Valencia 오렌지로부터 추출한 펙틴에스테라제(pectinesterase, PE) 중에서 가열처리하지 않은 PE 조효소를 CM-Sephadex C-50, Phenyl Sepharose CL-4B와 CM-Biogel A의 chromatography를 차례로 수행하여 내열성이 약한 TLPE(thermolabile pectinesterase)와 내열성이 강한 TSPE(thermostable pectinesterase)를 분리 정제하였다. PE 중에서 가열처리한 PE 조효소에서는 위와 같은 정제과정으로 TSPE 만을 분리하였다. TLPE는 비활성 1,005 units/mg이고 35배로 정제된 것을 13.6% 회수할 수 있었으며, 반면에 가열하지 않고 분리한 TSPE는 비활성 3,115 units/mg이고 100.5배로 정제된 것을 1.5% 얻을 수 있었으나 가열하여 분리한 TSPE는 비활성 1,803 units/mg이고 가열처리한 조효소가 140배로 정제된 것을 15.4% 얻을 수 있었다.
본 실험에서는 식용 가능한 10종 식물의 인지기능 개선 관련 효능을 검토하기 위하여 추출물의 AChE 억제활성과 DPPH, ABTS 라디컬 소거활성을 비교하였으며, GABA 및 글루탐산의 함량을 측정하였다. 그 결과, GABA 함량은 오미자 추출물에서 14.8mg/g으로 가장 높게 나타났으며, 천궁과 하수오 추출물에서도 각각 3.1 mg/g과 5.4 mg/g으로 비교적 높게 나타났다. AChE 저해활성은 오미자, 헛개나무, 측백엽, 가시오가피 추출물이 1 mg/mL에서 각각 33, 26.6, 20.7%, 그리고 17.8%의 저해율을 나타내어 10종 추출물 중 높게 나타났다. 또한, DPPH 및 ABTS에 대한 라디컬 소거능은 헛개나무, 측백엽, 가시오가피, 오미자 추출물에서 매우 강하게 나타났다. 글루타민산은 석창포 외의 9가지 추출물에서 고르게 존재하는 것으로 나타났다. 본 연구에서 검토한 10종 추출물 중 특히 오미자는 뇌의 대사를 향상시켜 뇌기능을 촉진시키는 GABA의 함량이 높은 것과 함께 AChE 억제 활성도 가장 높았으며, 라디컬 소거효과도 비교적 높게 나타나 뇌기능 개선을 위한 뛰어난 소재로 나타났다. 또한, AChE 억제 활성과 라디컬 소거능이 높게 나타난 헛개나무, 가시오가피 및 측백엽의 인지기능 개선을 위한 기능성식품 소재로서의 활용 가능성을 확인하였다. 본 연구 결과를 통하여 인지기능 개선 효능과 관련하여 사용되는 지표 중 AChE 억제 활성과 식물 추출물의 라디컬 소거활성과의 상관관계를 나타내는 경향을 확인하였으며, GABA 및 체내에서 GABA로 전환되는 글루탐산 함량이 직접적인 AChE 억제 효과를 나타내지는 않았다.
The effects of multiple exposures to pesticides on plasma cholinesterase(ChE) activities and urinary p-nitrophenol excretion were evaluated in rats. Rats were received single dose i.p. with $LD_{50}/100(mg/kg)$ of organophosphorous(OP), organophosphorous-organochroline(OP-OC), organophosphorous-carbamate(OP-CAB), organophosphorous-organoarsenate(OP-OA) pesticides for 4 consecutive days. In repeated administration of pesticides, plasma ChE activities were decreased, but urinary p-nitrophenol were increased after the first injection and then decreased gradually The recovery rates of ChE activities and p-nitrophenol excretion at 48 hours after the fourth Injection were delayed in comparision with the baseline value of 24 hours before the first injection. Statistical significances were found between OP and other groups except OP-OA group after the second injection in plasma ChE activities, but in urinary p-nitrophenol excretion there was statistical significance only between OP and OP-CAB.
