The influence of chromosome number on cell growth and cell aging was investigated in various yeast strains that have many artificial chromosomes constructed using a chromosome manipulation technique. Host strain FY833 and the YKY18, YKY18R, YKY24, and YKY30 strains harboring 16 natural chromosomes, 18 chromosomes, 18 chromosomes containing rDNA chromosome, 24 chromosomes, and 30 chromosomes, respectively, were used, and the specific growth rate of each strain was compared. The specific growth rates in the YKY18 and YKY24 strains were indistinguishable from that in the host strain, while those of the YKY18R and YKY30 strains were reduced to approximately 25% and 40% of the host strain level, respectively. Subsequently, the replicative life span was examined to investigate the relationship between the number of chromosomes and cell aging, and the life span was decreased to approximately 14% and 45% of the host strain level in the YKY24 and YKY30 strains, respectively. Moreover, telomere length, well known as a senescence factor, was shorter and more diversified in the strain, showing decreased life span. Therefore, these results suggest the possibility that an increase in the number of chromosomes containing artificial chromosomes caused cell aging, and we expected these observations would be applied to improve industrial strain harboring of versatile and special artificial chromosomes.
Purpose : Fragile sites are points on chromosomes which tend to break non-randomly when exposed to specific chemical agents or conditions of tissue culture. The chromosomal break induced by the antineoplastic drug, 1-${\beta}$-D-arabinofuranosyl-cytosine(Ara-c), was investigated to study the laboratory conditions in which the incidence of chromosomal break could be enhanced. Besides, the fragile sites induced by Ara-C were investigated and compared to the already known locations of the specific chromosomal alterations observed in specific neoplasms. Methods : T-lymphocytes from theree normal males and three females were cultured for 48 hours. Cells from each individual were exposed to the Ara-C for an additional 24 hours. After the caffeine was added during the last six hours culture, the metaphase chromosomes were prepared following the conventional method. A site was considered fragile if it was found to break two or more per 100 chromosomal breaks in more than four of six individuals tested. Results : Ara-C induced 252.1 chromosomal breaks per 100 mitotic cells and this result was significantly higher than that of the control, which induced 25.2 breaks(P<0.05). The incidence of the chromosomal break by Ara-C was higher, if cultured in the MEM-FA, which has no folic acid, than in the RPMI 1640 which contains enough folic acid(P<0.05). The most common break site by Ara-C was 3p14.2(FRA3B). There were 20 fragile sites induced by Ara-C. Among these 20 fragile sites, seven coincided with the locations of the mapped oncogenes, JUN, SKI, REL, N-MYC, FHIT, MET, ETS-1, and FOS. Conclusion : S phase specific chemotherapeutic agent, Ara-C, induced the expression of the chromosomal fragile sites effectively using the T-lymphocyte in vitro. Some of the fragile sites by Ara-C highly coincided with the oncogenes and neoplasm specific chromosome breakpoints. In this regard, the fragile sites reported here could provide the unknown neoplasm related chromosomal alternation points.
Fluorescence in situ hybridization with chromosome-specific probe has been shown to be a valid and rapid method for detection of chromosome rearrangements induced by radiation. This method is useful for quantifying structural aberrations, expecially for stable ones, such as translocation and insertion, which are difficult to detect with conventional method in human lymphocyte. In order to apply FISH method for high dose biological dosimetry, chromosomal abberations by radiation at doses of 1, 3, 5, and 7Gy were analysed with whole chromosome-specific probes by human chromosome 1, 2 and 4 according to PAINT system. The frequencies of stable translocation per cell equivalent were 0.04, 0.33, 1.22, 2.62, and 5.58 for the lymphocyte exposed to 0, 1, 3, 5, and 7Gy, respectively, and those of dicentric were 0.00, 0.06, 0.52, 1.19 and 2.44, respectively. Significantly more translocation of t(Ab), a translocated chromosome with a piece of painted acentric matrial 'b' attached to unpainted piece containing centromere 'A', than reciprocal chromosome t(Ba) was observed. The frequencies of all type of chromosome rearrangements increased with dose. From above result, FISH seemed to be useful for radiation biodosimetry by which the frequencies of various types of stable aberrations in human lymphocyte can be observed more easily than by conventional method and so will improve our ability to perform meaningful biodosimetry.
