목적 : 본 연구는 계혈등 약침액이 자궁경부암 세포주 SNU-17에서 세포 사멸 효과가 있는지 알아보고자 하였다. 방법 : 자궁경부암 세포주 SNU-17에서 세포 사멸의 변화를 관찰하기 위해서 MTT cytotoxicity assay, DAPI staining, TUNEL assay, RT-PCR analysis 방법을 이용하였다. 결과 : 세포독성 검사에서 계혈등 약침액은 자궁경부암 세포주 SNU-17에 농도 의존적으로 세포독성을 나타내었다. 이러한 계혈등 약침액의 세포독성이 세포사별로 인한 것인지 다른 기전에 의한 것인지 알아본 결과 계혈등 약침액에 의한 세포독성은 DAPI staining 과 TUNEL assay에서 세포사멸의 특정적인 소견들을 나타내었다. 계혈등 약침액이 Bax, Caspase-3의 발현에 미치는 영향을 RT-PCR로 관찰한 결과 계혈등 약침액은 Bax, Caspase-3의 발현을 증가시켰다. 결론 : 이상의 결과 계혈등 약침액이 자궁경부암 세포주 SNU-17에서 세포 사멸을 야기하여 자궁경부암의 치료에 유용할 것으로 사료된다.
전통적인 면역억제제와 면역활동제인 녹용수용추출액(DAA)은 뼈의 재생에 있어서 중요한 역할을 한다고 여겨진다. 녹용약침이 비활성 연골세포의 분화를 야기시킬수 있는 지를 결정하기 위해, 융합된 세포 배양균을 녹용약침과 함께 24, 36, 48, 72, 120 시간동안 먼저 처리하였다. 이러한 처리후에 배양액을 10-10 ~ 10-8M 1,25-(OH)2D3를 포함하는 새로운 배양액으로 바꾸어 세포들을 추가로 24시간동안 배양했다. 앞선 연구에서 더 성숙된 활성연골세포가 이러한 Vit D3 대사산물에 반응한다는 것을 보여주었기 때문에 이러한 두 번째 처리를 선택하였다. 세포성숙에 있어서 녹용약침의 전처리 효과는 ALPase의 특이활동을 측정하는 것으로 확인하였다. 기질 단백질 합성의 변화는 35SO4 결합이 proteoglycan으로의 변화되는것과 collagen 합성을 측정함으로써 증명되었다. 비활성 연골세포가 녹용약침과 함께 120시간동안 전처리되고 다시 1,25-(OH)2D3를 추가한 처치에서 ALPase 특이활동과 collagen 합성이 농도 의존적으로 증가를 일으켰다. 그러나 proteoglycan의 생성에는 영향을 미치지 않았다. 1,25-(OH)2D3와 함께 전처리 된 비활성 연골 세포는 어떠한 전처리도 받지 않았던 비활성 연골세포처럼 반응했다. 이러한 결과는 녹용약침이 직접적으로 비활성 연골 세포를 활성 연골세포로 성숙시키는데 관여한다는 것을 알려준다. 그러므로 녹용약침은 연골내 골화과정에서 연골세포의 성숙을 조절하는데 중요한 역할을 하는 것으로 나타났다.
