To develope the baculovirus expression vector system (BEVS) using Spodoptera exigua nuclear polyhedrosis virus (SeNPV), we characterized the polyhedrin of SeNPV. The SeNPV polyhedra was irregular and composed of the major protein molecular weight of 30 kDa determined by electronmicroscopy and SDS-AGE analysis, respectively. The nucleotid suquences of 876 bases including the coding region of polyhedrin gene was determined and it was revealed that the polyhedrin gene is located within Xho I 3.0Kb and Nco I 6.0 Kb by Southern blot analysis, respectively. Also, the Xho I 3.0 Kb and the Nco I 6.0 Kb fragments were cloned and restriction enzyme map of these clones were determined.
In this paper, we have developed base-calling error detection program and algorithm which show the list of the genes or sequences that are suspected to contain base-calling errors. Those programs detect dubious bases in a few aspects in the process of microbial genome project. The first module detects base-calling error from the Phrap file by using contig assembly information. The second module analyzes frame shift mutation if it is originated from real mutation or artifact. Finally, in the case that there is control microbial genome annotation information, the third module extracts and shows the candidate base-calling error list by comparative genome analysis method.
DNA 센서의 중요한 역할 중의 하나는 염기서열을 분석함으로써 유전적인 질병이나 돌연변이를 찾아낸다는 점이다. 염기서열 분석법으로 질량, 광학, 전기 화학적 측정법 등이 있는데, 그 중 전기 화학적 측정방법이 타 방법에 비해 간편하고 비용도 저렴해서 전망이 매우 밝다. 전기 화학적 측정을 위해서는 전극의 표면 처리 공정과 전극 표면에서의 DNA immobilization, hybridization 공정 및 전기적 신호를 발생시키는 intercalator, 그리고 전기적 신호 검출을 위한 측정 장비가 필요하다. 본 논문에서는 전극의 표면 처리 물질로서 2-mercaptoethanol을 사용했고 double strand DNA의 intercalator로써 methylene blue를 사용했으며, methylene blue의 환원 전류값을 측정하여 double strand DNA를 bare Au 또는 single strand DNA와 구분할 수 있었다. 이러한 연구 결과를 토대로 하여 전기 화학적 신호 검출을 이용한 DNA 센서의 가능성과 개발 방향을 제시하고자 한다.
The sequences of two fragments of 18s ribosomal DNA were determined to elucidate relationship between Pungitius sinensis and P. kaibarae. The proportion of G+C pair is 54.85% to 55.15% in P. kaibarae populations and 52.76% in P. sinensis. Number of substitutions ranges from 10~18 among the populations of P. kaibarae and up to 165 between P. sinensis and P. kaibarae. The value of sequence divergence were 0.0118~0.0195 among the populations of P. kaibarae and 0.2136~0.2306 between P. sinensis and P. kaibarae. The result of pairwise comparison of the sequences indicate that phylogenetic relationship between P. sinensis and P. kaibarae was differentiated to specific level.
The gene encoding the 33 kDa piroplasm surface protein of Theileria sergenti isolated in Korea was cloned and the nucleotide sequence was determined by dideoxy chaill termination method. The cloned gene corresponds to 869 bps encoding an open reading frame of 283 amino acids. Comparison of the sequence between Korean and .Tapanese isolates showed 99.4% homology rate in the nucleotide sequence and 98.9% homology rate in the amino acid sequence.
We have developed GComp as an analysis tool for microbial genome comparison. This tool exploits BLAST or FASTA as a preprocessing program for local alignments to detect homologous regions, parses the homology search results, and generates tables and files to show homology relationship between two genomes at a glance. The interface for graphical representation of the comparative genomic analysis has been also implemented. Our test cases shows that the program can be useful in practice for intuitive and quantitative comparison of microbial genome sequence pairs as well as self-genome analysis. A few additional features have been devised and designed, which will be added in the further development.
