• 제목/요약/키워드: 약 배양

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대장균을 이용한 Phenylalanine 생산에 있어서 온도조절형 발현 Vector의 안정성 (Phenotypic Stability of a Temperature-Controllable Expression Vector on Phenylalanine Production by Escherichia coli)

  • 강상모;박인숙
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제19권5호
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    • pp.433-438
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    • 1991
  • Phenylalanine 고생산용 plasmid pSY130-14는 $\lambda$-phage 유래 온도감수성을 가지고 있으므로 $cI_{857}$ repressor와 PL과 PR을 온도를 올려 phenylalanine의 생산을 유도한다. pSY130-14를 갖는 E.coli AT2471은 kanamycin 무첨가, $38.5^{\circ}C$, 48시간에서 약 30%로 plasmid가 없어지며 첨가에서 안정성이 떨어졌다가 배양시간과 더불어 올라갔는데, 이것은 생육에 피요한 kanamycin gene과 ori만이 남는 것으로 생각된다.

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제한효소 생성능을 지닌 알칼리성 Bacillus sp. 8-13 균주로부터 알칼리성 제한효소의 정제 (Purification of Alkaline Restriction Endonuclease from Alkalophilic Bacillus sp. 8-13)

  • 배무;이지은;박경숙;이강만
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제20권3호
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    • pp.289-294
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    • 1992
  • 토양에서 분리한 여러 알칼리성 세균을 대상으로 제한효소의 유무를 조사하여 Bacillu sp. 8-13으로부터 제한효소의 활성을 발견할 수 있었다. 이 균주의 제한효소는 streptomycin sulfate 침전, ammonium sulfate 침전, DEAD-cellulose와 phosphocellulose ion exchange colum chromatography와 phosphocellulose ion exchange colum chromatography 과정을 통하여 정제하였고 0.1 SDS를 포함하는 7.5 polyacrylamide gel electrophoresis로 subunit의 분잘량을 조사한 결과 약 32,000 dalton이었다. 또 특히 이 균주는 형태적 배양학적 특성이 Bacillus alkalophilus subsp. haldurans와 매우 유사하며, 최적 생육, pH는 10.3이었고, 최적 증식온도는 $50^{\circ}C$ 이었다.

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김치로부터 단백질 분해 효소활성이 우수한 Bacillus subtilis 균주의 분리 (Isolation of a Potent Protease Producing Bacillus subtilis from Kimchi)

  • 최찬영;김명동
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제45권1호
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    • pp.12-18
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    • 2017
  • 전국에서 수집한 발효식품으로부터 단백질 분해 효소활성을 보유한 균주를 분리하였다. Skim milk를 첨가한 TSA 평판배지에서 투명환을 형성한 8점의 균주 중 김치에서 분리된 MBE/L865 균주가 대조구인 KCTC13112 균주에 비하여 약 2.6배의 효소활성을 나타내었으며 Bacillus subtilis로 동정하여 한국미생물보존센터에 KCCM43059 균주로 기탁하였다. B. subtilis KCCM43059 균주의 최적 배양조건은 $37^{\circ}C$, pH 8으로 대조구인 KCTC13112 균주의 비성장속도보다 우수하였다. 반응조건 $60^{\circ}C$, pH 6에서 $429.37{\pm}18.65U/mg$ protein의 최적 효소활성을 나타내었으며 동일조건에서 대조구 균주보다 효소활성이 우수하였다. 또한 B. subtilis KCCM43059 균주는 대조구 균주에 비하여 NaCl에 상대적으로 높은 내성을 나타내었다.

고정화한 유전자 재조합 균주 Pseudomonas putida mt-2 KG1206의 톨루엔 계열 화합물에 대한 생물발광 활성 조사 (Bioluminescence Activity of Toluene Analogs by Alginate-immobilized Pseudomonas putida mt-2 KG1206)

  • 공인철;정홍경;고경석
    • 대한환경공학회지
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    • 제31권2호
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    • pp.147-152
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    • 2009
  • 본 연구에서는 톨루엔 계열 화합물로 오염된 환경에 대해 고정화한 유전자 재조합 균주 KG1206의 적용 가능성에 대해 조사하였다. 재조합 균주 KG1206은 직접 유도제인 m-toluate, benzoate 뿐만 아니라 톨루엔, 자일렌 이성질체가 간접 유도제로서 발광 활성을 나타낸다. 연구에 의해 결정된 고정화 프로토콜의 최적 조건은 다음과 같다: 균주 농도(1 : 1 (v/v)), 오염원 용액(인산염 완충액), 발광 측정에 필요한 비드 수(4개), 5가지 오염원에 대한 최대 발광 활성은 일반적으로 m-toluate > p-xylene > 톨루엔 > o-xylene > m-xylene 순으로 나타났다. 생물발광과 오염원 감소는 HPLC로 확인하였으며, 고정 균주에 의해 초기 5 mM m-toluate는 5시간 배양 후 약 48%의 감소율을 나타내었으며 계속 분해되는 경향이 관찰되었다. 알긴산 균주 고정화에 대한 본 연구 결과는 톨루엔 계열 화합물을 함유한 석유계 탄화수소에 오염된 특정 환경을 생물학적 모니터링에 유용한 방법으로 사용할 수 있을 것이다.

