Proceedings of the Plant Resources Society of Korea Conference
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2018.04a
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pp.35-35
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2018
터리풀속(Filipendula)은 장미과(Rosaceae), 장미아과(Rosoideae)에 속하는 다년생 초본이며, 북반구 온대지역의 산지지역에 서식하며 15-20여 종이 보고되어 있고, 이 중 10여종이 한국, 중국, 일본, 타이완 등의 동아시아 지역에 분포한다. 본 연구의 목적은 DNA 염기서열 자료를 이용하여 터리풀속(Filipendula)내 종들간의 계통관계를 규명하기 위하여 본 연구를 수행하였다. 이를 위해서 11종 29개체의 터리풀속(Filipendula)샘플과 외군인 산딸기나무속(Rubus)에 속하는 3종 5개체의 샘플을 이용하였다. 추가로 Genbank에서 3속 10종 18개의 염기서열을 다운받아 비교분석에 이용하였다. 계통연구를 위하여 엽록체에 존재하는 atpF-atpH, psbK-psbI, psbA-trnH, matK, rbcL, 5개 마커와 핵에 존재하는 ITS, 총 6개 마커의 염기서열을 생산하였다. 총 52개의 샘플에 대하여 엽록체유전체 5개 마커지역은 염기서열 길이가 3,485bp였고 핵 ITS지역은 631bp였으며, 이들을 합한 염기서열 길이는 4,116bp였다. 계통분석결과, 터리풀속(Filipendula)은 단계통군을 이루었다. F. occidentalis와 F. vulgaris가 기저분류군을 이루었고 이들은 각각의 아속에 해당한다. 그리고 나머지 종들은 모두 하나의 단계통군을 이루었다. 위의 결과들은 1961년 시미즈가 본 속을 Hypogyna아속, Filipendula아속, Ulmaria아속으로 나눈 분류시스템과 일치한다. 나아가 분자계통수에서 Ulmaria아속은 크게 4개의 subclade로 구분되었다. 먼저 subclade I에는 F. vestita, F. kiraishiensis, F. tsuguwoi, F. multijiuga, F. purpurea 등 5개 종으로 구성되었다. Subclade II는 F. ulmaria 한 종으로만 구성되었다. Subclade III에는 F. glaberrima, F. koreana, F. formosa, F.camtschatica 로 구성되었으며 subclade III에는 한국에 서식하는 3종이 포함되었다. Subclade IV에는 F. rubra, F. angustiloba, F. palmata, F. intermedia 4종으로 구성되었다. 이번연구에서는 Ulmaria아속내에 4개의 subclade가 존재함이 처음으로 확인되었다.
Proceedings of the Plant Resources Society of Korea Conference
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2022.09a
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pp.66-66
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2022
속성수로 활용되는 버드나무속 식물들은 생식기관과 영양기관의 성장 시기가 달라 형태적 특성 평가를 위해 수년간의 조사 기간이 요구된다. 따라서 바이오매스 우수 버드나무속 교잡종 육성의 성공 여부를 조기 판별하기 위한 식별 기술이 필요하다. DNA 마커는 식물의 생장단계와 관련 없이 탐색할 수 있으며 환경에 영향을 받지 않는 장점이 있다. 식물의 계통 분류 시 주로 사용되는 엽록체 DNA는 유전자 염기서열의 변이가 비교적 크지 않은 장점이 있으나 대부분의 활엽수에서 모계를 통해 유전되는 특징이 있다. 하지만 종간 교잡종의 식별은 각각의 부모종과 구분할 수 있어야 하므로 본 연구는 엽록체 DNA가 아닌 핵 DNA를 대상으로 분석하였다. 본 연구의 목적은 호랑버들을 암나무로 갯버들을 수나무로 인공교배하여 육성된 종간 교잡종을 식별하는 핵 DNA 마커를 탐색하는 것이다. 이를 위해 버드나무속에서 개발된 총 35개의 nSSR (nuclear Simple Sequence Repeat) 마커를 대상으로 호랑버들과 갯버들, 종간 교잡종의 식별 가능성을 평가하였다. 분석 결과 호랑버들과 갯버들, 종간 교잡종 간 차이를 나타내는 2개의 핵 DNA 마커를 선발하였다. 따라서 선발된 핵 DNA 마커를 활용하여 호랑버들과 갯버들, 종간 교잡종의 조기 식별에 활용이 가능할 것으로 사료된다.
