5년령의 수컷 비글견이 복통을 주증으로 내원하였다. 환자는 ELISA를 통한 심장사상충 항원 검사 및 자충검사에 양성결과를 보여, 심장사상충 감염증이 확인되었다. 흉부 방사선 검사에서 심비대 및 폐동맥 확장증 소견이 관찰 되었으며, 심초음파를 통하여 주 폐동맥 내의 심장사상충이 확인 되었다. 심초음파상 사상충 감염 이외의 다른 이상은 발견되지 않았다. 복통에 대한 정확한 원인 규명을 위하여 탐색적 복강경 시술이 시행되었으며, 환축에서 복강으로 이소기생한 심장사상충이 관찰되었다. 복강내 심장사상충의 제거 이후 환축의 임상증상은 사라졌다. 본 증례는 탐색적 복강경을 통하여 복강내 이소기생한 심장사상충을 제거한 증례 보고이다.
T. gonnii의 Beverley주를 감염시킨 마우스(감염군)로부터 분리한 복강대식세포에 cytokine의 종류 및 농도에 따른 대식세포의 활성화 정도를 평가하기 위하여 복강대식세포 단세포층에 medium, 조제 Iymphokine, 재조합 tumornecrosis $factor-{\alpha}{\;}(TNF-{\alpha})$. 재조합 $interferon-{\gamma}{\;}(IFN-{\gamma})$, 및 재조합 $IFN-{\gamma}와{\;}TNF-{\alpha}$를 함께($IFN-{\gamma}/TNF-{\alpha}$) 처치한 후, 각 처치군별 $H_2O_2{\;}생산량,{\;}NO2^{-}$ 생산량 및 T. gondii의 대식세포내 침투억제능을 측정하였다. 감염군의 복강대식세포에 $IFN-{\gamma}{\;}처치시{\;}NO2^{-}$ 생산량은 농도에 따라 유의하게 증가하였으나 그외의 처치군에서는 농도에 따른 유의한 차이가 없었다. 감염군 대식세포에 $IFN-{\gamma}나{\;}IFN-{\gamma}/TNF-{\alpha}$ 처치시 $H_2O_2$ 생산량이 medium처치군보다 유의하게 증가하였으며. $NO2^{-}$ 생산량은 $TNF-{\alpha},{\;}IFN-{\gamma}나{\;}IFN-{\gamma}/TNF-{\alpha}$ 처치시 유의하게 증가하였다. 감염군에 cytokine 처치시 T. gondii의 대식세포내 침투억제능은 medium 처치시보다 모두 증가되었다 또한 정상군과 감염군의 $H_2O_2$ 생산량, $NO2^{-}$ 생산량 및 T. gondii의 대식세포내 침투억제능을 상호 비교시 $IFN-{\gamma}$ 처치군은 유의한 차이를 나타냈으나 그 외의 cytokine 처치군에서는 유의한 차이를 나타내지 않았다. 이상의 성적으로 보아 $IFN-{\gamma}$가 Toxoplosma감염 마우스 복강대식세포의 활성화에도 중요한 역할을 함을 알 수 있었다.
감작복강삼출세포가 BALB/c마우스에서 간흡충에 대한 면역을 이입 할 수 있는지 규명하기 위해 10마리의 donor마우스를 5마리씩 2군으로 나누어 한 군에는 20개의 간흡충 피낭유충을 강구감염시켰고 다른 군에는 20마리의 본 탈낭유충을 간강내 주입한 30일 후에 도살하여 복강삼출세포를 얻었다. 제1차 감작을 하기위해 20마리의 recipient마우스를 4마리씩 4군으로 나누어 제1군은 간흡충 피낭유충을 가구감염시킨 donor마우스의 복강삼출세포를 recipient마우스의 복강내 주입하였고, 제2군은 본 탈낭유충을 간강내 주입한 donor마우스의 복강삼출세포를 recipient마우스의 복강내 주입하였으며, 제3군은 20개의 본 피낭유충을 경구감소시켰다. 제4군은 비처치대조군으로 하였다. 제1차 감작한 4일후에 전 recipient마우스에 20개의 본 피낭유충을 challenge강구감소시켜 30일후에 모두 도살하여 대조군의 대편 g당 충란수, worm burden 및 비장당에 의한 면역이입의 여부를 판정하였다. Donor마우스의 복강삼출세포를 recipient마우스의 복강내 주입하였을 때 제1군과 제2군마우스에서는 제4군마우스에 비해 대편 g당 충란수의 현저한 감소를 나타내었으나 제3군에서는 그 충란수가 감소되지 않았다. Worm burden은 제2군 마우스에서만 제4대조군에 비해 유의적 감소를 나타내었으며 plaque형성세포는 제1군보다 제2군에서 많이 검출되었고 특히 간흡충 피낭유충으로 감작한 복강삼출세포를 복강내 주입받은 BALB/c마우스에서는 면역에 이입됨을 알았다.
