• 한국생물공학회:학술대회논문집
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• 2003.04a
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• pp.293-297
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• 2003

Glutathione and ascorbic acid have been shown to fulfill many essential functions in animal and plant growth, development, defence and protection against oxidative damage. Effects of glutathione and ascorbic acid were examined in transgenic N. tabacum cells producing hGM-CSF to determine the effects of the vitamins on growth and cell viability. In lag phase, cell viability was preserved by glutathione and ascorbic acid. Therefore, recombinant protein productivity was increased. The purpose of present study is to investigate the role of antioxidants in cold stress-induced apoptosis in plant suspension cells. Cold stress lowered cell viability and increased total genomic DNA fragmentation. Supplementing the cell cultures with glutathione and ascorbic acid inhibited cold stress-induced decrease in cell viability and increase in total genomic DNA fragmentation.

• Proceedings of the Korean Aquaculture Society Conference
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• 2003.10a
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• pp.84-85
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• 2003

조개류의 먹이생물인 미세조류를 대체할 수 있는 효모를 개발하기 위하여 빵효모 (Saccharomyces cerevisiae), Candida utilis, Klyveromyces fragilis 3종류의 효모를 대상으로 그 먹이효율을 실험하였다. 이들 3종류의 효모를 세포벽을 75, 50, 25% 제거한 것과 세포벽을 제거하지 않은 효모로 구분하여 Artemia를 대상으로 먹이효율을 조사한 후 가장 좋은 먹이효율을 보인 C. utilis를 조개류의 대표적 먹이생물인 Isoch교sis galbana 와 함께 진주담치 유생을 대상으로 먹이효율을 조사하였다. Artemia 실험결과 빵효모보다 C. utilis, K. fragilis가 높은 생존율과 성장을 보였으며 세포벽을 제거한 것이 제거하지 않은 것보다 유의적으로 높은 생존율을 보였다. Artemia의 생존율은 75%와 50% 세포벽을 제거한 것이 25%에 비해 유의적으로 높은 생존율을 보였다. 성장은 유의적이지는 않지만 전체적으로 세포벽을 많이 제거할수록 성장과 생존율은 높은 경향이었다. 이와같이 Artemia의 경우는 세포벽을 제거한 C. utilis가 더 좋은 먹이효율을 보인 것은 Artemia는 효모의 세포벽을 소화시키지 못하기 때문으로 판단 할 수 있다. 진주담치 유생의 먹이로 C. utilis를 공급한 경우 성장에 있어서 세포벽을 제거한 효모를 50% 대체한 실험구의 먹이효율이 가장 좋았으며 세포벽을 벗기지 않은 효모의 경우 I. galbana에 비해 낮은 결과를 보였다. 진주담치 유생에 있어서도 세포벽을 제거한 C. utilis를 공급한 것은 대조구인 I. galbana와 생존율에 있어 유의성이 없었다. 그리고 25% 세포벽을 제거한 것을 공급한 실험구는 유의적으로 낮은 생존율을 보였다. 각장 성장의 경우 75% 세포벽을 제거한 것은 대조구인 I. galbana와 유의성이 없었다. 세포벽을 제거한 C. utilis와 I. galbana를 1:1로 혼합하여 공급한 실험의 경우 생존율에 있어서는 세포벽을 50%, 75% 제거한 C. utilis를 50% 첨가한 실험구는 대조구인 I. galbana 100%를 공급한 것과 유의적인 차이가 없었다. 그러나 성장의 경우는 I. galbana 에 세모벽을 75% 제거한 C. utilis를 1:1로 혼합한 실험구에서 각장 179.3 $\mu\textrm{m}$, 각고 150.3 $\mu\textrm{m}$로 가장 높았고 대조구인 I. galbana 100%와는 유의적인 차이를 보였다.

• Journal of Chest Surgery
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• v.34 no.4
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• pp.305-310
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• 2001

