Chinese foxglove (Rehmannia glutinosa) is receiving much attention as one of the principal medicinal crops and the crude drug damand expands rapidly.This study was conducted to obtain the basic breeding information of Chinese foxglove. Effects of supplemental plant growth regulators were investigated on leaf tissue for proliferation. 100% callus formation, 31% plantlet regeneration and 6% root differentiation were obtained by adding 0.5 mg/L NAA and 2.0 mg/L BA. 2,4-D and Zeatin treatment also resulted in 95% increase in callus formation, but shoot was not formed. During the subculture, callus propagation rate recorded 15.4% with 0.2 mg/L NAA and 1.0 mg/L BA and plant regeneration improved on MS medium supplemented with 0.2 mg/L NAA and 0.5 mg/L kinetin. The number of shoot formed ranged from 1.7 on WPM medium to 3.4 on MS medium with 0.1 mg/L NAA and 0.5 mg/L BA. Supplementation of 1.0 g/L activated charcoal improved the In vitro plant growth.
Effects of polyamines and their biosynthetic inhibitors on adventitions shoot regeneration of Populus leaf segments were investigated. Polyamine inhibitors such as difluoromethyl arginine (DFMA), difluoromethyl ornithine (DFMO), and dicyclohexylamine (DCHA) decreased the fresh weight of cultured leaf segment and the rate of adventitious shoot regeneration. The inhibitory effects of DCHA were stronger than any other oplyamine inhibitors, and the rest were in the order of DFMO and DFMA. The inhibitory effects of these inhibitors were lessened or disappeared by the addition of polyamines, among which spermidine was the highest in its effect. Therefore, it is suggested that the spermidine may be related to the adventitious shoot regeneration of Populus leaf segments.gments.
This work was conducted to establish an efficient plant regeneration system for genetic transformation and the in vitro conservation of Sedum sarmentosum genetic resources. Effects of glutamine and $AgNO_3$ on plant regeneration between two genotypes were investigated using MS media supplemented with 0.2 mg/L NM and 3.0 mg/L BA. Calluses were formed on leaf explants placed on MS solid media supplemented with 3 mg/L 2,4-D and 1 mg/L BA. Calluses of Keumsan local strain produced shoots at a frequency of up to 100% after 50 days of culture on medium supplemented with glutamine. The highest number of shoots per callus was 17.6 at 350 mg/L glutamine. However, calluses of Wanju local strain gave rise to no shoots under the same culture conditions. Likewise, calluses of Keumsan local strain produced shoots at a frequency of up to 100% after 50 days of culture on medium supplemented with $AgNO_3$ whereas Wanju local strain sporadically produced shoots. The highest number of shoots per callus of Keumsan local stain was 16.1 at $15{\mu}M$$AgNO_3$. Regenerated shoots were subcultured on hormone-free MS medium for rooting and shoot growth, and then 3-5 cm high plantlets were transplanted to the artificial soils comprising vermiculite and perlite, where they survived at a frequency of 88-100%. After being transplanted into upland soil:sand (1:1, v/v) in a greenhouse, regenerated plants showed a morphologically normal growth.
Proceedings of the Plant Resources Society of Korea Conference
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2010.05a
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pp.13-13
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2010
복주머니난(Cypripedium)속 식물은 우리나라에 광릉요강꽃을 비롯하여 털복주머니난, 흰털복주머니란, 복주머니란, 노랑복주머니란등 5종이 분포하는 것으로 알려져 있다. 광릉요강꽃과 털복주머니란 두 종은 환경부에서 지정한 멸종위기 식물 1급과 2급에 지정되어 보호를 받고 있고 나머지 3종은 제도적으로도 보호를 받지 못하는 실정이다. 본 연구에서는 충분히 성숙한 털복주머니난과 복주머니난의 종자에 NaOCl처리를 하여 발아율을 향상시킬수 있었는데 이러한 전처리가 발아에 미치는 원인에 대한 연구를 실시하였다. 털복주머니란의 무균적인 종자발아는 1.0% NaOCl 처리구에서 70% 이상의 종자발아율을 보였으며, POM배지가 MS배지보다 신초분화가 양호했다. GA3와 활성탄(Activated charcoal)의 혼합첨가는 신초증식에 효과적이었다. 신초분화 후 저온처리는 신초의 증식 율을 증가시켰다. 한편 NaOCl 농도(0, 1, 3, 5, 10%)와 NaOCl 처리시간(0, 5, 15, 30, 45, 60분)에 따라서 복주머니란의 종자발아를 확인한 결과, NaOCl 1%를 30분간 처리하였을 때 가장 높은 발아율을 나타냈다. NaOCl을 처리하여 종자의 종피상태를 SEM과 TEM으로 관찰한 결과 NaOCl의 처리는 종피 세포벽의 부분적 해리 및 작은 구멍을 만들게 하였는데 이러한 종피의 물리화학적 변화가 물과 양분의 이동을 원활히 하여 종자의 발아를 촉진하는 것으로 사료된다. 복주머니난의 신초분화에 미치는 casein과 활성탄의 효과를 알아본 결과 casein 200 mg/L와 활성탄 200 mg/L를 혼합 첨가한 실험구에서 가장 높은 신초분화율을 보였다. 토양순화 후 생존률은 극히 저조했으며 30 개체중에 5 개체만이 다음해 어린동아를 싹틔우는 것을 확인 하였다. 본 결과들을 종합하여 보면 멸종위기식물, 특히 털복주머니란과 복주머니란의 조직배양을 통해서 서식지외 보존방안(기내증식)에 관해 가능성을 제시하였다고 생각되어 진다.