HIV 감염자가 병원에 입원하며 의사가 가장 먼저 생각하는 일은 어떤 기회감염으로 이런 증상을 갖게 되었을까 하는 것이다. 생각할 수 있는 병도 많고 생각해야 할 병도 많지만 그 중에서도 가장 먼저 떠올리게 되는 것이 결핵이 아닌가 한다. 우선 빈도면에서 비교적 흔하고, 임상증상도 정상인과 같지 않은 점이 많아서 혼돈을 일으키는 경우가 많다. 림프종을 생각할 만큼 크고 빠르게 자란 목의 덩어리도 조직검사를 하면 결핵성 림프절염인 경우가 있고 복강내 림프절이 커지거나 뇌막염을 일으키기도 한다. 결핵약으로 치료를 하는 경우에도 해열되는데 기간이 많이 필요하고 치료 도중에 약화되는 경험을 하기도 하였다. 우리나라에서 발표된 보고에서도 서울대학교에서 발표한 173명의 환자들에서 가장 흔한 기회감염은 결핵이었다. 25$\%$의 환자에서 결핵이 발생하였으며, 환자 100명당 1년 동안의 결핵 발생률은 9.6이었다. 면역부전이 진행할수록 이 빈도는 증가한다고 보고한 바 있다. 따라서 HIV감염자를 관리, 치료하는 경우에는 결핵에 대한 충분한 이해가 필요한데 얼마전 New England Journal of Medicine에 HIV감염자에서의 결핵이라는 제목으로 발표된 자료가 있어 이를 정리하였다. 여러모로 도움이 되는 내용이지만 우리나라에서 사용할 수 있는 약제에 한계가 있고 BCG예방접종을 하기 때문에 피부반응 검사로 결핵발생을 예측하기도 어렵다는 점을 고려하면 모든 내용이 우리나라의 현실에 적용되는 것은 아니다.
조직배양(組織培養)을 이용(利用)한 마우스복강거식세포내 인나균증식실험(人癩菌增殖實驗)으로서 trypsin-정제인나균(精製人癩菌)을 사용하여 1) 인나균(人癩菌)의 마우스복강내접종(腹腔內接種)에 의(依)하여 야기(惹起)되는 복강거식세포내의 생체내(生體內) 인나균감염(人癩菌感染)에 대(對)한 동역학적양상(動力學的樣相), 2) in vivo infection-in vitro cultivation에 의(依)한 인나균(人癩菌)의 복강거식세포내 증식태도(增殖態度) 그리고 3) 인나균(人癩菌)의 복강내접종(腹腔內接種)으로 인(因)한 마우스비장조직(脾臟組織)의 병리학적변화(病理學的變化)를 구명(究明)코저 본연구(本硏究)를 실시(實施)하였으며 아래의 결론(結論)을 얻었다. 1. 인나균(人癩菌)의 마우스복강내접종후(腹腔內接種後) 복강거식세포배양실시까지의 기간(其間)이 연장(延長)됨에 따라 배양(培養)된 복강거식세포에 있어서 세포질내(細胞質內)에 식균된 항산균수(抗酸菌數)와 항산균(抗酸菌)을 식균한 거식세포수(細胞數)가 각각 계속적(繼續的)으로 현저(顯著)하게 감소(減小)되어감이 관찰(觀察)되었다. 2. 인나균(人癩菌)의 복강내접종후(腹腔內接種後) 5개월(個月)에 이르기까지 생체내(生體內)에 존재(存在)하는 마우스복강거식세포에 있어서의 인나균증식(人癩菌增殖)을 관찰(觀察)할 수 없었다. 3. 인나균(人癩菌)의 복강내접종후(腹腔內接種後) 24시간(時間) 및 1주(週)만에 실시(實施)된 복강거식세포배양을 2 내지(乃至) 3개월간(個月間) 그 배양상태(培養狀態)를 유지(維持)하였던바 배양(培養)된 거식세포(細胞)의 염색표본(染色標本)에서 거식세포내(細胞內) 항산균수(抗酸菌數)의 뚜렷한 증가양상(增加樣狀)을 관찰(觀察)할수 있었다. 4. in vivo infection-in vitro cultivation 수기(手技)로서 배양(培養)된 복강거식세포를 사용(使用)한 총항산균수측정실험(總抗酸菌數測定實驗)에서 조직배양개시(組織培養開始) 9 및 11주(週)에 이르러 배양(培養)된 거식세포내(細胞內) 항산균수증가(抗酸菌數增加)에 대한 양적증거(量的證據)를 얻을수 있었다. 5. 인나균(人癩菌)의 복강내접종(腹腔內接種)으로 야기되는 마우스비장조직(脾臟組織)의 병리학적소견(病理學的所見)은 주로 적수부위(赤髓部位)에 나타난 변성변화(變性變化)이었으며, 균접종후(菌接種後) 5개월(個月)에 이르기까지 마우스비장내(脾臟內)에 있어서의 인나균(人癩菌)의 증식양상(增殖樣狀)을 관찰(觀察)할 수 없었다.