배경: 판막대치술에 냉동보존판막의 이용은 감염에 대한 저항성과 탁월한 혈류역학으로 증가하고 있다. 판막육아세포의 생존율은 이식된 냉동보존 판막의 내구성에 영향을 미친다고 알려져 있고, 세포의 생존율은 warm ischemic time에 영향을 받는 것으로 알려져 있다. 냉동 보존하여 이식할수 있는 공여 판막의 warm ischemic time 의 적정치를 구하기 위하여, warm ischemic time에 다른 세포의 생존율을 관찰하였다. 대상 및 방법: 1.조직의 획득: 실제 판막을 냉동 보존하는 상황과 유사하게 하기 위하여 도살된 돼지의 심장과 폐를 밀봉한 상태로 4~8$^{\circ}C$로 냉장 보관하여 (warm ischemic time) 일정시간이 경과한 후, 심장과 폐에서 심장을 적출하여 4$^{\circ}C$하트만 용액에 24시간 보관하였다.(cold ischemic time). Warm ischemic time에 따라 2시간, 12시간, 24시간 36시간으로 4군으로 나누었으며, 각 군마다8개의 돼지 심자을 이용하였다. 2. 조직의 멸균: RRMI 1640에 항생제를 섞은 용액에 멸균하고, 3 냉동과 냉동보존; American tissue bank에서 제시한 냉동곡선에 따라 냉동하여, 액체질소 탱그에서 7일간 보존 후 해동하였다. 4. 생존율의 측정; 판막의 생존율 검사는 Triphan blue test로 하였고, 각각 warm ischemic period후 , cold ischemic period 후, 해동 후에 시행하였다. 5. 분석방법; 분석은 SAS program의 pearson correlation으로 하였다. 결과: 1. 멸균, 냉동과 냉동 보존하는 과정의 적합성을 규명하기 위하여 이 과정의 전과 후인 Cold ischemic period 후와 해동 후의 대동맥판막의 생존율의 차이를 비교한 결과, 차이가 없었다.(p =0.619). 2, warm ischemic time 과 warm ischemic period 후 , Cole ischemic period 후와 해동후의 대동맥판막의 생존율과의 correlation 은 각각 R= -0.857, -.0.673과 -0.549로 강하거나 , 혹은 뚜렷한 음성적 관계가 있었다. 삼천판막의 생존율과 대동맥판막의 생존율과 뚜렷한 상관관계가 있었다. 결론; 1. Warm ischemic time 이 길어지면 판막유아세포의 생존율이 감소하고, 12시간 이상되면 해동후의 판막육 아페포의 생존율이 50% 이하로 떨어졌다. 2. 본 연구에서 시행한 판막의 냉동보존방법은 세포의 생존율을 유지하는데 양호한 것으로 나타났으며 삼천판막으로 대동맥판막의 생존율을 예측해 볼 수 있다. 3. 그러나, 이식후 장기간 적절한 내구성을 갖기 위한 이식될 판막의 생존율은, 육아세포에 관한 여구가 좀 더 되어야 규명될 것이다.

• Journal of the Korean Chemical Society
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• v.38 no.1
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• pp.74-79
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• 1994

The participation of superoxide in initiating tissue damage derived from xenobiotics is best illustrated by paraquat intoxication. In the present study, the roles of superoxide dismutase and catalase on paraquat-induced cell injury were investigated using primary cultured rat skin fibroblast. The degree of cell injury was assassed by the conversion of reduced MTT to a blue formazan. Paraquat produced concentration-and time-related cell injury in cultured rat skin fibroblast. Paraquat induced-cell injury was aggravated by pretreatment of aminotriazol (AT: 10 mM), an catalase inhibitor, and attenuated by addition of catalase (100∼500 unit/ml). However, the effects of diethyldithiocarbamate (DDC : 10 mM), copper- and zinc-containing superoxide dismutase (Cu, Zn-SOD) inhibitor, and Cu, Zn-SOD on paraquat-induced injury were not significant. These results suggest that hydrogen peroxide might be more responsible factor than superoxide in the pathogenesis of paraquat-induced cell injury.

• Journal of Animal Science and Technology
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• v.48 no.5
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• pp.719-726
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• 2006

Bovine whey protein are rich in cysteine, which is the rate limiting amino acid for synthesis of antioxidant glutathione(GSH). Some strains of Lactobacillus caseihas been reported to contain high level of GSH in cell extracts. The objective ofthis study was to determine whether enzymatically hydrolyzed whey protein isolate(WPI) and cell extract of Lb. casei HY2782 could increase intracellular GSH concentrations and protect against oxidant induced cell death in human prostate epithelial cell line (designated as RWPE1, and PC3MMM2 cells). Treatment of RWPE1 cellsandPC3MMM2 cells with hydrolyzed WPI (500g/ml) significantly increased GSH by28.2% and38.4% respectively. Compared with control cells receiving no hydrolyzed WPI(P<0.05). hydrolyzed WPI and Lb casei HY2782 cell extracts significantly protected RWPE1 and PC3MMM2 cellsfrom oxidant induced cell death compared with controls receiving no WPI. DNA damage associated with oxidant treatment was demonstrated by single cell gel (SCG) electrophoresis.

