• Title/Summary/Keyword: 세포 수

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Development of Pig IVM/IVF Produced Embryos to Hatching Blastocysts In Vitro as Affected by Amino Acids and Serum (아미노산과 혈청이 돼지 체외수정란의 부화에 미치는 영향)

  • 엄상준;김은영;김묘경;윤산현;박세필;정길생;임진호
    • Korean Journal of Animal Reproduction
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    • v.20 no.4
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    • pp.433-441
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    • 1997
  • 체외성숙과 수정된 돼지 난자의 체외발달능이 체외배발생 배양액인 NCSU 배양액에 0.4% BSA, 10% 혈청 혹은 아미노산(2% BME 아미노산 용액과 1% MEM 아미노산 용액)을 첨가함으로써 조사되었다. 본 실험에 공시된 난자는 체외수정 후 30시간 (2-세포기) 혹은 48시간 (2~4-세포기)에 회수하였다. 실험 I에서 0.4% BSA가 첨가된 NCSU 배양액에서 2-세포기 난자들의 배양경과시간에 따른 발달능을 조사한 결과, 배양 후 72시간 (체외수정 후 102 시간)에 상실배와 배반포기가 나타났으며, 배양 후 120시간째(체외수정 후 150시간)에도 팽창된 배반포까지만 발달하였다. 실험 II는 체외수정 후 48시간의 분할된(2~8-세포기) 난자들의 핵과 외관적 분할구와의 수적 차이를 조사한 결과, 2~4-세포기보다는 5-세포기 이상에서 핵과 분할구의 조화에 차이가 많았다. 실험III에서는 BSA, 혈청 혹은 아미노산이 첨가 혹은 무첨가된 배양액내에서 2~4-세포기 난자들의 배반포 후 부화능력을 조사한 결과, 모든 군에 있는 난자들은 팽창된 배반포까지 발달할 수 있었던 반면, 난자의 부화는 아미노산 혹은 혈청이 포함된 배양액에서만 일어났다. 더욱이 상실배와 배반포시기에 혈청의 첨가는 부화 배반포기 배의 발달을 현저히 증가시켰다. 이상의 결과로 미루어 볼 때, 배양액내에 대한 아미노산과 혈청의 첨가는 돼지 배반포의 부화를 유도할 수 있다고 본다.

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Sensor system of flowing cell (세포 흐름 감지 시스템)

  • Kwon, Ki-Jin;Kim, Min-Soo;Park, Se-Kwang
    • Journal of Sensor Science and Technology
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    • v.4 no.4
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    • pp.41-46
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    • 1995
  • Sensor system which can detect a flowing cell is designed and fabricated by semiconductor processing and EDM(Electro-chemical Discharge drilling Method). Two methods are used in this paper; 1) optical method which measures the trasmitted light through the cell passage between transmitter and receiver, 2) impedance method which measures impedance change between electrodes, when cell flows in the cell passage. Experimental result using tabaco leaves shows that the ouput value by optical method is 0.2V to 0.7V, and the output by impedance method is 0.2V to 2V, which is bigger, but it includes an avoidable noises.

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Medium Fortification based on the Analysis of Amino Acids and Wastes in Hybridoma Culture (하이브리도마 배양에서 아미노산과 노폐물의 조성 분석에 기초한 배지의 선택적 강화)

  • 현병용;이동섭;박홍우
    • KSBB Journal
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    • v.13 no.1
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    • pp.108-113
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    • 1998
  • The cell growth and amino acid metabolism of a hybridoma cell line in T-flasks, spinner flasks, and a 2L bioreactor were compared. Similar growth and metabolic behaviour were observed for spinner flask and bioreactor cultivations, while those in T-flasks differed significantly. Through a detailed analysis of nutrients and wastes, 7 amino acids were found to be consumed to a much higher extent than the rest of the amino acids. Supplementing the based medium with selected amino acids, glucose, and vitamines increased the cell density by 70%. The addition of vitamines was found to increase the metabolic rates of glucose and lactate.