Kim, Ji-Young;Kim, Gye-Won;Park, Seong-Hak;Im, Weon-Bin;Chang, Min-Sun;Junnick Yang
한국응용약물학회:학술대회논문집
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한국응용약물학회 1996년도 춘계학술대회
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pp.240-240
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1996
Staphylococcus aureus, Klebsiella pneumoniae, Enterobacter cloacae, Proteus mirabilis 및 Pseudomonas aeruginosa에 의한 mouse 복강내감염증에 대하여 DA-1131은 IPM/CS와 MEPM/CS에 비하여 현저히 우수한 치료효과를 나타내었다. 백혈구감소 mouse에서의 P. aeruginosa에 의한 복강내감염증에 대하여도 DA-1131은 IPM/CS와 MEPM 및 MEPM/CS보다 동등 이상의 우수한 치료효과를 나타내었다. K. pneumoniae를 감염균으로 한 mouse 호흡기감염 후 생존율 평가 시험에서 DA-1131 투여 mouse는 IPM/CS 및 MEPM/CS에 비하여 현저히 우수한 생존율을 나타내었고, 동시에 MEPM/CS와 유사한 폐내 생균수의 감소 pattern이 확인되었으며, IPM/CS에 비하여 균의 재증식을 억제하는 효과가 우수하였다. P. mirabilis에 의한 mouse 요로감염증에서는 DA-1131 투여군의 신장내 생균수감소는 MEPM/CS와 동등한 수준인 것으로 나타났으나 IPM/CS에 비하여는 매우 우수하였다.
목적 : 방사선조사가 세포내재성 병원균인 Listeria monocytogenes (LM)의 감염에 미치는 영향과 함께 감염면역과 밀접한 관계가 있는 대식세포에서의 $TNF-\alpha$ 및 Nitric oxide (NO) 생산능의 변화와 비장세포에서의 $IFN-\gamma$ 및 IL-2생산능에 미치는 영향을 알아보고자 본 실험을 시행하였다. 대상 및 방법 : 실험동물로는 BALB/c 마우스를 사용하였으며 Co-60 원격치료기를 이용하여 방사선을 조사하였다. LM감염에 미치는 영향을 관찰하기 위해서 방사선조사 1일후 $10^5$의 LM균을 복강내에 주사하고 1일, 3일, 5일후에 비장조직에서 LM생균수를 측정하였다. 방사선조사가 마우스의 생체내에서와 시험관내에서의 $TNF-\alpha$의 생산능에 미치는 효과를 관찰하기 위해서 각각 LPS로 유도하여 L929/Actinomycin D assay에 의해 $TNF-\alpha$량을 측정하였다. $IFN-\gamma$의 생성능은 방사선조사후 비장을 적출하여 비장세포액을 제조하여 Concavalin A (Con-A)로 자극한 후 정량검사를 하였다. IL-2의 생성능은 $IFN-\gamma$실험에서와 같이 비장세포를 얻어서 Con-A로 자극하여 CTLL-2세포의 성장촉진능력을 관찰함으로써 판정하였다. 방사선조사가 복강내 대식세포에서 생산되는 NO에 미치는 영향도 관찰하였다. 결과 : 방사선 (300cGy)을 조사한 군에 LM을 감염시킨 1일후 비장으로부터 검출되는 생균수는 대조군에 비해 감소하였으나 감염 3일 5일후의 생균수는 대조군에 비하여 오히려 증가하였다. 시험관내 복강대식세포에 방사선 (100-850cGy)을 조사하면 1일후 생산되는 $TNF-\alpha$의 양은 대조군에 비하여 증가하였으나, 방사선조사 (100-600cGy) 5일후 수집된 복강대식세포에 의한 $TNF-\alpha$의 생산은 오히려 감소하였고. 방사선조사 (300cGy)후 LM감염시 5일후 유도된 생체내 $TNF-\alpha$의 생산도 대조군에 비해 감소하였다. 방사선 (300cGy)을 조사한 마우스로부터 적출한 비장세포로부터 생산되는 $IFN-\gamma$와 IL-2의 양은 대조군에 비해 감소하였다. NO의 양은 100cGy 및 300cGy조사시 대조군에 비해 증가하였으며 그 이상 조사량을 증가하면 점차 감소하였다. 결론 : 방사선조사후 세포내재성 병원균인 LM감염에 대한 초기 저항성의 증가와 감염중반이후의 저항성 감소는 대식세포에서의 초기 $TNF-\alpha$ 생산능 증가후 감소, 그리고 T림프구에서의 $IFN-\gamma$및 IL-2 생산능 감소와 관련이 있을 것으로 사료된다.