돼지장에서 분리한 Lactobacillus salivarius의 생균제로서 특성 (Probiotic Properties of Lactobacillus salivarius Isolated from Piglet Intestines)

  • 박홍석;이지혜;엄태붕
    • 한국식품영양과학회지
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    • 제28권4호
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    • pp.830-836
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    • 1999
  • 돼지장에 존재하는 많은 균총들로부터 생균제를 분리하기 위하여 생균제로서 필수 조건인 내산성, 내담즙산, 유해균 억제능력들을 조사하였는데 그 결과 다른 균들에 비해 생균제로서 작용 능력이 뛰어난 한 균주인 PA10을 얻을 수 있었다. 생균제로서 중요한 기능인 설사 유발 대장균과 Salmonella를 억제하기 위하여 돼지의 장으로부터 내산, 내담즙의 특성을 가진 미생물틀을 분리 검색하였다. 이들 중, 위산과 담즙에 잘 견디며, 대장균 및 Salmonella에 대한 억제 능력이 뛰어난 한 미생물을 분리하였는데 Lactobacillus salivarious로서 동정되었다. 이미 생물은 pH 3의 위산과 0.3% 담즙산에서 각각 2시간, 24시간 동안 약 50~70%의 생존률을 나타냈으며, 대장균 또는 Salmonella를 MRS배지에서 혼합 배양시 24시간안에 이들 유해균을 완전히 제거할 수 있었다. 이 실험에서 L salivarius로 명명된 이 균은 돼지장에 서식하는 수 많은 미생물중 내산, 내담즙산, 유해균 억제능을 동시에 만족 시킬 수 있는 특성을 가지는 균주임을 알 수 있었다. 앞으로 균주 보존 조건을 확립하고, 동물 실험에서도 유사한 결과를 얻을 수 있다면 이 분리균은 생균제로서 유용하게 이용될 수 있을 것으로 생각된다.

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카드뮴에 특이적(特異的)인 내성균(耐性菌)의 분리(分離) (Isolation of A Bacterial Strain Which Baa Specific Tolerance Against The Cadmium)

  • 박찬성;최경호
    • 한국식품영양과학회지
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    • 제8권1호
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    • pp.25-30
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    • 1979
  • 공장지역(工場地域) 폐수(廢水)로부터 cadmium에 대(對)한 내성균(耐性菌)을 분리(分離)하였으며 이것은 Staphylococcus aureus로 동정(同定)되었다. 동(同) 균주(菌株)는 cadmium 이외(以外)의 중금속(重金屬)($Cr^{3+},\;Hg^{2+},\;Zn^{2+},\;Pb^{2+},\;Cu^{2+}$ 등(等))에 의(依)하여서는 10ppm의 농도(濃度)에서 평균(平均) 약(約) 30%의 증식(增殖)이 저해(沮害)되었으나 cadmium에 의(依)해서는 50ppm까지는 저해(沮害)되지 아니 하였다. 동(同) 균주(菌株)의 증식(增殖)을 완전(完全)히 저해(沮害)하기 위(爲)하여 500ppm의 cadmium농도(濃度)가 필요(必要)하였으나 동(同) 균주(菌株)를 10ppm의 cadmium 또는 $Pb^{2+}$ 존재하(存在下)에서 15시간(時間) 배양(培養)한 세균(細菌)은 500ppm의 cadmium 존재하(存在下)에서도 증식(增殖)이 가능(可能)하였다. 이상(以上)의 결과(結果)로부터 분리(分離)한 균주(菌株)는 타중금속(他重金屬)에 의(依)해서는 생육(生育)이 쉽게 저해(沮害)되나 cadmium에 의(依)해서는 상당한 농도(濃度)까지 생육(生育)이 저해(沮害)되지 아니하는 균체(菌體), 즉(卽) cadmium에 특이적(特異的)인 내성균(耐性菌)으로 판단(判斷)되었다.

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제브라피쉬(Danio rerio) 배아로부터 동형세포주 확립 (Establishment and Characterization of Clonal Cell Lines from Zebrafish, Danio rerio)

  • 이기영
    • 한국어류학회지
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    • 제20권1호
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    • pp.1-6
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    • 2008
  • 제브라피쉬 배아로부터 확보한 세포주로부터 외부형태와 세포 크기에 따라 3종류의 동형세포주를 확립하였다. 활발하게 증식하는 안정된 세포주 및 이들로부터 확립된 동형세포주의 세포특성은 변하지 않고 지속적으로 유지되었으며, 안정된 세포주로부터 총 18개의 콜로니를 확보하여 배양한 다음 3종류의 동형세포주를 선별하여 세포 특성을 분석하였다. 대부분의 동형세포주는 약 80% 정도 정상적인 염색체(2N=50)를 가지고 있었으며 FACs 분석과 일치하였다. 배아로부터 확립된 동형세포주에 항체테스트 결과, vimentin에서 양성을 보이는 결과로 볼 때 확립된 세포주는 분화된 섬유세포임이 확인되었다. 이러한 결과는, 확립된 동형세포주를 이용한 유전자조작과 어류복제에의 활용도를 높일 수 있음을 시사한다.

