Conditions for efficient organogenesis and plant regeneration from Dianthus gratianopol suspension cultured cells were established. Shoot-forming calli of glossy surface, pale green and knobby type were selected from leaf explant-derived calli and were suspension-subcultured every week in CP liquid medium with 1.0 mg/L 2,4-D and 0.5 mg/L BAP. Combinations of 1.0 mg/L 2,4-D and 0.5 mg/L BAP, and 1.5 mg/L 2,4-D and 0.5 mg/L BAP were effective for the induction of regenerative callus from the suspension cultured cell clusters. Multiple shoot primordia were initiated from the green spots of these regenerative callus and formed shoots on MS medium with 1.0 mg/L TDZ and 0.5 mg/L PAA. Shoot regeneration frequency (calli regenerating at least one shoot) was about 87%. For plant regeneration, proliferated shoots were excised and transferred to MS medium with 0.1 mg/L NAA for root initiation after 9 weeks of culture. The regenerants were potted in soil and formed the flowering buds and petals. Also, adventitious shoots were formed from the excised green shoot primordia of regenerative callus and these shoots proliferated successfully and regenerated to whole plants.
Akt plays an important role in a variety of cellular physiologies such as growth, proliferation, and differentiation. In skeletal muscle, Akt has been implicated in regulating regeneration, hypertrophy, and atrophy. In this study, the role of Akt has been examined during skeletal muscle differentiation. Culturing C2C12 myoblasts under low serum (1% horse serum) and high density converted cell morphology from a round shape to an elongated and multi-nucleated shape. Morphological changes were initiated from day 2 of differentiation. In addition, the expression of both myogenin G and myogenin D was elevated from day 2 of differentiation. Skeletal muscle differentiation was abolished by silencing Akt1 or Akt2, but was significantly enhanced by the over-expression of either Akt1 or Akt2. The activation of Akt was observed from day 2 of differentiation and disappeared after day 7. The expression of kruppel-like factor 4 was observed from day 6 of differentiation. Moreover, this expression was blocked in cells silencing either Akt1 or Akt2. In addition, the promoter activity of kruppel-like factor 4 was significantly reduced in cells silencing Akt1 or Akt2. These results suggest that Akt regulates skeletal muscle differentiation through the regulation of kruppel-like factor 4 expression.
Kim, Ji-Young;Lee, Yoon-Jung;Park, Se-Ah;Kang, Hyun-Mi;Kim, Kyung-Sik;Cho, Dong-Jae;Kim, Hae-Kwon
Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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v.35
no.4
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pp.247-265
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2008
Objectives: Many types of liver diseases can damage regenerative potential of mature hepatocytes, hepatic progenitor cells or oval cells. In such cases, a stem cell-based therapy can be an alternative therapeutic option. We examined whether human amnion-derived mesenchymal stem cells (HAM) and human umbilical cord-derived stem cells (HUC) could differentiate into hepatocyte-like cells as therapeutic cells for the liver diseases. Methods: HAM and HUC were isolated from the amnion and umbilical cord of the volunteers after a caesarean section with informed consent. In order to differentiate these cells into hepatocyte-like cells, cells were cultivated in hepatogenic medium using culture plates coated with fibronectin. Effects of hepatocyte growth factor, L-ascorbic acid 2-phosphate, insulin premixture fibroblast growth gactor 4, dimethylsulfoxide, oncostatin M and/or dexamethasone were examined on the hepatic differentiation. After differentiation, the cells were analyzed by RT-PCR, immunocytochemistry, immunoblotting, albumin ELISA, urea assay and periodic acid-schiffs staining. Results: Initial fibroblast-like appearance of HAM and HUC changed to a round shape during culture in the hepatogenic medium. However, in all hepatogenic conditions examined, HUC secreted more amounts of albumin or urea into medium than HAM. Expression of some of hepatocyte-specific genes increased and expression of new genes were observed in HUC following cultivation in hepatogenic medium. Results of immunocytochemistry and immunoblotting analyses demonstrated that HUC secreted albumin into the culture medium. PAS staining further demonstrated that HUC could store glycogen inside of the cells. Conclusions: Both HUC and HAM could differentiate into albumin-secreting, hepatocyte-like cells. Under the same hepatogenic conditions examined, HUC more efficiently differentiated into hepatocyte-like cells compared with the HAM. The results suggest that HUC and HAM could be used as sources of stem cells for the cell-based therapeutics such as in liver diseases.
