Experiments were conducted to find out the optimum cultural conditions for adventitious shoot regeneration from leaf segments of Gypsophila paniculata L. Thidiazuron (TDZ) was remarkably effective for the regeneration of leaf segment in Gypsophila paniculata compared with BA and kinetin. TDZ showed the highest rate of regeneration at $3.0mg{\cdot}L^{-1}$, while kinetin did not affect the regeneration. BA in the medium increased vitrification. Shoot formation efficiency was much higher on $0.3mg{\cdot}L^{-1}$ of IAA-containing media than NAA-containing media. Regeneration of leaf segments was induced with the agar concentrations of 1.0, 1.2 and 1.6%. Dark treatment at the initial stage of the culture increased the rate of regeneration up to 75%. The leaf explants from the 3rd subcultured stock plants after meristem culture, showed the highest adventitious shoot regeneration efficiency.
Light is one of the most important environmental factors controlling plant physiology. The human granulocyte-macrophage colony-stimulating factor (hGM-CSF) was produced from cell suspension cultures of transgenic tobacco under different light conditions (24 hr light, 18 hr light/dark cycle, dark). Under 24 hr light condition, cell growth was best and dry cell weight reached 14.4 g/L. Light did not influenced the secretion of total proteins. However, in the dark condition, the ratio of secreted total protein/dry cell weight was 1.5 fold higher than those of ethel conditions. Production of hGM-CSF was highest with 18 hr light condition and reached 496.5 ug/L. In addition, the content of hGM-CSf in secreted total proteins was 1.8 fold higher than that of 24 hr light condition, which is beneficial for the purificationof the protein.
A callus-mediated regeneration protocol for sea-milkwort, an endangered coastal plant species in South Korea, is reported here. The explants of in vitro-plantlets generated from a node culture revealed distinguishable responses in callus induction depending on genotype, explant source, light condition, and 2,4-D concentration. Especially, continuous darkness exclusively facilitated callus induction from explants prior to other treatments. The calli initiated on the media with 2,4-D ranging from 0.1 mg/L to 3.0 mg/L in the dark vigorously proliferated when subcultured on the same media in continuous darkness. Given 1.0 mg/L zeatin in addition to darkness to the calli of the 'Pistachio' genotype, normal adventitious shoots were only regenerated from nodular structures that formed earlier from the calli at the frequency of 24.4 percent. Regenerated shoots easily grew into plantlets with roots and green color on a phytohormone-free MS medium under lighted condition, that were used for node culture as plant materials. Node culture effectively multiplied plantlets in accordance with protocol by Bae et al. (2016). Acclimatized plantlet clusters developed mature plant clusters under inland environment, followed by flowering the following April. Results were merged with node culture protocol suggested by Bae et al. (2016), which, as an in vitro propagation system for sea-milkwort, may contribute to natural habitat restoration.
Currently, plastic bags are being used for sawdust cultivation of shiitake mushroom. However, due to serious environmental problems caused by the use of plastic bags, we studied the efficacy of bottle cultivation method to replace the sawdust bag method. Small detachable plastic bottles (400 g capacity) filled with Quercus spp. sawdust and wheat bran (4:1 w/w) media were incubated for 80 and 120 days. The weight loss (%) of the media was higher for the NIFoS 2464 strain at an approximate light intensity of 300 Lux than light intensity of 500 Lux; the light intensity was associated with the loss of sawdust medium-weight during the cultivation period. The highest yield was observed when the strain was cultivated for 80 days under dark conditions, 40 days under 500 Lux light, and air circulation fan speed of 30 rpm. When incubated for 120 days, mushroom yield in the bottle media was higher at 40 days of light exposure than 20 days of light exposure. In the bottle media incubated for 80 days under dark conditions, the mushrooms fruited due to repetitive water spraying on the top of the media and light stimulation during the fruiting period. The media could be separated from the bottles because the media shrank after the first harvest. These separated plastic bottles could be re-used for mushroom cultivation, thereby reducing the amount of plastic waste.
