Anthers from several lines of carrot (Daucus carota L.) were plated on the semi-solid B$_{5}$, basal medium supplemented with 2,4-D and NAA at two concentrations, 1.0 and 2.0 mg/L plus 0.2 mg/L BAP (benzylaminop-urine). Anthers of the most lines on the B$_{5}$ basal medium with 2,4-D showed higher percentages of callus formation than those with NAA. Particularly, in line 45477, highest percentages of callus formation (50%) were observed on B$_{5}$ medium with 1.0 mg/L 2,4-D plus 0.2 mg/L BAP. With 1.0 mg/L 2,4-D, two months was sufficient for initiation of callus development. Calli were regenerated into plantlets through embryogenesis onto regeneration medium without any growth regulators. When callus showing yellowish and soft structure was cultured, it yielded green plants at high regeneration rates, The response of anthers in callus induction and plant regeneration was different among lines investigated. Optimal callus induction and plant regeneration could be obtained through manipulating the concentration of growth regulators. Plantlets after transfer to perlite were grown successfully in greenhouse conditions. Anther culture of carrot will be used as a useful breeding tool in future.
The conditions for ${\beta}$-galactosidase production from alkalophilic, thermophilic Bacillus sp. TA-11 were investigated. The maximal enzyme production was obtained when the strain was cultured at $50^{\circ}C$ for 5 days with fed-batch culture in the optimal medium containing 1.5% lactose, 0.6% yeast extract 0.15% $K_2HP0_4$and initial pH 9.5, and then final enzyme activity under the above conditions was 5200 unit/ml of cell free extract.
Anthers of hybrids and inbred lines of Chinese cabbage (Brassica campestris ssp. pekinensis) were inoculated on the modified solid or liquid B$_{5}$ medium after several pre-treatments. Anthers were then maintained at 25 $^{\circ}C$ after being subjected to various post-treatment. Somatic embryos began to appear 9 days after inoculation and ended at 13th days. Low temperature pre-treatment did not increase embryoid production whereas high post-treatment temperature of 4$0^{\circ}C$ or 45$^{\circ}C$ enhance the production. There were considerable levels differences in embryogenesis between lines used, but not between the culture methods. Somatic embryo yield was also increased by subjecting anthers to one day at 35$^{\circ}C$ and then another one day at 3$0^{\circ}C$ after plating. Histological observations showed several stages in haploid development ranging from a few celled to large multiple-celled embryoids.s.
Plant cell culture can be divide into two classes non-organic culture and organic culture. Non-organic culture such as suspension culture has many researches, however organic culture about recombinant protein production has little researches. Recombinant protein produced through organ culture is quite stable and it can make proteins by itself without any grow regulators. Therefore organ culture is much easier than other methods. In this research, we used transformed tobacco seed. At first we germinated the seed then separated stems and leaves from the grown plant. And raised in liquid medium by in vitro vegetative reproduction. Continuing most suitable conditions, we compared the Quantities of recombinant protein from intra cellular with from extra cellular. And adding some permeabilizing agents (Pluronic F-68, Triton X-100, DMSO, PEG8000), we increased the productivity of the recombinant protein.
Lectin related inducer can enhance IgG$_1$ production rate from murine hybridoma cells by employing step-feeding of serum free media with producing about 40 mg/$\ell$ of monoclonal antibodies. This step-feeding perfusion process also proves to be able to cutivate animal cells when serum free media can not support the growth of these cells in perfusion process, as well as to improve production rate. This process yields about 28 x 10$^{-10}$ mg of MAb/cells/h compared to 11.1 x 10$^{-10}$ and 4.0 x 10$^{-11}$ mg/cells/h for perfusion process and batch cultivation with 10% serum containing media, respectively.
The purpose of this study was to improve the culturability of 'IR 36', a indica type rice cultivar using DNA marker associated with the ability of plant regeneration in anther and seed culture. The culturability of 6 rice cultivars and 2 indica/japonica lines ('MGRI 036', 'MGRI 079') were investigated in anther and seed culture. The culturability of 3 japonica rice cultivars were much higher than tongil and indica rice cultivars, and 'MGRI 036' and 'MGRI 079' has high culturability with 20% regenerability, also. 34 $BC_2F_4$ 4 lines were selected by marker screening using RZ400 among 90 $BC_2F_4$ lines derived from a cross between 'MGRI 079' and 'IR 36'. The frequency of callus formation of 10 $BC_2F_4$ lines were higher than 'IR 36' in anther culture among selected 34 $BC_2F_4$ lines. The ability of plant regeneration of 10 lines were higher than 'IR 36' in the seed culture among selected 34 $BC_2F_4$ lines. A promising line, $BC_2F_4$-28, was selected to have better culturability in the anther and seed culture among selected 34 $BC_2F_4$ lines. The heading date and grain shape of the $BC_2F_4$-28 was similar to 'IR 36'. Using the RZ400 DNA marker associated with the culturability will be useful method for improving of indica rice culticvar's culturability in rice breeding program.
팽이버섯 균사체를 액체배양하여 전통 장류 발효식품및 음료개발에 이용할 목적으로 7종류의 곡물에 배양한 팽이버섯 배양액의 생리활성을 검토하였다 혈전 용해능은 골목 배양액과 침전물사이에는 차이가 없었으며, 대체로 조, 대두박 및 검정콩 배지에서 혈전용해능이 높게 나타났다. 항균력은 S.aureus에 대해서는 밀, 보리 및 검정콩이 높았고, L. plantarum에 대해서는 조, 밀 및 보리가 높았으며, E.coli에 대해서는 밀과 보리 배지에서 배양한 배양액이 높게 나타났다. Linoleic acid에 대한 항산화 효과는 곡물배지 자체에서는 검정콩, 대두박 및 합성배지에서 높게 나타났고, 팽이버섯을 배양했을 때는 검정콩배지의 항산화력과 유사한 활성을 나타내었다. 비장세포의 증식능은 보리, 밀, 조 및 합성배지에 팽이버섯을 배양하였을 때가 곡물자체에서보다 약 20% 정도 높게 나타났다. ConA를 버섯배양 추출물에 혼합했을 때는 옥수수, 대두박 및 검정콩에서 팽이버섯을 배양한 배양액이 $22\sim26%$ 정도의 증식효과가 있었으며, LPS를 혼합했을 경우는 옥수수, 대두박, 검정콩배지에 배양한 배양액이 각각 45%, 25%,18%의 증식효과가 나타내었다.
In order to investigate the effect of low temperature pretreatment on pollen dimorphism and embryo formation in anther culture of Platycodon grandiflorum, the anthers with microspore at the uninucleate stage were cultured on Murashige and Skoog medium supplemented with 0.5mg/L NAA and 1.0 mg/L BA. The low temperature pretreatment have clear effect on the frequencies of S pollen grains, symmetrical binucleate microspores (B type of S pollen), multinucleate and multicelled pollen grains. Especially, after low temperature pretreatment at 8$^{\circ}C$ for 5 days increased the frequency of S pollen grain (20.6%) in vivo. In addition, the highest frequency of callus induction (54.9%) and embryo formation (9.9%) were obtained from the anther pretreatment at 8$^{\circ}C$ or 5 days. Three distinct pathways could be recognized in the androgenesis, one involving mainly the vegetative cell, the second starting with the vegetative and the generative cell, respectively, and the third accompaning with two equal vegetative type cells in the pollen grains.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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