최근 성체줄기세포도 배아줄기세포처럼 자신이 속한 조직이나 장기가 아닌 다른 배엽의 줄기세포로 부화할 수 있는 교차분화 능력이 알려지면서 여러 질환에서 이식치료가 활발하게 진행되고 있다. 특히 가톨릭대학교 외신경계 유전테연구센터에서는 난치성 혈관질환 중 놔경색, 버거씨병 등 환자 64명에게서 현저한 치료 효과를 보았다.
Ye Jin Lee;So Yeong Lee;Min Gyeong Jeong;Seong Moon Park;Dong Wan Kim
Journal of Life Science
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v.34
no.3
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pp.170-178
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2024
Adipose-derived stem cells (ADSCs) are capable of differentiation into multiple lineages of cells, which has attracted attention for clinical therapy. However, ADSCs have poor proliferation capacity and a short life span in culture, which is an impediment in the application to clinical use. Previously, to overcome growth disadvantages, we had established an immortalized ADSC line (ADSC-T) by introducing the SV40 T antigen coding gene into primary human ADSC. In the present study, we evaluated the differentiation potential of this cell line and assessed the anti-inflammatory effect of its conditioned medium (CM). ADSC-T appeared to maintain the differentiation potential into adipocyte and chondrocyte. The CM of ADSC-T suppressed the NF-κB activity and its target gene expression of COX-2 and iNOS. Furthermore, the phosphorylations of MAPKs, including ERK, JNK and p38, were suppressed by the ADSC-T CM. The expressions of pro-inflammatory cytokines such as TGF-β, TNF-α, IL-6, and IL-13 were also suppressed by the CM of ADSC-T. In the Nc/Nga atopic model mice, the CM showed therapeutic effect on DNCB-induced atopic dermatitis. These results indicate that the immortalized ADSC-T maintains the beneficial properties of primary ADSC and could be a versatile cell source for not only research into ADSC but also for production of CM suitable for clinical application.
The development of marbling in cattle is closely associated with an increase in adipocyte size and number within muscle. The adipose precursor cells have the capacity to differentiate into adipocytes within the muscle during the formation of marbling. In this studies, we established the cell culture system for differentiation of intramuscular preadipocyte isolated from the sirloin of Hanwoo aged 12 months. The intramuscular preadipocyte cells exhibited a fibroblastic appearance and differentiated into adipocytes by treating confluent cells with differentiation medium containing insulin, dexamethasone, and troglitazone. When intramuscular preadipocyte cells were differentiated at 18 day, the triglyceride concentration was higher than control cells. Moreover, the thiazolidinedione treatment increased adipogenesis. RT-PCR analysis confirmed the significant expression of PPARγ mRNA during adipocyte differentiation. In conclution, our culture system used in this study allowed intramuscular preadipocyte cells to differentiated into adipocytes and intramuscular preadipocyte cells may be useful in the further study of differentiation mechanism of adipocytes in Hanwoo.
Callus growth of fusaric aicd-tolerance cell lines was different depending on fusaric acid concentrations. But callus growth on medium with fusaric acid was higher than that on medium without fusaric acid. Especially, RF-9, RF-11 and RF-15 showed high callus growth at $100\;{\mu}M$ fusaric acid. After subculturing on medium without fusaric acid for 5 weeks, fusaric acid -tolerant stability was investigated. Cell lines at $10{\mu}M$ fusaric acid were showed over 60% callus growth, callus growth rate at $100{\mu}M$ fusaric acid was decreased until 30-80% of control. Regeneration capacity of fusaric acid-tolerant cell lines was different depending on fusaric acid concentrations. Thirteen cell lines regenerated the shoot over at $50{\mu}M$ fusaric acid, and only two cell lines were not regenerated.