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Collagen과 osteopontin이 도입된 고기능성 PCL membrane의 제조 및 지방유래 줄기세포의 골세포 분화능 관찰

  • Kim, Yeong-Hui;Song, Ho-Yeon;Jyoti, Anirban;Byeon, In-Seon;Park, Min-Ju;Lee, Byeong-Taek
    • Proceedings of the Materials Research Society of Korea Conference
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    • 2010.05a
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    • pp.42.1-42.1
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    • 2010
  • Poly-carprolactone (PCL)은 생분해성 고분자로 장기간의 임상실험 결과 생체에 독성이 없으며 생체친화성이 우수한 소재로 확인되어 PLGA, PLLA 등과 더불어 조직공학 분야에서 널리 사용되고 있는 생체재료이다. 그러나 PCL은 5개의 비극성 methylene group과 1개의 극성 ester group이 반복되는 지방족의 polyester로 구조상 탄소수가 많아 소수성을 띄는 단점을 가지고 있다. 이러한 표면이 소수성인 재료의 경우, 초기 단백질 흡착능이 떨어져 세포의 부착이 느린 속도로 일어나므로 세포 분화 및 조직 재생이 더디게 일어난다. 본 연구에서는 소수성의 PCL 표면의 단백질 흡착능을 증가시키기 위해 기능성 amine group을 부착하였으며, 또한 골재생을 촉진시킬 수 있는 세포외 기질인 collagen과 osteopontin을 부착함으로써 고기능성 PCL membrane을 제조하였다. 제조된 PCL membrane은 골재생용 조직공학에의 응용을 위해 지방유래 줄기세포를 이용하여 부착능 및 골세포로의 분화능을 확인하였다. 표면 성질의 변화에 의한 세포의 부착능의 변화를 confocal microscopy을 이용하여 부착에 관여하는 단백질의 발현을 확인하였으며, collagen과 osteopontin에 의한 골세포로의 분화능을 확인하기 위해 real time PCR을 통해 골세포의 분화 표지 유전자의 발현을 비교 분석하였다.

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Silicon이 wnt signaling pathway에 미치는 영향

  • Byeon, In-Seon;Song, Ho-Yeon;Sarkar, Swapan Kumar;Kim, Yeong-Hui;Park, Min-Ju;Gwak, Gyeong-A;Jyoti, Md. Anirban;Lee, Byeong-Taek
    • Proceedings of the Materials Research Society of Korea Conference
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    • 2010.05a
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    • pp.44.2-44.2
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    • 2010
  • 최근 골손상이 있을 경우 골 형성을 유도하고 기능을 부여하여 단순한 골조직의 대체를 위한 지지체가 아닌 한층 더 나아간 지지체의 연구가 활발히 진행되고 있다. 뼈 형성 억제 인자를 억제하거나 촉진인자를 첨가하여 뼈의 형성이 증가시키고, 뼈 형성과정에 관여하는 신호체계를 유도하는 어떤 물질을 첨가하여 뼈의 형성을 증가시킬 수 있다. 줄기세포는 다양한 세포로 분화할 수 있는 능력이 있는데 그 과정에서 여러 가지 signal이 관여한다. 그 중 wnt signaling은 줄기 세포가 분화하는 과정뿐만 아니라 세포의 사멸, 이동에 있어서도 매우 중요한 역할을 하며, 줄기세포의 운명 결정에 영향을 미친다고 알려져 있다. Silicon은 조골세포의 부착과 증식, 세포의 활성을 증가시키며 뼈의 형성과정과 석회화 과정에서 중요한 역할을 한다. 또한 BMP-2, collagen 등과 같은 유전자의 발현을 증가시킨다. 따라서 본 연구에서는 Silicon이 조골세포로의 분화과정에 관여하는 신호전달 중 wnt 신호에 미치는 영향에 대해 유전자의 발현 양상과 단백질의 발현 양상을 살펴보기 위해 각각 RT-PCR과 western-blotting을 수행하였다.

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Removal of Residual Toxic Phytohormone in Suspension Cultures of Panax vietnamensis (베트남 인삼세포 현탁 배양에서 잔류 독성 식물호르몬 제거)

  • Lee, Seung-Ho;Kim, Nam-Hyuck;Kim, Ki-Hyun;Quang, Le Bach;Luong, Hoang Van;Byun, Sang-Yo
    • KSBB Journal
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    • v.23 no.2
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    • pp.183-185
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    • 2008
  • Studies were made to remove the toxic phytohormone, 2,4-D, in suspension cultures of Panax vietnamensis. Cells grown in normal MS medium with 2,4-D were inoculated and grown in the MS medium without hormone. Not a big difference was observed in growth characteristics between media with and without 2,4-D. The 2,4-D in the culture, however, was completely removed. During the culture, the residual 2,4-D was consumed rapidly at the early growth stage. The intra-cellular 2,4-D was consumed first and the 2,4-D in the medium was used afterward.