Alzheimer's disease (AD) is a progressive neurodegenerative disorder symptomatically characterized by impairment in memory and cognitive abilities. AD is characterized pathologically by the deposition of ${\beta}$-amyloid ($A{\beta}$) peptides of 40-42 residues, which are generated by processing of amyloid precursor protein (APP). $A{\beta}$ has been believed to be neurotoxic and now is also considered to have a role on the mechanism of memory dysfunction. In this study, we tested that EtOH extract of the fruits of Chaenomeles sinensis Koehne (CSE) affects on the processing of APP from the APPswe over-expressing Neuro2a cell line. We found that CSE increased over 2 folds of the $sAPP{\alpha}$ secretion level, a metabolite of ${\alpha}$-secretase. We showed that CSE reduced the secretion level of $A{\beta}42$ and $A{\beta}40$ by down regulation of ${\beta}$-secretase (BACE) without cytotoxicity. Furthermore, we found that CSE inhibited BACE and acetylcholinesterase activity in vitro. We suggest that Chaenomelis Fructus may be an useful source to develop a herbal medicine for AD.
The present GC-MS analysis elucidated the composition of the essential oil obtained from the herb of Elsholtzia ciliata(Lamiaceae). Overall, the content of monoterpenes was higher than that of sesquiterpenes. Monoterpenes rich in this oil were carvone (peak area, 26.180%), camphor (2.304%), borneol (9.974%), dihydrocarveol (3.296%), ${\alpha}$-citral (=geranial, 4.025%), geranic acid (2.961%), while sesquiterpenes occupying relatively higher percentage were ${\alpha}$-humulene (0.918%), (-)-spathulenol (0.974%), ${\alpha}$-caryophyllene oxide (2.014%), globulol (1.362%), ${\beta}$-caryophyllene oxide (0.750%). The components characterizing this oil were 1-octen-3-ol, acetophenone, and butylated hydroxytoluene. The $IC_{50}$ of this oil on acetylcholinesterase (AChE) and butyrylcholinesterase (BChE) were $42.37{\mu}g/ml$ and $121.34{\mu}g/ml$, respectively, suggesting that the essential oil of E. ciliata may be active on the memory loss of patients suffering from Alzheimer's disease.
Airborne chlorpyrifos concentrations in formulation workplaces have not been determined in Korea. The aim of the study was to evaluate chlorpyrifos concentrations of air in a formulation workplace and recognize the RBC cholinesterase activities for the formulation workers. 30 air samples (personal or area sampling) were collected and bood samples from 10 workers were collected for RBC chlorinesterase (RBC AChE) activity in a factory on May 2008. Air samples were collected by the National Institute for Occupational Safety and Health (NIOSH) method and were analyzed by GC-MS. Airborne chlorpyrifos concentrations ranged from 0.003 to $12.90mg/m^3$ and geometric mean (GM) was $0.15\;mg/m^3.$ Compared to Korean Occupational Exposure Limit (KOEL) of 0.1 (2011) or $0.2\;mg/m^3$ (2008), at 95% confidence, airborne concentrations exceeded the KOEL 69.7% or 56.1% of the time or less, indicating that this concentration level was unacceptable according to exposure assessment using a LogNorm2$^{(R)}$. Since the workers were continually at work on the organophosphate or carbamate pesticides formulation, individual baseline for RBC AChE activity was not determined. As the results of comparison with reference average value of RBC AChE activity, it was found that a worker was below 70% RBC AChE activity and five workers were abnormal.
Objectives : To evaluate the radical scavenging and acetylcholinesterase (AChE) inhibitory activities of the ethylacetate (EtOAc)-soluble portion of a methanolic extract of Aster yomena, three different assay systems were performed. Methods : The antioxidant activity of A. yomena extract was tested as its capacity to scavenging free radicals of DPPH and $ABTS^+$, which has been widely used to evaluate the antioxidant activity of natural products from plant sources. AChE inhibitory activity was tested against mouse brain AChE by spectrophotometric method of Ellman using ELISA microplate reader. Results : The methanolic extract of A. yomena was fractionated and the EtOAc-soluble portion showed significant AChE inhibitory and free radical scavenging effects. Also the EtOAc-soluble portion revealed the highest phenolic contents as compared to the other extracts. Conclusions : These results indicate that phenolic compounds may be important constituents that give rise to the anti-AChE and antioxidative activities of A. yomena extract. Further phytochemical studies on this plant, for nutraceutical or pharmaceutical application, are warranted.