목적 : 파킨슨 병은 기저핵 흑질의 치밀부에서 도파민성 신경세포의 퇴행으로 인하여 발생하는 질병으로 신경 염증이 주요 병인으로 밝혀져 있다. 이 연구는 MPTP 유발 파킨슨 병 동물 모델에서 신수혈($BL_{23}$)에 대한 봉독 약침의 항염증 효과 및 그 기전을 확인하기 위해 시행되었다. 방법 : $C57_{BL}$/6쥐를 무처치군, MPTP+saline군, MPTP+BVA(0.06mg/kg)군, MPTP+BVA(0.6mg/kg)군의 4군으로 나눈 뒤 무처치군을 제외한 모든 그룹에 총 8시간 동안 2시간 간격으로 MPTP-HCl(20mg/kg per dose$\times$4)을 복강내로 주입하였다. MPTP+BVA 군에서 봉독약침은 마지막 MPTP 주입 2시간 후부터 48시간 간격으로 신수혈($BL_{23}$)에 양측으로 각 20${\mu}\ell$씩 주입하였고 MPTP+saline군에서는 봉독약침 대신 Saline을 주입하였다. 마지막 MPTP 주입 후 7일째에 쥐의 뇌를 적출한 후 면역조직화학법을 시행하였다. 결과 : MPTP 유발 파킨슨 병 동물 모델에서 신수혈에 대한 봉독약침은 농도 의존적으로 TH-Immunoreactivity neuron의 감소와 microglial activation을 억제하였다. HSP70-IR neuron은 모든 군에서 나타나지 않았다. 결론 : 봉독약침이 용량의존적으로 microglial activation을 억제하는 효과를 통해 도파민성 신경세포의 파괴를 억제함으로써 항염 효과를 나타냄을 알 수 있었다. 이 결과는 봉독약침이 microglial activation 억제를 통해 임상적으로 파킨슨 병과 같은 신경 퇴행성 질병에 있어 유용한 치료수단이 될 수 있음을 시사한다.
한약복합처방(韓藥複合處方)의 경구 투여 및 약침 병용 시술이 STZ에 의해 유발된 생쥐의 당뇨병에 미치는 영향에 확인한 결과 다음과 같은 결론을 얻었다. 1. 한약복합처방(韓藥複合處方)의 경구 투여 및 약침 병용 시술이 STZ에 의한 혈청 중 insulin 함량에는 변화를 나타내지 않았으나 혈청 중 glucose 함량은 감소시켰다. 2. 한약복합여방(韓藥複合濾方)의 경구 투여 및 약침 병용 시술이 STZ에 의해 상승된 혈청 중 triglyceride 함량을 유의하게 감소시켰으나 혈청 중 total cholesterol 함량에는 영향을 나타내지 못했다. 3. STZ 투여로 인해 혈청 내 지질과산화물의 함량이 증가되었으나 한약복합처방(韓藥複合處方)의 경구 투여 및 약침 병용 시술은 이에 영향을 미치지 못 하였다. 4. STZ에 의해 증가된 catalase활성이 한약복합처방(韓藥複合處方)의 경구 투여 및 약침 병용 시술에 의해 감소되었으나, GSH의 활성에는 유의한 변화가 나타나지 않았다.
유근피는 혈액청정작용과 혈액순환에 영향을 주는 성분으로서 골 손상의 처방전으로 자주 사용된다. 현재까지 유근피가 골재형성에 미치는 영향은 약리학적으로 불확실하였다. 이에 저자들은 본 연구에서 유근피를 약침액으로 제조하여 유근피 약침액이 골세포에 미치는 영향을 in vitro에서 연구하였다. 방법으로 인체의 골아전구세포osteoprecursor cells (OPC-1)를 각각의 다른 유근피 농도를 함유한 매체내에서 부화시키고 그에 따른 세포증식을 연구하였으며, 유근피 약침액의 농도가 $100{\mu}g/ml$ 미만이었을 때 OPC-1의 증식량은 증가되었다. 그러나 농도가 $180{\mu}g/ml$을 초과하였을 때는 약물의 독성에 의해서 OPC-1의 증식량이 확연히 억제되었다. 대부분의 처치에서 세포들이 cyclooxygenase-2 (Cox 2) 단백질에 대해서 매우 명백한 발현을 보여줬다. 배양과정 중에 유근피 약침액 농도 최소치인 $1.0{\mu}g/ml$에서 최대치인 $500{\mu}g/ml$까지 경미하게 강화된 띠를 나타내었다. 이와 같은 실험의 결과로 볼 때 유근피 약침액은 골세포의 증식활동, alkaline phosphatse(ALP) 활동 및 total protein 분비의 증가와 골세포내에서의 농도의존적 약침액 투여량에 따른 OPC-1의 독특한 type I collagen 합성에 직접적인 억제작용을 주는 것을 관찰할 수 있으므로 추후 이와 유사한 실험을 통한 보다 발전적인 연구가 이루어져야 한다고 사료되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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