The Experimental Study of Distribution Life-Force Impact on Piles and Landing Pier (잔교식 안벽의 상부와 Pile에 작용하는 파압분포에 관한 실험적 연구)

  • Park, Sang-Kil;Kim, Ki-Hyun;Kim, Woo-Seang;Park, Byung-Yul;Kang, Deok-Hun
    • Proceedings of the Korea Water Resources Association Conference
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    • 2006.05a
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    • pp.552-556
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    • 2006
  • 항만건설에 있어서 항만의 내부시설 중에서 무엇보다도 가장 중요한 시설물은 선박을 안전하게 접안시켜 하역할 수 있는 안벽시설물이다. 안벽구조 형식의 결정은 항만의 이용목적 등에 따라서 달라지지만 항만의 건설입지조건 등에 의해서도 달라진다. 안벽구조형식 중에서 잔교 식 안벽은 무엇보다도 단기간에 건설이 용이하여 지금까지 각국에서 널리 사용되어 왔고 장래에도 이용도가 증가되리라 생각한다. 최근에는 해안선을 이용한 위락시설이 건설되면서 잔교 식 안벽구조물을 설치하여 보조시설물로 이용하는 경우가 많다. 과거에 설계되어 잔교를 설계할 경우는 일반적으로 항내의 정온이 잘 유지되는 경우에 대해서 설치하는 경우가 많기 때문에 파랑에 의한 반사율과 잔교 상부에 작용하는 양압력을 고려해야할 필요성이 거의 없었다. 그러나 최근에는 태풍이 내습할 경우 기존의 항내로 높은 파랑이 침입하는 경우가 발생하고 있어 항내에서도 잔교의 파괴로 인한 자연재해가 대형화되는 경우가 발생하고 있다. 또, 처음부터 안벽을 설계할 때에 대형화의 잔교 식 안벽구조물을 설치하는 경우도 있다. 이런 잔교 식 안벽 구조물을 잔교의 상부 판에 작용하는 양압력 분포와 잔교 전면의 반사율 등이 구조물의 유지관리 등에 미치는 영향이 매우 크기 때문에 반사율 검토와 양압력을 고려한 설계가 필요하다. 본연구의 대상은 일정 해역에 잔교 식 안벽을 설계하고자 할때 최적의 안벽 설계가 될 수 있도록 수리모형실험을 실시하여 구조물의 안전과 항내정온에 기초가 되는 자료를 도출하고자 하였다. 따라서 본 수리모형실험으로 인한 연구는 잔교 식 안벽에 대한 반사율과 상부에 작용하는 양압력, 잔교말뚝(pile)에 작용하는 수평압력을 검토하여 잔교 식 안벽 설계에 기초자료를 제공하고자 한다. 혈청을 이용한 동결보존을 대체할 수 있을 것으로 생각된다.지에 더해주면 세포의 증식이 개선될 것이다. 그래서 몇 가지 첨가물을 이용해 세포의 증식력에 변화가 나타나는지 알아보았다. 첨가물을 이용한 실험에서 IGF-I의 경우 장기간 배양에서 세포의 수를 안정적으로 유지하고 계대 횟수를 증가시키는 효과를 보였다. 이는 IGF-I이 어느정도 세포의 증식을 유지시켜주는 역할을 하기 때문인 것으로 생각된다. 무혈청 배지에서 비적응 CHO 세포의 계대 배양에 한계가 있는 것은 세포주기가 멈추기 때문인 것으로 생각된다. 세포주기가 멈추는 growth factor와 같이 세포의 증식을 지속적으로 유도할 수 있는 물질이 무혈청 배지에서는 부족하기 때문인 것으로 생각되고, IGF-I과 같은 첨가물을 통해 극복할 수 있는 문제라고 여겨진다.관점과 주거교육가치관 요소와의 관계를 알아본 결과, 전통적 관점은 주거교육가치관 요소 중 오직 주거관리적 요소와 관계가 있었으나 그 정도는 낮으며 실천적 관점과 구조적 관점은 주거가치관의 각 요소에 따라 약간 다르기는 했으나 주로 보통의 관계를 보였다.군 순으로 높게 관찰되었다. 이상의 결과를 종합할 때, 임상에서 니켈-티타늄 합금 와이어에 굴곡을 부여하기 위해 열처리하는 경우 초탄성 특성은 유지될 수 있으나, 부하-변위 곡선의 상방 증가가 나타나므로, 와이어에 의한 교정력이 증가될 수 있음에 유의하여야 한다. $day^{-1}$인 인공습지), scenario 2(면적 4.2ha인 저류지)가 각각 연평균 6.9%, 4.8%, 7.1%의 감소를 보였다. TN은 4.7%, 3.4%, 13.4%의 삭감율을 나타내었으며, TP는 5.6%, 3.9%, 7.3%의 삭감율을 나타내었다. 본 연구에서는