The optimal culture conditions for root organogenesis from the callus of peonies (Paeonia lactiflora Pall.) were investigated. Root explants with vascular bundles were cultured in Murashige and Skoog (MS) medium combined with 0.5-4.0 mg/L auxins (indole acetic acid [IAA], naphthalene acetic acid [NAA], indolebutyric acid [IBA], and 2,4-dichlorophenoxyacetic acid [2,4-D]) and 0.0-2.0 mg/L cytokinins (kinetin, zeatin, and benzylaminopurine [BAP]) to induce callus formation. The callus was then cultured in MS medium combined with three concentrations (0.1, 0.5, and 1.0 mg/L) of IAA, NAA, IBA, kinetin, zeatin, and BAP in the dark for 6 weeks. Based on the results, the effects of dark and light conditions on the callus cultured in MS medium with combinations of 0.1-1.0 mg/L IBA and zeatin for 6 weeks were studied. Callus formation was most effective (>+++) in the medium with a combination of 1.0 mg/L NAA and 1.0 mg/L zeatin. A high number of long adventitious roots were observed in the mediums with 0.1 mg/L IBA (6.66 and 4.82 cm) and 0.5 mg/L zeatin (2.32 and 0.72 cm) among auxins and cytokinins, respectively. The highest number (14.06) of adventitious roots were formed from the callus cultured in light in the MS medium combined with 0.1 mg/L IBA and 0.5 mg/L zeatin. This same medium induced the formation of the longest adventitious root (5.45 cm) in the dark. Thus, optimization of in vitro culture conditions may be possible for the mass propagation of adventitious roots in peonies.
Baek, Ah-Mi;Park, Mi-Young;Park, Jeong-Su;Han, Jeong-Hye;Yang, Young
Journal of Applied Biological Chemistry
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v.52
no.3
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pp.103-108
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2009
Little is known about roles of adipose tissue, although obesity is one of the potential risk factors in causing breast cancer and adipose tissue surrounding breast ductal cells is the largest organ. To identify the genes that are regulated by factors secreted from adipocytes in breast cancer cells, MDA-MB-231 cells were treated with the culture medium of adipocytes. In present study glucocorticoid-induced TNF receptor-related protein ligand (GITRL) gene was studied among the induced genes. It was found that GITRL was significantly increased by the culture medium of adipocytes. Proteinase K-treated adipocyte culture supernatants failed to induce GITRL expression. These findings indicate that unknown protein factors are responsible for the induction of GITRL expression. The expression of GITRL did not affect the invasive ability of MDA-MB-231 cells, but coculture with NK92 expressing GITR suppressed the invasiveness of MDA-MB-231 cells.
이 연구는 MCF-7 인간 유방암 세포주에 대한 귀출파징탕(歸朮破癥湯) 추출물의 증식억제효과 세포독성효과 세포사 유발효과를 확인하기 위하여 이루어졌다. MCF-7 인간 유방암 세포주는 Dulbecco's modified Eagle's medium/F12 (DMEM/F12)에 10% fetal bovine serum(FBS;Gibco) 와 항생제를 가하여 만든 배지를 이용하여 배양하였고, MCPF-7 세포를 96- well plate에 접종한 후 다양한 농도(0~2000g/ml)의 귀출파징탕(歸朮破癥湯)이 든 배지로 처리하고 다양한 시간(48, 96, 192)동안 배양하여 현미경으로 관찰하고 각각 MTS assay kit를 이용하여 세포생존율을 측정하였다. 세포독성은 Sulforhodamine B assay 방법을 이용해 측정하였고 세포사 과정에서 MCF-7세포에서의 caspase 활성화를 측정하기 위해 Western blotting을 수행하여 poly ADP ribose polymerase(PARP)의 절단을 확인하였다. 실험결과 귀출파징탕(歸朮破癥湯) 추출물에 의한 세포성장 및 독성효과는 시간 및 농도에 비례하는 것으로 나타났고 세포고사과정에서 작용하는 caspase의 전 기질인 PARP 절단량이 귀출파징탕(歸朮破癥湯) 처리 농도와 시간에 비례하여 증가하였다. 이것은 caspase-3가 MCF-7 세포의 성장을 억제하는데 중요한 역할을 수행함을 의미한다. 따라서 귀출파징탕(歸朮破癥湯)은 다양한 기전에 의해서 유방암 세포에 대한 억제효과를 가진다는 것을 인식할 수 있다.