본 연구에서는 기와층버섯의 자실체에서 메탄올과 열수를 이용해 추출한 물질의 항산화와 항염증, 항아세틸콜린에스테라제(anti-acetylcholinesterase)의 효과를 탐색하였다. DPPH 라디칼 소거능, 환원력 및 철 이온 제거능 등을 이용해 항산화 효과를 측정한 결과 양성대조군으로 사용한 BHT나 토코페롤에 비해 낮았지만 다른 종류의 버섯에 비해 효과가 우수한 것을 확인하였다. 철 이온을 제거하는 항산화 실험에서 기와층버섯의 메탄올 추출물의 효과는 양성대조군인 BHT나 토코페롤에 비해 월등하게 높아서 기와층버섯 자실체의 추출물은 높은 항산화 효과를 지닌 것으로 나타났다. 기와층버섯의 염증저해 효과 실험에서는 배양 중인 RAW 264.7 대식세포에 자실체의 메탄올과 열수추출물을 각각 전 처리 한 후 염증매개 물질인 LPS를 투여하여 추출물의 NO 생성 저해효과를 조사하였다. 실험 결과, 처리한 추출물의 농도가 증가함에 따라 생성된 NO의 양이 현저하게 감소하는 경향을 나타내었다. 또한 기와층버섯의 추출물을 이용해 carrageenan에 의해 흰쥐 뒷발에 유도된 부종을 저해하는 실험에서는 투여한 추출물의 농도가 증가함에 따라 흰쥐의 뒷발에 유도된 부종의 용적도 농도 의존적으로 감소되었다. 따라서 기와층버섯 자실체에 함유된 항산화, 항염증 및 항아세틸콜린에스테라제 성분은 천연 항산화제, 소염제 및 알츠하이머병 치료에 이용이 가능할 것으로 사료되었다.
Yumenoshima III 집파리 계통을 ethyl fenitrothion으로 30세대 도태시킨 EF-30 계통에 있어서의 parathion 저항성 메카니즘을 생화학적으로 조사하였다. 아세틸콜린에스테라제 저해활성은 저항성계통과 감수성 SRS 계통간에 커다란 차이를 보여 이 효소의 감수성 저하가 저항성의 주료 메카니즘으로 작용하고 있음을 알 수 있었다. 양 계통에 있어서의 parathion과 paraoxon의 in vitro 분해활성은 미크로좀 및 수용성 분획과 관련이 있으며, 각각 NADPH와 glutathione을 필요로 하였다. 저항성계통은 감수성계통에 비하여 GSH S-transferase 활성이 높아 이 효소가 저항성 메카니즘에 중요한 역할을 하고 있는 것으로 추정되었다. 저항성계통은 parathion에 대하여 101,487배, ethyl parathion에 대하여 25,914배의 저항성비를 나타내어 parathion이 GSH S-transferase의 기질로 작용하고 있음을 알 수 있었다. 이상의 결과로부터 EF-30 계통에 있어서의 저항성 메카니즘에는 수종의 요인이 관여하여 parathion에 대하여 높은 저항성을 나타냄을 알 수 있었으나, 이들 요인이외에 타 요인의 관여를 배제할 수 없었다.
Over the past decade there has been a resurgence of interest in botanical products for their medicinal uses. This present study was designed to screen medicinal plants for the treatment of brain diseases such as Alzheimer's disease or aging. We tested the effects of the water extracts from 41 species medicinal plants on acetylcholinesterase (AChE) inhibition and antioxidant activity in vitro. Among them, Euodia rutaecarpa, Rubus coreanus, Achyranthes japonica, Morus alba, Salvia miltiorrhiza, Liriope platyphylla, and Rheum palmatum showed relatively AChE inhibition potency over 80%. Among the 7 medicinal plants investigated, E. rutaecarpa showed an 25%, 65%, and 93% inhibitions on AChE activity at 2.5, 12.5, and 25 ㎍/㎖ of the extract, respectively and was found to be one of most potent AChE inhibitor. The water extracts from 4 species (E. rutaecarpa, R. coreanus, A. iaponica, and M. alba) were tested on their antioxidant capacities using radical scavenging effect against ABTS/sup ㆍ+/. Among the 4 medicinal plants investigated, both R. coreanus and E. rutaecarpa showed significant antioxidant capacity. Therefore, E. rutaecarpa and R. coreanus are expected to ameliorate the clinical symptoms in Alzheimer's disease due to significant AChE inhibition and radical scavenging effect.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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