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Protective Effects of Kaempferol and Quercetin on Oxidative Stress in CPAE Cell (CPAE 세포를 이용한 Kaempferol과 Quercetin의 산화스트레스 극복효과)

  • Park, Shin-Young
    • Korean Journal of Plant Resources
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    • v.21 no.5
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    • pp.395-401
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    • 2008
  • Flavonoids are ubiquitous substances in fruits and vegetables. A main subgroup of the flavonoids are the flavonols, of which quercetin and kaempferol are the major representatives in foods. They are used in food supplements at high doses, because of their preventive effects on degenerative diseases. The aim of this study was to determine the combined and separate effects of kaempferol and quercetin on oxidative stress in cow pulmonary artery endothelium (CPAE) cells over a broad concentration range. The results demonstrate that cell viability was greatly increased in kaempferol and quercetin treated cells whether $H_{2}O_{2}$-treated or not. Cell viability also increased when treated with flavonols in the absence of oxidative stress. Both preincubation and simultaneous incubation with kaempferol and quercetin protected against the loss of cell viability induced by 1mM $H_{2}O_{2}(5h)$. Protective effects of flavonols against oxidative stress were shown to depend on the treated flavonol concentrations. No protective effect was shown under low concentration treatment and cell viability increased 1.6 times at $200{\mu}M$ relative to the control group. At the highest flavonol concentration of $300{\mu}M$, the increased cell viability by flavonol treatment was decreased to almost half of the maximum values. Combined treatments with kaempferol and quercetin showed more protective effects against oxidative stress by $H_{2}O_{2}$ than the separate effects of each flavonol. In conclusion, the protective effect of kaempferol and quercetin against oxidative stress was very pronounced but high concentrations of flavonols can also induce cell cytotoxicity.

대기압 플라즈마 처리에 따른 Yeast의 반응에 대한 생물 물리적 고찰

  • Yu, Yeong-Hyo;Lee, Jin-Yeong;Hong, Yeong-Jun;Eom, Hwan-Seop;Park, Gyeong-Sun;Choe, Eun-Ha
    • Proceedings of the Korean Vacuum Society Conference
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    • 2012.02a
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    • pp.482-482
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    • 2012
  • 대기압 플라즈마 소스는 미생물을 살균하는 효과를 가지고 있으나 그 메커니즘에 대해서는 여전히 많은 연구가 필요한 실정이다. 우리는 본 연구에서 메커니즘 규명을 위한 시작단계로 플라즈마에 대한 미생물의 반응을 생물학적 및 물리적 분석을 통해 보고자 하였다. 연구에 사용한 미생물은 yeast인 Saccharomyces cerevisiae 이며 Ar Gas 플라즈마를 사용하였다. Yeast에 일정한 시간 동안 플라즈마를 조사한 후 세포의 생존, 모양 변화 관찰 및 DNA에 대한 영향이 분석되었고 r-FIB 장비를 이용하여 세포표면의 이차전자 방출계수를 측정하였다. 플라즈마 조사 시간에 따라 Yeast active cell의 수가 감소하며, water에 넣고 조사할때에는 YPD media에 넣고 조사한 것에 비해 급격히 감소함을 볼 수 있다. 셀의 모양 관찰 결과도 water에 넣고 조사할 때, YPD media보다 더 찌그러듬을 볼 수 있다. 플라즈마 조사량에 따라서 Water의 PH 값은 YPD에 비해 급격히 낮아짐을 보인다. pH의 값을 달리하고 SNP와 H2O2가 첨가된 water에 Yeast를 배양시킬 때, pH의 값이 낮아질수록 yeast의 생존도 감소함을 볼 수 있다. 그리고 DNA gel electrophoresis를 통해 플라즈마 처리를 하게되면 Yeast의 DNA 양이 감소하는 것을 관찰할 수 있다. 또한 플라즈마 처리를 3분 하였을 때의 Yeast 세포막으로부터 방출되는 이차전자방출계수는 다른 처리시간에 대한 값에 비하여 확연히 증가하는 것을 볼 수 있다. 이들 사실로부터 플라즈마의 효과로 인해 외부의 전자를 흡수 및 차단할 수 있는 기능을 갖고 있는 Yeast 세포막의 구조가 변형되어 손상되었음을 의미한다.