Evolutionary artificial neural networks (EANNs) are towards the near optimal ANN using the global search of evolutionary instead of trial-and-error process. However, many real-world problems are too hard to be solved by only one ANN. Recently there has been plenty of interest on combining ANNs in the last generation to improve the performance and reliability. This paper proposes a new approach of constructing multiple ANNs which complement each other by speciation. Also, we develop a multiple ANN to combine the results in abstract, rank, and measurement levels. The experimental results on Australian credit approval data from UCI benchmark data set have shown that combining of the speciated EANNs have better recognition ability than EANNs which are not speciated, and the average error rate of 0.105 proves the superiority of the proposed EANNs.
Proceedings of the Materials Research Society of Korea Conference
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2010.05a
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pp.44.2-44.2
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2010
최근 골손상이 있을 경우 골 형성을 유도하고 기능을 부여하여 단순한 골조직의 대체를 위한 지지체가 아닌 한층 더 나아간 지지체의 연구가 활발히 진행되고 있다. 뼈 형성 억제 인자를 억제하거나 촉진인자를 첨가하여 뼈의 형성이 증가시키고, 뼈 형성과정에 관여하는 신호체계를 유도하는 어떤 물질을 첨가하여 뼈의 형성을 증가시킬 수 있다. 줄기세포는 다양한 세포로 분화할 수 있는 능력이 있는데 그 과정에서 여러 가지 signal이 관여한다. 그 중 wnt signaling은 줄기 세포가 분화하는 과정뿐만 아니라 세포의 사멸, 이동에 있어서도 매우 중요한 역할을 하며, 줄기세포의 운명 결정에 영향을 미친다고 알려져 있다. Silicon은 조골세포의 부착과 증식, 세포의 활성을 증가시키며 뼈의 형성과정과 석회화 과정에서 중요한 역할을 한다. 또한 BMP-2, collagen 등과 같은 유전자의 발현을 증가시킨다. 따라서 본 연구에서는 Silicon이 조골세포로의 분화과정에 관여하는 신호전달 중 wnt 신호에 미치는 영향에 대해 유전자의 발현 양상과 단백질의 발현 양상을 살펴보기 위해 각각 RT-PCR과 western-blotting을 수행하였다.
Proceedings of the Korean Institute of Surface Engineering Conference
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2017.05a
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pp.108-108
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2017
다양한 생체 재료들을 이용한 마이크로 및 나노 크기의 표면 구조 모사는 조직공학에서 세포의 성장 및 분화에 영향을 미치는 것으로 알려져 있다. 특히, 마이크로-나노 구조가 공존하는 계층적 표면 구조는 골 아세포의 증식과 분화에 탁월하여 뼈 조직 재생에 응용되어 왔다. 기존에는 화학적 처리 기법을 이용하여 마이크로 표면 구조가 제작 되었으나 미세 거칠기 및 계층적 표면 구조의 제어가 어려웠다. 현재 이러한 문제점들을 극복하기 위해 플라즈마를 이용한 애칭 기법이 주로 이용되고 있으나 높은 온도 공정 환경에 의한 재료 선택의 한계점 및 오랜 공정 시간에 의한 플라즈마 처리 효율이 감소되어 원하는 표면구조 및 거칠기를 얻을 수 없다는 단점이 있다. 본 연구에서는 이러한 문제점들을 극복하기 위해 마이크로/나노 주조 기법 이용하여 생체적합성 합성고분자 poly(${\varepsilon}$-caprolactone) (PCL) 위에 연꽃잎 구조를 모사한 후 플라즈마 애칭 기법을 이용하여 마이크로-($3.01-3.07{\mu}m$)와 나노크기 ($97{\pm}16nm$)를 동시에 갖는 계층적 구조를 제작하였다. 제작된 구조의 효능을 관찰하기 위해 조골세포를 배양한 결과 평평한 PCL 구조보다 제작된 계층적 구조가 높은 세포성장률 (>2.9배)및 세포 분화도(>2.1배)를 보였다. 이러한 결과는 새로운 표면 공학적 모델로서 손상된 뼈 및 치아조직 재생을 위한 적합한 거칠기 및 표면적인 환경을 제공해 빠른 재생 능력과 더불어 치료기간의 단축을 가져 올 수 있을 것으로 사료된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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