Shim, Seon-Hui;Hah, J. Hun;Cho, Soo Youn;Kim, Tae-Min;Koh, Young-Il;Kim, Dong-Wan;Lee, Choon-Taek;Heo, Dae Seog;Sung, Myung-Whun
Korean Journal of Head & Neck Oncology
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v.30
no.2
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pp.43-52
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2014
배경 및 목적 암-연관 섬유아세포(Cancer-associated fibroblasts, CAF)는 종양미세환경의 가장 중요한 요소의 하나다. 그래서 두경부편평세포암에 대해 CAF가 암세포의 운동성에 미치는 영향을 평가하고, CAF에 과발현되는 CD44의 역할에 대해 평가하고자 하였다. 재료 및 방법 두경부암환자의 종양조직에서 CAF를 분리하고, 비종양성 조직으로부터 정상 섬유아세포(NHF)를 분리하였다. 창상치유분석과 상하 챔버를 이용한 3차원 세포 이동 분석을 이용하여, CAF가 암세포의 이동에 미치는 영향을 분석하고, CAF에서 과발현되는 CD44를 중화항체로 CAF를 차단했을 때 암세포 이동의 변화를 관찰하였다. 결과 NHF에 비해 CAF에서 CD44가 과발현되는 것을 관찰하였다. 창상치유분석에서 CAF와 같이 배양된 암세포는 NHF와 같이 배양된 암세포에 비해 더 빠른 이동을 보였다. CD44 중화 항체를 처리했을 때는 암세포의 이동성이 저해되었다. 결론 CAF는 종양미세환경에서 암세포의 운동성을 조절하는 중요한 인자의 하나일 것으로 사료된다. CD44는 CAF의 기능을 매개하는 중요한 표지자 중 하나로 생각된다.
Korean Federation of Science and Technology Societies
The Science & Technology
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v.30
no.4
s.335
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pp.49-50
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1997
동물복제ㆍ인간복제로 떠들썩한 요즈음 우리나라에서 유전공학 바람을 일으키는 주축으로 활약하고 있는 서울대 자연대 미생물학과 강현삼교수. 강교수는 원숭이에서 암을 유발시키는 SV40 바이러스가 가진 암유발유전자와 형질 변형시킨 사람의 각질세포를 이용한 조직배양 실험을 통해 인슐린 등 생존요소를 투입할 경우 아폽토시스 과정을 촉진시켜 암을 억제할 수 있다는 논문을 발표해 관심을 끌고 있다.
The effects of light on the production of anthocyanin and betacyanin in cell suspension cultures of Vitis vinifera and Phytolacca americana were investigated. The cell growth of V.vinifera was little affected by exposure to light, but that of P.americana was markedly increased by light than in the dark In suspension cultures of V vinifera maximum accumulation of anthocyanin was observed during the stationary phase in continuous light By contrast, in suspension cultures of R americana, accumulation of betacyanin occured in parallel with cell division which showed two peaks after 4 days and 8 days of culture in continuous light whereas in continuous dark accumulation of anthocyanin and betacyanin did not occured However treatment of light interrupting for l, 12, and 24 h after 4 days in cell suspension. cultures of remarkably showed a slight anthocyanin accumulation, but after 8 days of culture remarkably accumulated by light interrupting for more than 12 h. In cultures of P. americana, the light treatment was more effective at 4th day than at 7th day after culture, but betacyanin accumulation was decreased again in the dark after light treatment These result indicate that the difference of light responses exist between the V.vinifera and the betacyanin of P. americana though cell suspension culture systems.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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