• Journal of radiological science and technology
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• v.37 no.1
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• pp.21-28
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• 2014

Cultured pancreatic beta cells and nerve cells, it is given normal condition of 10% FBS (fetal bovine serum), 11.1 mM glucose and hyperglycemia codition of 1% FBS, 30 mM glucose. For low LET X-ray irradiated with 0.5 Gy/hr dose-rate(total dose: 0.5 to 5 Gy). Survival rates were measured by MTT assay. When non irradiated, differentiated in the pancreatic beta cells experiment is hyperglycemia conditions survival rate compared to normal conditions survival rate seemed a small reduction. However increasing the total dose of X-ray, the survival rate of normal conditions decreased slightly compared to the survival rate of hyperglycemia conditions, the synergistic effect was drastically reduced. When non irradiated, undifferentiated in the nerve cells experiment is hyperglycemia conditions survival rate compared to normal conditions survival rate seemed a large reduction. As the cumulative dose of X-ray normal conditions and hyperglycemia were all relatively rapid cell death. But the rate of decreased survivals by almost parallel to the reduction proceed and it didn't show synergistic effect.

• Radiation Oncology Journal
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• v.24 no.4
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• pp.272-279
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• 2006

$\underline{Purpose}$: This study investigated the influence of irradiation and cisplatin on PrxI & PrxII expression and on their survival rates (SR) in SK-N-BE2C and Rat2 cell lines. $\underline{Materials\;and\;Methods}$: The amount of PrxI & PrxII production with or without N-acetyl-L-cysteine (NAC) pretreatment was studied using a western blot after 20 Gy irradiation to determine the degree of inhibition of ROS accumulation. In addition, the amount of PrxI & PrxII production after cisplatin and after combination with cisplatin and 20 Gy irradiation was studied. The SRs of the cell lines in SK-N-BE2C and Rat 2 cells, applied with 20 Gy irradiation only, with various concentrations of cisplatin and with the combination of both, were studied. The 20 Gy irradiation-only group and the combination group were each subdivided according to NAC pretreatment, and corresponding SRs were observed at 2, 6, 12 and 48 hours after treatment. $\underline{Results}$: Compared with the control group, the amount of PrxI in SK-N-BE2C increased up to 60 minutes after irradiation and slightly increased after irradiation with NAC pretreatment 60 minutes. It did not increase in Rat2 after irradiation regardless of NAC pretreatment. PrxII in SK-N-BE2C and Rat2 was not increased after irradiation regardless of NAC pretreatment. The amounts of PrxI and PrxII in SK-N-BE2C and Rat2 were not increased either with the cisplatin-only treatment or the combination treatment with cisplatin and irradiation. SRs of irradiation group with or without NAC pretreatment and the combination group with or without NAC pretreatment were compared with each other in SK-N-BE2C and Rat2. SR was significantly high for the group with increased amount of PrxI, NAC pretreatment and lower the cisplatin concentration. SR of the group in SK-N-BE2C which had irradiation with NAC pretreatment tended to be slightly higher than the group who had irradiation without NAC pretreatment. SR of the group in Rat2 which had irradiation with NAC pretreatment was significantly higher than that the group which had irradiation without NAC pretreatment. Compared to the combination group, the irradiation-only group revealed statistically significant SR decrease with the maximal difference at 12 hours. However, at 48 hours the SR of the combination group was significantly lower than the irradiation-only group. $\underline{Conclusion}$: PrxI is suggested to be an antioxidant enzyme because the amount of PrxI was increased by irradiation but decreased pretreatment NAC, a known antioxidants. Furthermore, cisplatin may inhibit PrxI production which may lead to increase cytotoxicity of irradiation. The expression of PrxI may play an important role in cytotoxicity mechanism caused by irradiation and cisplatin.

• Proceedings of the Plant Resources Society of Korea Conference
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• 2018.04a
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• pp.85-85
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• 2018

