In this experiment, I investigated toxicity evaluation of chemicals using domestic frog embryos, along FETAX (Frog Embryo Teratogenesis Assay-Xenopus) protocol. I investigated $Cu^{2+}$ and Tebuconazole effect on the tree frog, Hyla japonica, embryos by probit analysis. Mortality and malformation rates increased and larval body length decreased depending on the concentrations of $Cu^{2+}$ and Tebuconazole. The teratogenic concentration ($EC_{50}$) of $Cu^{2+}$ and Tebuconazole were 0.05, 5.0mg/${\ell}$, respectively and the embryo lethal concentration ($LC_{50}$) of $Cu^{2+}$ and Tebuconazole were 0.16, 38.5, respectively. The teratogenic index (TI) appeared 3.0 in $Cu^{2+}$ and 7.7 in Tebuconazole, which showed teratogenicity in embryonic development of Hyla japonica. These results reveal that $Cu^{2+}$ and Tebuconazole in this experiment suppressed the development of embryos at relatively low concentration. Much of Hyla japonica embryos can be secured, and easy to incubate. In addition, mortality, malformation ratios, malformation patterns and growth rates are similar to the results from the other assay systems. Therefore, the Hyla japonica embryo teratogenesis assay system could be a useful tool to evaluate toxicity of pollutants in environment.
Understanding molecular mechanisms that control embryonic stem cell (ESC) self-renewal and differentiation is important for the development of ESC-based therapies. Statins, inhibitors of 3-hydroxy-3-methylglutaryl coenzyme A reductase (HMG-CoA reductase), potently reduce cholesterol level. As well as inhibiting cholesterol synthesis, statins inhibit other intermediates in the mevalonate pathway such as farnesyl pyrophosphate (FPP) and geranylgeranyl pyrophosphate (GGPP), major substrates for protein isoprenylation. Studies showed that pleiotropic effects of statins beyond cholesterol lowering property arise from inhibition of protein isoprenylation that is involved in various cellular functions including proliferation and differentiation. It has been determined that statins have inhibitory effect on ESC self-renewal and stimulatory effect on ESC differentiation into adipogenic/osteogenic lineages. Importantly, statins mediate downregulation of ESC self-renewal by inhibiting RhoA-dependent signaling, independently of their choresterol-lowering properties. Understanding statin's actions on ESCs may provide important insights into the molecular mechanisms that regulate self-renewal or differentiation of ESCs.
Hwang, Un-Ki;Heo, Seung;Park, Jong-Soo;Kang, Han Seung
Korean Journal of Environmental Biology
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v.30
no.2
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pp.128-135
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2012
The individual toxicity of lead (Pb) and zinc (Zn) has been investigated by using the sea urchin (Hemicentrotus pulcherrimus) germ cell and pluteus-larvae. The gametotoxic and embryotoxic effects of Pb and Zn on H. pulcherrimus were each investigated at 31, 63, 125, 250, 500 ppb and 16, 31, 63, 125, 250 ppb, respectively. Spawning was induced by 0.5 M KCl solution and the fertilization and normal embryogenesis rates test were performed for 10 min and 64 h after fertilization, respectively. In exposure to Pb, the fertilization rate was not significantly changed compared with control but normal embryogenesis rate was significantly decreased with concentration dependent manner. Fertilization and normal embryogenesis rates showed a significant decreased with concentration dependent manner in exposed to Zn. The normal embryogenesis rates were significantly inhibited in exposed to Pb ($EC_{50}$=45.13 ppb, 95% Cl=40.12~50.05 ppb) and Zn ($EC_{50}$=19.82 ppb, 95% Cl=18.26~21.31 ppb). In exposure to Pb and Zn, the NOEC of normal embryogenesis rate was <31.25 and <15.63 ppb, respectively. The LOEC showed each 31.25 and 15.63 ppb in exposed to Pb and Zn. These results suggest that the early embryo development of H. pulcherrimus is highly sensitive to heavy metals such as Pb and Zn, H. pulcherrimus can be used as a test organism for risk assessment in marine ecosystems.
