimurium CK295 (ΔslyA) was constructed using an allelic exchange approach. In a comparative analysis between the wild-type and the CK295 strain, no significant differences were observed in growth characteristics, motility, total protein analyses, and secreted protein analyses. However, the CK295 strain exhibited slightly reduced biofilm formation compared to the wild-type. Interestingly, as a result of comparing the survival ability in macrophages, the mutant strain showed a 60% decrease in survival ability compared to the wild-type. To evaluate toxicity in mice, mortality was measured after oral administration to 6-week-old BALB/c mice. As a result, the LD50 value of the CK295 (ΔslyA) was more than 100 times higher than that of wild-type S. Typhimurium 𝜒3339 in BALB/c. In conclusion, SlyA is presumed to regulate the expression of genes encoding virulence factors involved in the in vivo survival of Salmonella.
The development of selectable markers for transformation has been a major factor in the successful genetic manipulation of plant. We established a new selectable marker system for tobacco transformation using chimeric adenosine deaminase (ADA) gene, which confers resistance to cytotoxic adenosine analogues, 9-$\beta$-D-arabinofuranosyl adenine(Ara-A) and cordycepin. The transformants with the chimeric ADA gene in tobacco grew in the presence of normally lethal level of cytotoxic adenosine analogues, 100 $\mu$M Ara-A and 50 $\mu$M cordycepin. We successfully distinguished transformed shoot from non-transformed shoot on the same selectable media with cytotoxic adenosine analogues. In this selectable media, we were able to select seeds with/ without ADA gene from transgenic tobacco seeds. Theses results show that the mammalian ADA gene may serve as a new selectable marker for tobacco transformation.
A large number of man-made chemicals that have been released into the environment have the potential to disrupt the endocrine system of animals and humans. There is a critical developmental period during which sexual brain differentiation proceeds irreversibly under the influence of gonadal hormone. Recently we identified KAP3 gene expressed during the critical period of rat brain sexual differentiation. KAP3 functions as a microtubule-based motor that transports membranous organelles anterogradely in cells, including neurons. In the present study, we aimed to investigate the effect of endocrine disrupter, Dichlorodiphenyl trichloroethane (DDT), on the KAP3 gene expression during critical period of rat brain development. Maternal exposure to DDT increased the level of KAP3 mRNA in male and female fetus brains when examined on the gestational day 17 (GDl7). In postnatal day 6, DDT suppressed the expression of KAP3 gene in male and female rat brain. Also, the body weight and fertilization rate were decreased in the DDT exposured rats. These results showed that endocrine disrupter, DDT, can affect the transcriptional level of brain sexual differentiation related gene, KAP3, in the prenatal and the neonatal rat brain and that maternal exposure to endocrine disruptors may lead to a toxic response in embryonic differentiation of brain. And so KAP3 gene may be used a gene maker to analyse the molecular mechanism for toxic response in animal nerve tissues exposed to endocrine disruptors.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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