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THE EFFECTS OF VARIOUS TETRACYCLINE HCL CONCENTRATION TREATED ROOW SURFACES ON PROLIFERATION AND SPREADING OF PERIODONTAL LIGAMENT CELLS (다양한 농도의 테트라사이클린로 처리된 치근면이 치주인대세포의 증식과 전개에 미치는 영향)

  • Jung, Oh-Chul;Sun, Jo-Young
    • Journal of Periodontal and Implant Science
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    • v.24 no.3
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    • pp.581-596
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    • 1994
  • This in vitro study was undertaken to obtain optimal tetracycline concentration that aids proliferation and spreading of human periodontal ligament cells, for clinical application in root surfaces of periodontally diseased teeth. Periodontal ligament cells used in this study were obtained from explants of periodontal ligament of 1st premolar teeth which were extracted for the purpose of orthodontic treatment. The cells were cultured in Dulbecco's Modified Eagle Medium(DMEM) supplemented with 100 U/ml penicillin, $100\;{\mu}g/ml$ streptomycin and 10% FBS at $37^{\circ}C$, 100% humidity, 5% $CO_2-95%$ air. Cells were used between the third to 4th passage. After root planing of periodontally extracted teeth, the root slabs were cut with carborundum disk. In the cell proliferation experiment, experimental groups were root planing only group, immersed groups in 25, 50, 75, 100, 150mg/ml aqueous solution of Tetracycline HCl followed by a vigorous rinse in PBS. Human PDL cells at concentration of $1{\times}10^5\;cells/ml$ were seeded in each culture well which contained root slabs and incubated for 6 hours. Then, all of the root slabs were moved into new 24 culture well and incubated 24, 48 and 72 hours. The cell counting was done by inverted phase contrast microscope after trypsinization. The following results were obtained. The cell number was increased in order root planing only group, 25, 150, 50, 75, 100mg/ml of Tetracycline HCl treated group in 24, 48 and 72 hours. The maximal cell number was obtained when the root slabs were immersed in solution with 100mg/ml of Tetracycline HCl. There were statistically significant between the root planing only group and 75, 100 mg/ml of Tetracycline HCl treated group in 24 hours, between the root planing only group and 100mg/ml of Tetracycline HCl treated group in 48 hours, between the root planing only group and 50, 75, 100mg/ml of Tetracycline HCl treated group, between 25 and 100mg/ml of Tetracycline HCl treated group in 72 hours(p<0.05). In the cell spreading experiment, after 30 minutes of incubated, in the root planing only group, the cells were generally round in shape. The cell surface was mostly covered with blebs. The cells started to attach to root surface by cytoplasmic extension in 50, 100mg/ml of Tetracycline HCl treated groups, more numerous cells attached to root surface than root planing only group. Many orifices of dentinal tubule were exposed, cells showed radially spreaded cytoplasm and unspreaded central region of the cell was covered with blebs. After 6 hours of incubation, in the root planing only group, cells showed radially spreaded cytoplasm and were attached flat appearance. In 50, 100mg/ml of Tetracycline HCl treated groups, cellular margin was concaved and cytoplasm showed elongated appearance with polarity. After 24 hours of incubation, in the root planing group, cells showed characteristic polarity. In 50, 100mg/ml of Tetracycline HCl treated groups, cells showed more elongated and spindle - like appearance.

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