생쥐(C3H/JMS)의 한쪽 자궁(子宮)에 봉합계(縫合系)를 삽입한 후 초기배아(初期胚兒)의 발생과정(發生過程), 이동속도(移動速度) 그리고 착상(着床)의 상태를 관찰하였다. 임신한지 2일째 되는 날에 자궁(子宮)에 장치를 받지 않은 쪽에서는 초기배(初期胚)의 일부가 이미 수난정(輸卵精)의 뒷부분에 도달하고 있었으나 장치를 받은 쪽에서는 아직도 수난정(輸卵精) 중부(中部)에 머물러 있었다. 3일째가 되면 대조(對照)가 되는 바른쪽 자궁(子宮)에서는 $8{\sim}16$세포기에 드는 배아(胚兒)가 79%에 이르며 24%는 이미 자궁(子宮)에까지 도달하고 있으나 장치를 한 쪽에서는 $8{\sim}16$세포기의 배아(胚兒)가 69%가 되며 겨우 8.2%만이 자궁(子宮)에 이르고 있다. 4일째가 되면 대조자궁(對照子宮)에서는 전체 배아(胚兒)의 75%가 그리고 장치 자궁(子宮)에서는 61%가 상실배(桑實胚)를 이루며 전자(前者)에서 60%, 후자(後者)에서는 40%가 자궁(子宮)내에 진입하게 된다. 정상적(正常的)인 생쥐에서는 임신 4일이 되면 거의가 배낭기(胚囊期)에 이르는 것으로 알려져 있으나 한쪽 자궁(子宮)에 실을 장치한 생쥐에서는 대조자궁(對照子宮)이거나 장치 자궁(子宮)이거나 모두 배낭(胚囊)의 형성(形成)이 늦어지고 있다. 한 자궁(子宮)당 발견되는 정상배(正常胚)의 평균치(平均値)는 대조구(對照區)에서 6.3정도로 임신 2일에서 4일 사이에 큰 차이가 없으나 처리구(處理區)에서는 2일에서 4일 사이에 6.5에서 3.8로 감소한다. 이상배(異常胚)는 대조구(對照區)에서 2일째에 2.2였던 것이 0.4로 크게 줄지만 처리구(處理區)에서는 대조구(對照區)에서 처럼 급격한 감소를 볼 수 없다. 임신한지 17일 되는 날 대조구(對照區)에서 15개의 자궁(子宮)가운데 한지 2개의 자궁(子宮)만이 착상(着床)흔적을 보였지만 처리구(處理區)에서는 전혀 착상(着床)되었던 흔적을 볼 수 없었다. 결국 생쥐에서는 한 쪽 자궁(子宮)에 이물질(異物質)을 삽입했을 때 장치를 받은 자궁(子宮)뿐 아니라 다른 한 쪽 자궁(子宮)에서도 착상(着床)이 일어나지 않을 뿐 아니라 이상난자(異常卵子)의 발생(發生)을 증가시키며 배아(胚兒)의 난할속도(卵割速度)가 늦어지고 또 배아(胚兒)의 이동(移動)이 늦어진다는 것을 알게 되었다.
Han, Gi Yeon;Park, Jae Hong;Oh, Keon Bong;Lee, Sei-Jung
Journal of Life Science
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v.23
no.10
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pp.1223-1229
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2013
Ursolic acid (UA) a bio-active ingredient found in a variety of fruits and vegetables, and it has potent antioxidant activity. However, the role of UA in mouse embryonic stem (ES) cells is poorly understood. This study investigated the functional role of UA in regulating the development of mouse ES cells under hypoxia. Hypoxia did not exert a significant effect on the undifferentiated state of mouse ES cells. However, it induced reactive oxygen species (ROS) generation and increased the level of lactate dehydrogenase (LDH) production at 48 h of hypoxic exposure. Conversely, oxidative stress induced by hypoxia was significantly inhibited by UA ($30{\mu}M$) pretreatment. Hypoxia significantly decreased cell survival and the level of [$^3H$] thymidine incorporation, both of which recovered following pretreatment of UA. In addition, UA decreased the apoptotic effect of hypoxia by attenuating caspase-3 cleavage or by recovering cellular inhibition of the apoptotic protein (cIAP)-2 and Bcl-2 expression. We further found that UA decreased senescence-associated beta-galactosidase activity. We suggest that UA is a natural antioxidant and one of the functional modulators of hypoxia-induced survival, apoptosis, proliferation, and aging in mouse ES cells.
This study investigates the difference of sanghwabyung by adding different ratios of wheat germ. Aw, color value SEM and the sensory characteristics were analyzed and compared by SAS package. Aw of sanghwabyung was decreased with the increment of the additional content of wheat germ. L of sanghwabyung showed the lower values, a increased and b decreased, as the content of wheat germ increased. In the test of sensory characteristics, sanghwabyung with 7% wheat germ had the highest score in crust color, crumb color and wheat germ flavor. In the test of consumers' preference, sanghwabyung with 5% wheat germ had the highest score in odor, taste, and overall acceptability.