유리화 동결법은 동결중 ice crystal의 형성이 이루어지지 않으므로 난자의 동결보존을 위한 유용한 동결방법이다. 이전의 연구에서 마우스의 난자를 ethylene glycol과 electron microscope grid를 이용한 유리화 동결법으로 동결 융해한 결과 기존의 slow freezing 방법에서보다 높은 생존율과 배발달율이 나타남을 관찰하였다. 그러나 동물과 인간 난자를 이용한 연구를 통하여 난자의 경우 동결 융해후 염색체에 부착되어 있는 미세소관인 방추사가 온도의 변화에 매우 민감하여 염색체 이상성이 증가되는 것이 보고되었다. 이에 본 연구에서는 성숙난자를 유리화동결법에 의해 동결 융해후 난자의 염색체와 방추사의 이상성이 증가되는지 알아보고자 본 실험을 수행하였다. ICR mouse의 성숙란을 채취하여 연구목적에 따라 fresh한 대조군과 동결음해 시킨 실험군으로 분류하였다. 동결방법은 난자를 1.5 M ethylene glycol (EG)에 2분 30초간 노출 시킨후 5.5 M EG와 1M sucrose가 첨가된 동결액에 20초간 노출시킨 후 Grid에 난자를 부착시킨 후 직접 액체질소에 침지하여 동결하였다. 동결후 난자는 5단계로 융해를 실시한 후 생존된 난자는 tubulin 항체를 이용한 immunostaining 방법으로 방추사의 이상성을 관찰하였고, 염색체는 난자를 고정 후 10% Giemza로 염색 후 염색체의 수적인 이상성을 관찰하였다. 염색체 분석결과 염색체 이상 빈도는 대조군의 경우 19.6%, 동결융해군은 32.8%로 관찰되었다. 또 방추사의 이상빈도는 대조군의 경우 20.2%, 동결 융해군은 32.3%로 관찰되어 동결 융해후의 난자에서 염색체와 방추사의 이상 빈도가 증가됨이 관찰되었다.찰되었다. 배아이식후 대조군과 실험군에서 각각 2 마리가 임신이되어 정상적인 산자를 분만하였다. 따라서 항동해제에 taxol의 첨가는 동결 융해후의 난자의 배발달율을 증진시킬 수 있었다..8%로 나타나 난할율 및 배반포 발생율에 있어서 융합조건에 따라 큰 차이는 없었으나 1.9㎸/cm, 30$\mu\textrm{s}$ 2회의 조건이 다른 조건들에 비하여 유의적으로 낮았다. 따라서, 체세포와 수핵란 세포질간의 융합율과 배반포 발생에 미치는 영향은 전압보다는 시간에 더 크게 받음을 알 수 있었으며, 이와 같은 결과에서 융합시 시간을 오래 주는 것보다 전압을 높이는 것이 수핵난자의 세포질에 상해를 줄이고 이후 배반포 발생에 유리할 것으로 사료되었다.면에서도 더욱 더 활발할 것으로 기대된다. 배란후 72시간째에 초음파진단기를 이용하여 난소의 난포발달을 조사한 결과 , 대조구와 bFF처리구에 비해 AI처리구에서 발달난포가 유의적으로 많은 것을 확인하였다. 이상과 같은 결과로, Anti-inhibin serum은 한우 자체에서 분비하는 Inhibin을 특이하게 억제하여 Inhibin에 의해 억제되는 FSH분비가 촉진됨으로써 난포발달과 estrogen의 농도가 촉진되는 것으로 사료되어 anti-inhibin serum이 한우의 과배란유기 효과가 있는 것으로 사료된다.정량 분석한 결과이다. 시편의 조성은 33.6 at% U, 66.4 at% O의 결과를 얻었다. 산화물 핵연료의 표면 관찰 및 정량 분석 시험시 시편 표면을 전도성 물질로 증착시키지 않고, Silver Paint 에 시편을 접착하는 방법으로도 만족한 시험 결과를 얻을 수 있었다.째, 회복기 중에 일어나는 입자들의 유입은 자기폭풍의 지속시간을 연장시키는 경향을 보이며
Proceedings of the Korean Society of Applied Pharmacology
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1994.04a
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pp.203-203
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1994
3) 결과 및 고찰 : 급성독성시험 : 대조군 및 G009투여군(최저 312.5mg/kg, 최고 5000mg/kg) 5용량에서 모두 사망예가 관찰되지 않았다 체중변화에 있어서도 대조군과 투여군 사이에 유의성 있는 차이는 없었다. 육안적 소견은 생존동물 모두에 약물에 기인한 내부장기의 이상이 관찰되지 않았다. 유전독성시험 : 마우스 골수세포를 이용한 소핵시험에서 약물 투여에 의한 어떠한 독성의 징후도 관찰되지 않았다. 포유류 배양세포를 이용한 염색체이상 시험에서 모든 농도에서 염색체 이상을 가진 세포의 출현빈도가 3% 이하로서 G009는 CHL세포에 대하여 염색체 이상유발성이 없었다. 살모넬라균을 이용한 복귀돌연변이 시험에서 투여군은 음성대조와 같은 정도 또는 그 이하의 복귀변이 집락수를 나타내었다.
Purpose : This study was tried to evaluate the effect of the partial body fractionated irradiation on the frequency of chromosomal aberration. Materials and Methods : In three patients with uterine cervix carcinoma, chromosomal aberrations were analyzed during fractionated external beam radiotherapy Radiation field included whole pelvis and total dose was 5040 cGy in 28 fractions. Results : The values of the frequency of dicentrics and rings (Ydr) in pre-irradiated peripheral lymphocytes in three patients were 0.0060, 0.0000, and 0.0029, respectively. The frequency of dicentrics and rings, estimated during the course of radiotherapy, increased with radiation dose and best fitted to the linear equation, $Ydr=7.31{\times}10^{-5}D(cGy)+1.45{\times}10^{-2}$. The frequency of dicentrics and rings among the cells with dicentric and/or ring(Qdr) also showed increasing tendency and best fitted to the linear equation, $Qdr=1.01{\times}10^{-4}D(cGy)+1.04$. Conclusion : Ydr increased linearly with radiation dose in the dose range of our study, and Qdr showed increasing tendency with dose.