The tetraploid Solanum acaule is a wild potato species from Bolivia widely used for potato breeding because of its diverse attractive traits, including resistance to frost, late blight, potato virus X, potato virus Y, potato leafroll virus, potato spindle tuber viroid, and cyst nematode. However, the introgression of useful traits into cultivated potatoes via crossing has been limited by differences in endosperm balance number between species. Somatic fusion could be used to overcome sexual reproduction barriers and the development of molecular markers is essential to select proper fusion products. The chloroplast genome of S. acaule was sequenced using next-generation sequencing technology and specific markers for S. acaule were developed by comparing the obtained sequence with those of seven other Solanum species. The total length of the chloroplast genome is 155,570 bp, and 158 genes were annotated. Structure and gene content were very similar to other Solanum species and maximum likelihood phylogenetic analysis with 12 other species belonging to the Solanaceae family revealed that S. acaule is very closely related to other Solanum species. Sequence alignment with the chloroplast genome of seven other Solanum species revealed four InDels and 79 SNPs specific to S. acaule. Based on these InDel and SNP regions, one SCAR marker and one CAPS marker were developed to discriminate S. acaule from other Solanum species. These results will aid in exploring evolutionary aspects of Solanum species and accelerating potato breeding using S. acaule.
Solanum brevicaule is one of the tuber-bearing wild Solanum species. Because of its resistance to several important pathogens infecting potatoes during cultivation, it can be used for potato breeding. However, the fact that S. brevicaule used in this study has an EBN value of two causes the sexual reproduction barriers between the species and cultivated potatoes. In this study, specific markers for discriminating S. brevicaule from other Solanum species were developed on the basis of the results of sequence alignments with the whole chloroplast genomes of S. brevicaule and seven other Solanum species. The chloroplast genome of S. brevicaule was completed by next-generation sequencing technology described in other recent studies. The total sequence length of the chloroplast genome of S. brevicaule is 155,531 bp. Its structure and gene composition are similar to those of other Solanum species. Phylogenetic analysis revealed that S. brevicaule was closely grouped with other Solanum species. BLASTN search showed that its genome sequence had 99.99% and 99.89% identity with those of S. spegazzinii (MH021562) and S. kurtzianum (MH021495), respectively. Sequence alignment identified 27 SNPs that were specific to S. brevicaule. Thus, three PCR-based CAPS markers specific to S. brevicaule were developed on the basis of these SNPs. This study will facilitate in further studies on evolutionary and breeding aspects in Solanum species.
The diploid Solanum cardiophyllum, a wild tuberbearing species from Mexico is one of the relatives to potato, S. tuberosum. It has been identified as a source of resistance to crucial pathogens and insects such as Phytophthora infestans, Potato virus Y, Colorado potato beetle, etc. and is widely used for potato breeding. However, the sexual hybridization between S. cardiophyllum and S. tuberosum is limited due to their incompatibility. Therefore, somatic hybridization can introduce beneficial traits from this wild species into the potato. After somatic hybridization, selecting fusion products using molecular markers is essential. In the current study, the chloroplast genome of S. cardiophyllum was sequenced by next-generation sequencing technology and compared with those of other Solanum species to develop S. cardiophyllum-specific markers. The total length of the S. cardiophyllum chloroplast genome was 155,570 bp and its size, gene content, order and orientation were similar to those of the other Solanum species. Phylogenic analysis with 32 other Solanaceae species revealed that S. cardiophyllum was expectedly grouped with other Solanum species and most closely located with S. bulbocastanum. Through detailed comparisons of the chloroplast genome sequences of eight Solanum species, we identified 13 SNPs specific to S. cardiophyllum. Further, four SNP-specific PCR markers were developed for discriminating S. cardiophyllum from other Solanum species. The results obtained in this study would help to explore the evolutionary aspects of Solanum species and accelerate breeding using S. cardiophyllum.
Phylogenetic positions of Sedirea and Neofinetia were addressed using the chloroplast matK and the nuclear ITS sequences. We also evaluate the usefulness of the makers for the identification of species and localities. Sedirea and Neofinetia form an independent monophyletic genus, respectively, in both matK and nuclear ITS trees. The sister genus of the Neofinetia was Vanda in both trees. In addition, our trees support the separate recognition of the Neofinetia from Vanda rather than the inclusion of Neofinetia into Vanda. The sister group of the Sedirea was (Dimorphorchis(Pteroceras(Saccolabiun+Phalaeonopsis))) clade. The Dimorphorchis was one of the most probable sister genus to the Sedirea. The sister group relationship between Sedirea and Aerides was suggested by their similar morphology, but not supported in molecular trees. The identification of species and localities of Neofinetia was possible using our two molecular markers. However, several pseudo-gene sequences are discovered from the public data base. In addition, the horizontal gene transfer of chloroplast genomes is frequent events in orchid hybrids. Therefore, we need a careful evaluation for the data prior to systematic use. Generation of sequence data from multiple accessions of a species may helpful to reduce these types of error.