포유류 배아의 착상기작을 규명하고자 본 연구에서는 착상시기에 수정된 배아가 착상부위를 어떻게 인식하는 지 그리고 착상부위의 분화유발요인이 무엇인지를 조사하였다. 착상시기(임신 제6일)와 착상후 초기배아 발생기간(임신 제9일)중 혈청내 estradiol (E2)과 Progesterone(P4)의 농도를 측정하였으며, 자궁내막 조직을 착상부위 (antimesome trium)와 비 착상부위(mesometrium)로 분리하여 P4의 수용체 농도를 측정하였다. 혈청내 E2의 농도는 임신 제6일군에서 E2처리군에서 가장 높았으며, 임신 제9일에서는 intact 대조군에서 가장 높고 제9일의 모든 실험군의 농도는 임신 제6일군보다 높았다. 혈청내 P4 농도는 임신 제6일과 9일에서 다같이 대조군에서 가장 높으며 처리군 중에서는 P4처리군에서 높아지고 있다. P4 농도 역시 임신 제9일의 모든 실험군에서 제6일의 실험군보다 높았다. P4수용체 농도는 착상부위가 비 착상부위보다 높으며, 대조군(P < 0.01)과 P처리 군(P < 0.05)에서는 유의한 차이로 비 착상부위보다 높았다. 자궁내막조직 착상을 위한 분화에는 P4의 영향이 크며 P4의 혈청내 농도와 핵의 수용체 농도는 모든 실험군에서 상응하는 관계를 나타내었다. 이 결과는 앞서 일차적으로 발표한 알카리성 phosphatase (ALPase) 활성과도 상응하는 것이다.
A phosphatidylinositol 3-kinase (PI3K) is a upstream component of insulin signaling by which protein synthesis can be stimulated in many systems. To elucidate involvement of PI3K and its downstream mammalian target of rapamycin (mTOR) in the insulin signaling in pleimplantation mouse embryos, 8-cell embryos were cultured to blastocysts in the presence or absence of insulin and/or inhibitor drugs. The number of blastomeres per blastocyst, protein synthesis, and protein phosphorylation were examined. There was significant difference in embryonic development to blastocyst stage and hatching was potentiated by the insulin supplementation. The increase in the mean celt numbers per blastocyst was apparent in the insulin culture. Wortmannin, a PI3K inhibitor and rapamycin, an inhibitor of mTOR abolished the stimulatory effect of insulin on morphological development mitosis and protein synthesis. In autoradiography, phosphoproteins pp22 and pp30 which undergo phosphorylation in response to insulin were identified. Taken together, it can be suggested that PI3K and mTOR engaged in insulin signaling in the mouse embryo 8-cell onward and mediate embryotropic offset of insulin.
Epidermal growth facter(EGF)는 내열성이 강하고 분자량이 6045 dalton인 단쇄상의 polypeptide로써, Cohen에 의해 생쥐의 악하선에서 처음 발견된 이래, 여러학자들에 의해 많은 연구가 되어왔다. 인체의 EGF는 urogastrone이라고도 불리우며, 인체의 소변에서 처음 검출되었고 분자구조 및 생리작용이 생쥐의 EGF와 매우 유사한 것으로 판명되었다. EGF의 자세한 작용기전은 확실히 규명되어있지는 않지만 세포의 증식과 분화를 촉진시키며 위산의 분비를 억제시킨다고 알려져 있다. 또한 EGF receptor는 분자량이 170,000${\sim}$180,000dalton인 세포표면의 polypeptide로써 인체, 쥐, 닭, 소 등의 세포막조직에 특이하게 결합되어 있다. 최근 수년동안 몇몇 학자들에 의해 EGF가 배아와 태아 및 태반의 성장을 촉진시키고 chorionic gonadotrophin과 placental lactogen의 분비를 증진하는데 기여할 것이라고 가정되어 왔다. 그러나 아직까지 배아착상에 대한 EGF의 작용여부에 관해서는 발표된 문헌이 없어 저자는 radioreceptor assay를 이용하여 EGF receptor binding과 토끼의 배아착상과의 관계를 규명하고자 임신경과에 따른 착상부위와 비착상부위의 자궁 및 태아측 태반과 모체측 태반을 분리취득하고 receptor binding assay를 시행하여 다음과 같은 결론을 얻었다. 1. 전임신군과 비임신군의 자궁조직의 membrane fraction으로부터 specific한 EGF receptor binding이 관찰되었다. 2. 착상전 임신 3일에 자궁조직의 EGF receptor수는 4.72 +0.16($10\;mol/{\mu}g$)로 비임신시보다 의의있게 증가되어 있었고(p<0.01), 착상시기인 임신 7일에는 착상된 부위에서 20.33+6.58로 훨씬 더 높은 측정치를 나타내었다(p<0.05). 3. 착상이후 가장 먼저 취득된 임신 14일의 태아측 태반은 모체측 태반의 1.39+0.49에 비해 훨씬 높은 11.94+1.97의 EGF receptor 측정치를 보였다 (p<0.01). 4. 이상의 소견들로 보아 EGF가 토끼의 배아착상에 밀접한 관련이 있을 것으로 추측되며, 이러한 착상전후의 EGF의 작용은 태아측으로부터 일 것으로 예상된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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