톡소포자충(Tomplosmasonnii)은 1개의 종(species)만이 있으나 숙주에서 발현되는 독력의 정도차 질병 양상에 따라 많은 충주(strain)로 분류되며. 따라서 감염 후 이들 사이의 면역학적 특성에 차이가 있을 것으로 예상된다. 본 연구는 톡소포자충의 강독주인 RH주 감염 마우스 (마우스당 $1{\;}{\times}{\;}10^5$개의 tachyzoite를 복강내로 감염) 및 약독주인 Beverley주 감염 마우스(마우스 당 10개의 씨스트를 복강내로 감염)의 혈액 및 조직(간. 뇌. 비장)을 일정 간격으로 채취하여 ELISA, Western blot, PCR등을 이용하여 톡소포자충의 충주에 따른 항원 항체의 검출 시기 및 양상을 알아보았다. 강독주를 감염시킨 마우스의 혈청내 순환항원 및 혈액내 충체(parasitemia)는 감염 2일부터 검출되었으며. 혈액. 간, 뇌 및 비장에서는 감염 3일부터 톡소포자충 특이 DNA band를 볼 수 있었다 그러나 강독주 감염 마우스는 생존기간중 IgM 및 IgG 항체를 검출할 수 없었으며 감염 혈청은 Westernblot상 톡소포자충 항원대와 반응하는 공통 band도 없었다 약독주 감염 마우스의 혈청내 순환 항원은 감염 10일부터 출현하기 시작하여 감염 35일까지 검출되었다 톡소포자충피 특이 DNA는 혈액에서는 감염 15일~60일에, 비장은 감염 10일~30일에 검출되었으며, 간 및 뇌에서는 각각 감염 15일 및 20일부터 검출할 수 있었다. IgM 항체는 감염 10일부터 검출되기 시작하여 감염 60일까지 계속적으로 검출되었으며 감염 15~25일 사이에 비교적 높은 항체가를 유지하였다. IgG 항체는 감염 15일부터 유의한 증가를 나타내기 시작하여 실험 기간동안 계속 적으로 증가하였다. 또한 약독주 감염 마우스의 혈청은 감염 기간에 따라 특징적인 공통 항원 band를 볼 수 있었으며, 대부분의 감염 혈청은 27 5-kDa 및 32.5-kDa의 톡소포자충 항원대와 반응하였다. 이상의 성적으로 보아 톡소포자충의 강독주 감염 마우스는 생존기간중 항체는 검출할 수 없었으나 항원은 감염 2~3일부터 혈액 및 조직에서 검출되었으며, 약독주 감염 마우스는 감염 기간 및 조직에 따라 감염 10일부터 특이 항원 및 항체 반응을 나타내 이들 두 충주는 감염후 숙주에서 뚜렷한 면역학적 반응이 서로 차이가 있음을 알 수 있었다.
폐홉충(Paragonimus westermani) 초기 감염시의 숙주 면역 기전을 알아보기 위하여 폐흡충 피낭유충을 백서에 감염시켜 주별(주별)로 항혈청을 분리하고 등일 백서에서 복강 대식세포(homologous rat peritoneal macrophage)를 얻은 다음, 이들과 폐흡충 탈낭유충 및 숙주 조직 이행중인 유약충으로 effector system을 조작하여 폐흡충 유충에 대한 항체 의존성 대식세포 공격기전을 관찰하였다. 백서 복강 대식세포는 항혈청 출현 시에만 폐흡충 탈낭유충에 대한 세포부착 반응(cell adherence reaction)을 보였고 이 반응에는 보체가 관여하지 않았다. 폐흡충 감염 1주에서 8주까지의 백서 항혈청 중 2주째에 분리한 항쳔청 실험군에서 100%의 세포부착 반응을 나타내었고 사멸된 충체를 관찰할 수 있었으며, 세포부착 반응은 탈낭 유충기에서만 나타나는 반면 조직이행 유약충에서는 전혀 그 반응을 인정할 수 얼어 폐흡충 감염에 따른 항체의존성 숙주 세포 매개독성(antibodydependent cell·mediated cytotoxicity)은 발육단계 별 특이성을 보였다. 한편, 대식세포의 공격에 의하여 사멸된 폐흡충 탈낭유충의 형태학적 특징은 대식세포와 유충 사이에 형성되는 fuzzy material, tegumental syncytium 내의 미세구조의 변성 및 syncytium과 근육층을 연결하는 tubular tunnel의 형성 등이었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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