In this work, we attempted the application of cell-free protein synthesis technology for the rapid generation of truncated enzymes. Truncated DNAs of a transaminase were PCR-amplified and directly expressed in cell-free protein synthesis reactions. Variants of the transaminase were rapidly prepared and analyzed for their enzymatic activity. Described method that combines the PCR and cell-free protein synthesis technologies will offer a versatile platform for the rapid generation of optimally modified protein species.
Kim, Min Jung;Jo, Byung-Gwan;Heo, Jae-Rin;Choi, Jae-Won;Kim, Hak Yong
Proceedings of the Korea Contents Association Conference
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2017.05a
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pp.297-298
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2017
플라비바이러스(Flavivirus)는 모기와 같은 곤충을 매개로 하여 인체에 감염된다고 잘 알려져 있다. 그 대표적인 예로 지카 바이러스(Zika virus), 뎅기 바이러스(Dengue virus), 황열 바이러스(Yellow fever virus), 일본 뇌염 바이러스(Japanese encephalitis virus) 등을 들 수 있다. 본 연구에서는 생물정보학을 기반으로 인체 감염 주요 플라비바이러스인 지카 바이러스, 뎅기 바이러스. 황열 바이러스, 일본 뇌염 바이러스의 총 4종류 플라비바이러스에 공통적으로 적용 가능한 펩타이드 백신 후보를 제시하고자 한다. 먼저 UniProt (The Universal Protein Resource)의 유전자 서열정보를 이용하여 4종류의 바이러스가 가진 단백질 중 백신으로써 적합한 단백질을 선정하였다. 선정된 단백질의 아미노산 서열정보를 바탕으로 IEDB (Immune Epitope Database And Analysis Resource)를 활용한 에피토프(epitope) 분석을 통해 에피토프로 작용하는 4 종류 바이러스의 공통적인 서열을 도출하였다.
Kinesin has been discovered in Saccharomyces cerevisiae, Aspergillus nidulans, and Drosophila melanogaster and it has major roles in the movemenl of chromosomes and separation of spindle poles. In this study, a gene encoding kinesin heavy chain in Schizosaccharo~n)~ces pombe was cloned by using the polymerase chain reaction with degenerated primcrs corresponding to highly conserved regions of the kinesin heavy chain motor domain. The kinesin gene in S pombe contains an open reading frame of 2496 base pairs and encodes a kinesin prolein of 832 amino acids with a molecular weight of 96 kd. From thc comparison of the predictcd amino acids of the newly cloned kinesin, the kinesin in S. pornbe belongs to the C-terminal motor subfamily of kincsin-related protein.
Proceedings of the Korean Society for Food Science of Animal Resources Conference
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2005.10a
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pp.123-126
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2005
본 연구는 고등동물의 불포화지방산 생합성의 핵심 효소로 알려져 있는 Stearoyl-CoA desaturase(SCD) 유전자의 특정한 단일염기다형(single nucleotide polymorphism; SNP)이 한우의 도체 및 육질형질에 미치는 영향을 분석하기 위해 SCD 유전자의 Intron 7번 영역의 특정부위를 포함하는 primer를 제작하고, 염기서열 분석을 통하여 유전자 구조를 해석한 결과 총 211bp 크기를 갖는 염기서열의 122번째에서 아데닌(A)${\leftrightarrow}$구아닌(G) 염기치환으로 발생한 단일염기다형(SNP) 부위를 발견하였다. 이들 단일염기다형 염기서열 부위를 PCR-SSCP(single-strand conformation polymorphism) 기법을 이용하여 분석한 결과 3종류의 SNP 유전자형(A/A, A/G 및 G/G)을 검출하였다. 이 가운데 A/G 유전자형이 한우의 근내지방도와 등지방두께와 고도의 유의적 연관성이 있다는 새로운 사실을 발견하였다. 따라서, 본 연구를 통해 개발된 한우 SCD 유전자의 특정한 단일 염기다형 표지인자는 한우의 연령 및 성별에 관계없이 육질이 우수한 고급육을 생산하는 우량 한우의 조기식별에 매우 유용한 DNA 표지인자로 활용할 수 있을 것으로 기대된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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