한국산 도룡농, Hvnobius leechii의 7개 집단에서 mitochondrial DNA(mtDNA)의 변이가 조사되었다. MtDNA의 크기에서의 차이는 관찰되지 않았으나 제한효소 인식 부위에서의 차이가 조사되었다. MtDNA의 절편 양상은 각 집단에서 동일하게 나타났다. 제한 효소로 처리하여 얻어진 절편의 비교에서 종내 변이는 염기 치환에 의하여 발생한 것임이 분석되어졌다. 특히 하동과 제주 집단은 몇개의 제한 효소 인식 위치에서 나머지 5개 집단과 뚜렷한 차이를 보였다. 염기치환율(p값)은 공통 절편 비율(p값)을 토대로 하여 얻어졌으며 그 값은 0.004에서 0.064의 범위 내의 값으로 측정되었다. 하동과 제주 집단을 제외한 5개 집단의 비교에서는 비교적 낮은 침의 염기 치환율을 보였으나 제주와 나머지 집단들과의 비교에서는 염기치환율이 높게 측정되었다. 염기 치환율과 관련지어 염기 분화 연대를 측정한 결과 도룡뇽 7개 집단은 3개의 group으로 나뉘어 졌으며 이들은 약 188만년전에 분화된 것으로 사료되어 진다.
As an initial step for future genetic manipulations to improve forage characteristics of Italian ryegrass (Lolium multiflorum Lam.), an efficient tissue culture system was established and the factors affecting plant regeneration were evaluated. MS medium containing 5mg/L 2,4-D was optimal for embryogenic callus induction from mature seed and had a strong effect on successive plant regeneration. The plant regeneration frequency was observed at above 70% when embryogenic calli induced were transferred to N6 medium supplemented with 1mg/L 2,4-D and 5mg/L BA. Among several basic media tested, MS and N6 medium were optimal for callus induction and plant regeneration, respectively. Genotype was an important factor in plant regenerability. 'Jeanne' showed the highest regeneration frequency of 73%. A short tissue culture period and high-frequency regeneration system established in this study will be useful for molecular breeding of Italian ryegrass through genetic transformation.
This study was conducted to establish the tissue culture system for Korean domestic Miscanthus sinensis, which is used in various purposes such as forage, and bio-energy resources. With the mature seed of Miscanthus, optimum concentrations of plant growth regulators were identified for an efficient callus induction and regeneration. Among the treatments of 1~10 $mg{\cdot}L^{-1}$ 2,4-D, IBA, or NAA, callus induction rate was highest (85.3%) on MS medium containing 5 $mg{\cdot}L^{-1}$ 2,4-D. Under the condition, the callus were efficiently induced and proliferated with comparably lower frequencies of callus browning. In shoot regeneration, the treatment of NAA combined with BAP seemed to contribute more efficient conditions to shoot regeneration than those of NAA with Kinetin or 2-iP. Especially, regeneration efficiency and number of regenerated plants were 83.7% and 5.5 in 3 $mg{\cdot}L^{-1}$ NAA with 5 $mg{\cdot}L^{-1}$ BAP, respectively, which were higher frequencies than those in NAA with Kinetin or 2-iP. In results, 5 $mg{\cdot}L^{-1}$ 2,4-D and 3 $mg{\cdot}L^{-1}$ NAA combined with 5 $mg{\cdot}L^{-1}$ BAP were efficient for embryogenic callus induction and regeneration of Miscanthus. This system would be useful for mass-propagation and developing new cultivars via tissue culture of Miscanthus sinensis.
This study was conducted to establish mass propagation system from the tissue culture using immature embryos in Eleutherococcus senticosus. Immature embryos from seeds were removed under the microscope and placed on MS, $MSB_5\;and\;B_5$ medium containing several plant growth regulators. While the calli were well formed on media containing 2 mg/l of 2, 4-D, 2 mg/l of 2, 4-D and 0.7 mg/l of TDZ, shoot regeneration was better on MS medium with combinations of high concentrations of TDZ and low concentrations of 2, 4-D. Treatment of 2, 4-D alone was better than treatment of TDZ alone in callus induction, but plant regeneration was reversed. The results of callus formation and shoot regeneration on $MSB_5\;and\;B_5$ media were similar to those of MS media. The rate of callus formation was nearly 100% when 2, 4-D was added to $B_5$, medium on concentration of 2 mg/l or 0.7 mg/l. TDZ showed very significant effect on the formation of multiple shoots.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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