Lee, Soo Jin;Shin, Yong-Wook;Kim, Yun-Hee;Lee, Shin-Woo
Journal of Plant Biotechnology
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v.44
no.2
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pp.135-141
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2017
Cudrania tricuspidata Bureau is a widely used medicinal perennial woody plant. For conservation and germplasm utilization of the plant, it is imperative to obtaining information regarding the genetic diversity of the plant populations. Although C. tricuspidata is an important medicinal plant registered in South Korea, no molecular markers are currently available to distinguish Korean-specific ecotypes from other ecotypes of different countries. In this study, we developed single nucleotide polymorphism (SNP) markers derived from chloroplast genomic sequences to identify distinct Korean-specific ecotypes of C. tricuspidata via the amplification refractory mutation system (ARMS)-PCR analyses. Molecular authentication of twelve C. tricuspidata ecotypes from different regions was performed, using DNA sequences in the trnL-F chloroplast intergenic region. The SNP markers developed in this study are useful for rapidly identifying specific C. tricuspidata ecotypes from different regions.
This study aims to define the phylogenetic relationship within Korean section sabina and find molecular markers which resolve the phylogenetic relationship in genus Juniperus and section sabina. cpDNA matK and psbA-trnH were used as molecular markers. The combined analyses of two genes suggested that section sabina was a clade supported by 100% BP. The relationships of [J. chinensis var. sargentii+J. davurica] clade and [J. chinensis var. chinensis+J. chinensis var. procumbens+J. chinensis var. horizontalis] clade were supported by 91% BP and 100% BP, respectively. Thus, the classification of Korean section sabina would be appropriate at follows, (1) J. chinensis var. sargentii+J. davurica, and (2) J. chinensis var. chinensis+J. chinensis var. procumbens According to the results of separate analyses, matK seems to work better resolving power to clarify the phylogenetic ambiguity in Juniperus and section sabina than psbA-trnH.
The tetraploid Solanum hjertingii, a wild tuber-bearing species from Mexico is a relative of potato, S. tuberosum. The species has been identified as a potential source of resistance to blackening for potato breeding. It does not exhibit enzymatic browning nor blackspot which are physiological disorders. However, due to their sexual incompatibility, somatic hybridization between S. hjertingii and S. tuberosum must be used to introduce various traits from this wild species into potato. After somatic hybridization, molecular markers are essential for selecting fusion products. In this study, the chloroplast genome of S. hjertingii was sequenced by next-generation sequencing technology and compared with those of other Solanum species to develop specific markers for S. hjertingii. The chloroplast genome has a total sequence length of 155,545 bp, and its size, gene content, order and orientation are similar to those of the other Solanum species. Phylogenic analysis including 15 other Solanaceae species grouped S. hjertingii with S. demissum, S. hougasii, and S. stoloniferum. After detailed comparisons of the chloroplast genome sequence with eight other Solanum species, we identified one InDel and seven SNPs specific to S. hjertingii. Based on these, five PCR-based markers were developed for discriminating S. hjertingii from other Solanum species. The results obtained in this study will aid in exploring the evolutionary aspects of Solanum species and accelerating breeding using S. hjertingii.
Medicinal plants resources are becoming important assets since their usages have been expanded to the development of functional foods for human health, cosmetics and pharmaceutical industries. However, their phylogenetic origins and names are different from each country and quite often they are mixed each other resulting in the confusion for consumers. Particularly when they are very similar based on their morphological characteristics and distributed, it is extremely difficult to differentiate their origins even by specialists. Therefore, identification of each plant species is important for standardizing herbal medicine. Thistle is a medicinal and perennial plant. Obtaining information about the genetic diversity of plant populations is highly important for conservation and germplasm utilization. Although thistle is an important medicinal plant species registered in South Korea, no molecular markers are currently available to distinguish from other similar species from different countries. In this study, we developed single nucleotide polymorphism (SNP) markers derived from chloroplast genomic sequences to identify distinct Korean-specific thistle species via high resolution melting (HRM) curve analyses. We performed molecular authentication of four different kinds of thistle species from different regions using DNA sequences in the trnL-F and matK chloroplast intergenic region. The SNP markers developed in this study are useful for rapidly identifying specific thistle species from different country.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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