카드뮴 축적 변이주인 Pseudomonas maltophilia H-8M의 특성 (Characteristics of Cadmium Accumulating Mutant, Pseudomonas maltophilia H-8M)

  • 류병호;노명훈;정수자;배기철
    • 한국식품영양과학회지
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    • 제21권1호
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    • pp.70-75
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    • 1992
  • 본 연구는 cadmium의 축적균주인 Pseudomonas maltophilia H-8을 MNNG로 처리하여 cadmium축적능이 가장 우수한 변이균주인 Pseudomonas maltophilia H-8M을 얻었고 그 특성을 조사하였다. 변이주 Pseudomonas maltophilia H-8M은 카드뮴농도 1,000ppm에서 36시간 배양했을 시 대조구에 비해 약 80%정도의 성장률을 나타내었다. 카드뮴 이외의 중금속의 첨가에 따른 생육상은 $Pb^{2+}$, $Zn^{2+}$, $Hg^{2+}$, $Cu^{2+}$, $Cr^{2+}$, $Co^{2+}$ 등에는 별다른 성장 억제는 없었으나 $Sn^{2+}$에서는 생육억제가 나타났다. 또한 50ppm의 카드뮴을 배지에 첨가 하였을 때 균체내 카드뮴 축적율은 52.92%로 가장 높게 나타났으며 축적부위는 세포벽에 80.3%의 축적율을 나타내었다.

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은을 포함한 공중합체의 항균성 및 물리적 특성에 관한 연구 (Study on the Antibiosis and Physical Properties of Copolymer Containing Silver)

  • 예기훈;조수현;성아영
    • 대한화학회지
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    • 제53권5호
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    • pp.542-546
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    • 2009
  • 최근 들어 은(Ag)은 항균성 및 높은 전도성 등의 특징으로 다양한 분야에서 응용되고 있다. 본 연구는 은을 첨가하여 많은 환경적 요인들로부터 눈을 보호 할 수 있는 고 기능성 안 의료용 소재를 제조 하였다. 기존 콘택트렌즈 재료와 $AgNO_3$을 혼합하여 교반한 후, 70 ${^{\circ}C}$ 중탕기에 넣고 약 1시간 동안 중 합하여 생성된 소재의 항균성과 물리적 특성을 평가하였다. 항균 테스트의 균 배양실험으로 고체배지 와 액체배지를 사용하였으며, $AgNO_3$ 첨가하였을 때 항균성이 매우 양호한 것으로 나타났다. 또한 물리 적 특성으로는 함수율 32.35%와 가시광선 투과율 88.34%를 각각 나타내었다. 본 실험 결과로 볼 때 항 균성을 가지면서 기존의 콘택트렌즈의 물리적 특성에도 부합되는 공중합체가 생성된 것으로 판단된다.

창난젓에서 분리한 Rhodococcus sp. 3T6-5Mj가 생산하는 Cholesterol Oxidase의 정제 및 특성 (Pruification and Characterization of Cholesterol Oxidase Produced by Rhodococcus sp. 3T6-5Mj isolated from Changran-jeot)

  • 박상현;김한수;이윤수;권익부;전억한
    • KSBB Journal
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    • 제13권2호
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    • pp.195-202
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    • 1998
  • Rhodococcus sp. 3T6-5Mj 균주의 배양액으로부터 0.2${\mu}m$ membrane filter을 통과시키고, 아세톤 침전, DEAE-Sephadex A-50 column chromatography의 약음이온 교환수지,cholesterol affinity column chromatography를 통과시켜서 콜레스테롤 산화 효소를 25.6units/mg의 비활성도, 15%의 회수율,88배로 정제할 수 있었다. 본 균주가 생산하는 콜레스테롤산화효소의 분자량은 SDS-PAGE로 측정한 결과 약,52,000 daltons 정도로 추정되었다. 그리고 이 효소의 Km값은 콜레스테롤을 기질로 측정하였을 때 $3.2{\times}10^{-4}M$ 이었다. 본 효소의 최적온도는 $50^{\circ}C$최적 pH는 7.0으로 나타났으며, 열에 대한 안정성은 30~$45^{\circ}C$,pH에 대한 안정성은 6.5~11.0으로 나타났다. 본 효소는 cholesterol, campesterol, stigmasterol, hecogenin, $\beta$m-sistosterol의 기질에 특이성을 나타내었다. 본 효소의 아미노산 440개의 잔기로 이루어져 있으며,그 아미노산 조성은 aspararine/aspartate > glutamine/glutamate > proline > alaline > histidine 의 순으로 나타났다. 본 효소는 효소적 혈중 콜레스테롤의 측정방법에 필수적인 콜레스테롤 산화 효소의 이용 가능성을 보여 주었다.용 가능성을 보여 주었다.

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