Kim, Sang-Cheol;Park, Chan-Hee;Seo, Min-Young;Jeong, Ha-Jin;Kim, In-Young;Chung, Hyun-Cheol;Rha, Sun-Young
Proceedings of the Korean Society for Bioinformatics Conference
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2004.11a
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pp.131-137
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2004
DNA 단계에서의 유전자의 증폭과 소실은 종양의 발생과 진행에 중요한 역할을 한다. 유전자의 변화를 관찰하기 위해서 Comparative Genomic Hybridization(CGH) 기술이 많이 이용되어져 왔다. 최근에는 이러한 CGH 기술을 응용하여 cDNA microarray 를 이용한 고밀도 CGH(Microarray-CGH) 기술이 보고 되고 있다. Microarray-CGH 에서 유전자별 변화 정도를 유전자의 log-비의 값의 변화 정도와 염색체 위치 정보를 이용하여 DNA 단계에서의 유전자의 변화 정도를 확인 할 수 있다. 또한 동일한 유전자의 칩을 사용하여 RNA단계에서의 발현 양상과 직접 비교할 수 있는 장점이 있다. 현재 microarray 분석법은 많이 개발되고 실용화 되고 있으나 Microarray-CGH 분석을 위한 프로그램들은 아직 초보 단계며, 생물학자들이 사용하기 힘들고, 프로그램에 분석 자료를 적용하기 어려운 경향이 있다. 위와 같은 단점을 보완하기 위해서 개발된 CAMVS(V1.0) 프로그램은 S-plus(2000)을 기반으로 개발하였고, 복잡한 분석보다는 모든 결과들을 이미지화 할 수 있으며 파일로 결과를 쉽게 확인할 수 있도록 디자인하였다. CAMVS(V1.0)는 전체 염색체를 각 실험별로 비교 분석하는 부분, 특정 염색체를 특정 실험별로 비교 분석하는 부분과 실험간의 차이를 통계적으로 비교 분석하는 3 가지 카테고리로 구성되어 있다. 쉬운 알고리즘과 사용의 편리함, 분석결과의 다양한 그래픽, 새로운 알고리즘 추가의 용이성 등이 CAMVS(V1.0)가 가지고 있는 장점이며, Microarray-CGH를 분석하는데 아주 유용한 분석 도구이다.
To assay the cytogenetic toxicity of $NiCl_2,\;K_2Cr_2O_7CdCl_2,\;and\;HgCl_2$, the frequencies of sister chromatid exchanges(SCEs) and chromosomal aberrations were observed in the metaphase chromosomes of the human lymphocytes which were cultured with above materials. The frequencies of SCEs are dose-dependently increased by all materials in this experiment. Chromosomal aberrations, especially gap and break, are increased by the nickel and chromic compounds, while not significantly increased by the cadmium and mercurial compounds. This results indicate the dose dependent relationship between the frequencies of SCEs and the concentrations of the heavy metals, but the increasing rates of the SCEs induced by the heavy metals are less sensitive than other mutagens or carcinogens which were confirmed.
Leishmaniasis is one of the important tropical diseases in the world. Although it is not prevalent In Korea, imported cases have been recorded. The karyotype of Leishmcnic sp. has been observed to be variable by localities or by strains, but the karyotype of a strain is known to be stable. This study was performed to observe if the karyotype of a Leishmonio sp. would be changed under some stressful conditions. The karyotype, analyzed by pulsed Held gradient gel electrophoresis, was not grossly changed by heat shock, chemotherapeutics, UV illumination, and gamma irradiation. Radiation destroyed the chromosomes mechanically but subcultured organisms after irradiation showed unaffected karyotype. The present findings suggest that the karyotype of a Leishmnnia strain is so stable that it is not altered by temporary stimulation with heat, drugs, and radiation.
This case study is on the course of therapy with a client named E with Chromosome 15q Duplications Syndrome during the therapist's level 1 training, which offers a certification of Nordoff-Robbins Music Therapist(NRMT), at the Nordoff-Robbins Music therapy Center at New York University. This study gives an overview of the clinical process with E as well as the Nordoff-Robbins approach. Yet it is also focused on the therapist's personal and clinical experience and growth throughout the course of therapy. It shows how the therapist experienced various challenging situations and obstacles in the clinical process. There were consistent and diverse trials and mistakes. Throughout the process, therapist could learn more deeply about E's physical, psychological and emotional needsand have new perspectives on how to be a music therapist. The therapist applied 'Qualities of Clinical-Musical Interaction', one of the concepts in Nordoff-Robbins Music therapy, to organize the work with E.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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