인공재배한 매실나무 겨우살이(PM)의 동결건조시료와 자연산 굴참나무겨우살이(QM)의 열풍건조시료의 80% 에탄올 및 물 초음파추출물을 4종의 세포주(HEK 293, HepG2, AGS, MCF-7)배지에 첨가하여 MTT assay로 농도에 따른 세포생존율을 조사하였다. 시료의 HEK 293(인간신장 정상세포)에 대한 세포 독성은 $100{\mu}g/ml$에서 PM의 80% 에탄올 추출물 및 물 추출물 처리군의 생존율은 각각 $86.30{\pm}2.87%$, $89.27{\pm}0.86%$, QM의 80% 에탄올 추출물 및 물 추출물의 생존율은 각각 $80.76{\pm}1.67%$, $78.07{\pm}0.67%$이었다. HepG2(인간 간암세포)에 대한 항암활성을 측정한 결과 PM과 QM 모두 80% 에탄올 추출물이 물 추출물보다 비교적 높은 항암활성을 나타내었으며 $100{\mu}g/ml$에서 QM 80% 에탄올 추출물이 $57.33{\pm}1.30%$의 생존율을 나타내어 항암활성이 가장 높았고, PM 물 추출물이 $76.45{\pm}2.62%$의 생존율을 나타내어 항암활성이 가장 낮았다. AGS(인간 위암세포)에 대한 독성을 측정한 결과 모든 겨우살이에서 80% 에탄올추출물이 더 높은 독성을 나타내었으며, $100{\mu}g/ml$에서 QM 80% 에탄올 추출물의 생존률이 $60.94{\pm}2.44%$로 비교적 항암활성이 높았고, PM 물 추출물이 $80.10{\pm}1.96%$의 생존율을 나타내어 항암활성이 낮았다. MCF-7(인간 유방암세포)는 $100{\mu}g/ml$에서 QM 80% 에탄올 추출물이 $69.44{\pm}1.56$의 생존율로 비교적 높은 항암활성을 나타내었으며, PM 80% 에탄올 추출물이 $88.30{\pm}4.12%$로 낮은 항암활성을 나타내었다. PM 물 추출물이 $73.23{\pm}3.16$으로 PM 80% 에탄올 추출물보다 비교적 높은 항암활성을 나타내었다. 결론적으로, HepG2(인간 간암세포)와 AGS(인간 위암세포)에 대해서 굴참나무겨우살이 80% 에탄올 추출물의 $100{\mu}g/ml$ 농도가 적합하였고, 매실나무겨우살이는 물 추출물 $100{\mu}g/ml$ 농도에서 MCF-7(인간 유방암세포)에 대한 항암소재로 적합하였다.

• Journal of Convergence for Information Technology
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• v.11 no.8
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• pp.201-206
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• 2021

The aim of this study was to examined the dermatoxicity of ferrous chloride (FeCl2) and the antioxidative effect of Stachys japonica Miq (SJ) extract on FeCl2-induced cytotoxicity. For this study, superoxide anion-radical (SAR)-scavenging and superoxide dismutase (SOD)-like abilities with cell viability were done. FeCl2 showed a significant decrease of cell viability in dose-dependent manner, and it was mid-toxic. The caffeic acid showed a significant increase of cell viability against FeCl2-induced cytotoxicity. In the protective effect of SJ extract on FeCl2-induced cytotoxicity, it showed SAR-scavenging and SOD-like abilities with a significant increase of cell viability. From these results, the cytotoxicity of FeCl2 is correlated with oxidative stress, and SJ extract effectively protected the cytotoxicity of FeCl2 by antioxidative effect. Conclusively, the natural resources like SJ extract may be a useful fundamental materials for the development of an alternative antioxidant.

• Korean Journal of Animal Reproduction
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• v.21 no.1
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• pp.39-46
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• 1997

본 연구는 체외생산된 소 배반포기배의 inner cell mass (ICM) 세포에서 epidermal growth factor-receptor (EGF-R)의 발현 유무를 immunosurgery와 indirect immunofluorescence (간접 면역 형광방법)을 이용하여 조사하고자 실시하였다. 본 실험에 사용된 ICM 세포는 체외수정 후 7∼8일째에 회수된 소 배반포기배로부터 immunosurgery 방법을 실시하여 얻어졌으며, 회수된 ICM세포는 live/dead 염색방법을 통한 생사 유무와 EGF-R 발현 유무 조사에 공시되었다. 특히, 배반포기배에 대한 immunosurgery를 위해 trophectoderm 세포에 대한 rabbit anti-bovine trophectoderm cell antibody (RABTE)를 제조하여 사용하였다. 결과를 요약하면 다음과 같다. ICM세포의 회수율은 RABTE와 guinea pig serum (complement)에 각각 15∼30분과 15∼60분동안 처리했을 경우 16.7∼74.2%였으며, 또한 처리시간이 각각 30분과 30분일 때 가장 높은 회수율(74.2%)을 얻었다. Immunosurgery 후 얻어진 ICM세포의 생존 유무를 조사하기 위해 live/dead 염색 방법을 이용하였던바, ICM세포의 생존율은 complement가 60분 처리된 군(69.3%)을 제외한 모든 처리군에서 84.0∼91.6%의 높은 생존율을 나타냈다. 또한, 회수된 ICM세포에 대한 EGF-R의 존재를 확인하였다. 따라서, ICM세포에서의 EGF-R의 발현은 인위적으로 첨가된 EGF의 이용 가능성을 높임으로서 체외에서의 착상전 배 발달을 증진시킬 수 있을 것으로 사료된다.