Kim, Gi-Yeon;Lee, Jeong-Eun;An, Yeong-Ok;Gwon, Seok-Yun;Lee, Haeng-Sun;Gwak, Sang-Su
한국생물공학회:학술대회논문집
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2000.04a
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pp.65-68
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2000
To understand the antioxidative mechanism in plant cell cultures, we investigated the levels of antioxidant enzymes and low molecular antioxidants in 100 cell lines derived from different plant species. SOD and POD activities in plant cell lines were significantly higher than intact plants. The cell lines from sweet potato (Ipomoea batatas) and cassava (Manihot esculeanta) showed the highest POD and SOD activities, respectively, suggesting that the cell cultures of sweet potato and cassava are good biomaterials for the mass production and molecular study of antioxidant enzymes. The average ascorbate content in plant cell lines was several hundred times lower than intact plants, whereas the glutathione content was 2-3 times higher than plants. Interestingly, the ratio of reduced and oxidized ascorbate and glutathione was different from plant species. In conclusion, the results strongly suggest that plant cell cultures are good biomaterials for the study of antioxidative mechanism and the production of useful components including antioxidants.
This experiment was canted out to obtain embryogenic callus and to understand developmental mechanism of somatic embryogenesis in Oenanthe javanica ($B_{L.}$) DC. experiments included the examination of explant source and media for embryogenic callus production and the observation of developmental pattern of embryogenic cells and non-embryogenic cells. Embryogenic calli were formed on zygotic pro-embryos together with their endosperms when they were cultured on Ms media containing 1.0mg/L 2,4-D. Embryogenic calli were also formed on the intact surface in vitro grown stem or petiole segmentsafrer 6-8 weeks of culture, whereas non-embryogenic calli were formed on cut surfaces of the stem and petiole after 2 weeks of culture. Non-embryogenic calli were rhizogenic in suspension and solid media culture.
본 연구는 돼지의 미성숙란을 체외에서 성숙, 수정시킨 후 생산된 체외수정란을 NCSU23 체외배양액에 sodium pyruvate, hemicalcium lactate 및 glucose를 첨가해 돼지 체외수정란의 체외발육에 미치는 영향을 검토하였다. NCSU23 체외배양액에 Glucose 0 mM, 2.78 mM, 5.56 mM 및 11.12 mM을 처리하여 체외배양한 결과 분할율은 glucose처리구가 무처리구에 비해 통계적으로 유의하게 높은 성적을 나타냈으며(P<0.05), 상실배까지 체외발육률 또한 glucose처리구가 무처리구에 비해 통계적으로 유의하게 높은 성적을 나타냈다 (P<0.05). 한편 배반포까지의 체외발육율은 5.56 mM 처리구가 다른 처리구에 비해 높은 경향을 나타냈지만 통계적 유의성은 인정되지 않았다. Glucose와 0.4mM sodium pyruvate, 2mM hemicalcium lactate 공동배양 처리구와 glucose를 첨가하지 않은 처리구의 분할율은 처리구간 커다란 차이를 나타내지 않았으며, 상실배기 이상 발육된 체외 발육율도 처리구간 커다란 차이를 나타내지 않았다. 또한, 각 처리구간 분할율은 hemicalcium lactate와 glucose공동배양 처리구가 가장 좋은 성적을 나타냈지만 통계적 유의성은 인정되지 않았으며, 상실배기 이상 발육된 체외 발육율은 hemicalcium lactate만 첨가한 처리구가 가장 좋은 성적을 나타냈지만 통계적 유의성은 인정되지 않았다. Sodium pyruvate를 체외수정 후 8시간, 48시간, 96시간, 120시간에 제거하였을 때 분할율은 sodium pyruvate를 제거하는 시기가 늦어질수록 분할율이 향상되는 경향을 나타냈지만 통계적 유의성은 인정되지 않았다. 또한, 상실배기 이상 발육된 체외 발육율은 제거하는 시기가 늦어질수록 체외 발육율이 향상되는 경향을 나타냈지만 통계적 유의성은 인정되지 않았다. 본 연구의 결과 돼지 체외수정란의 체외배양시 glucose의 첨가는 체외발육을 증진시키는 결과가 있었으며, glucose와 sodium pyruvate, hemicalcium lactate 공동배양은 체외배양에 별다른 영향을 미치지 못하는 것으로 나타났다.
We conducted a screening and checked the cultivation methods of lactic acid bacteria, which have anti-atopic dermatitis functions, by determining the lactic acid bacteria's immune enhancement by FACS, and antimicrobial activity against Staphylococcus aureus. The increase of Tcell CD4+/CD25+/foxp3+ was bigger in Lactobacillus plantarum than Lactococcus lactis subsp. lactis (Lc. lactis) and the antimicrobacterial activity against S. aureus was the opposite. The antimicrobial activity of Lb. plantarum culture with medium containing Lc. lactis culture broth was not enhanced, but the antimicrobial activity of Lc. lactis cultured in a medium containing Lb. plantarum culture broth was enhanced. As the optimal method caltivation of Lc. lactis in a medium containing 10% of heat-killed Lb. plantarum culture broth was chosen. By this method, the antibacterial activity of the pure Lc. lactis culture increased sharply at the end of the log phase, while a restraint effect on the growth of S. aureus increased 1.29 times.
Proceedings of the Korean Society of Postharvest Science and Technology of Agricultural Products Conference
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1994.07a
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pp.7-8
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1994
한국산 표고버섯 균사체를 액체배양하여 천연항암물질로 알려진 단백다당체를 추출한 후 그 물질의 특성에 대하여 검토하였다. 균사체의 최적 재양조건을 TGY배지로 조사한 바 온도 $25^{\circ}C$, 배양초기 pH4.0, 교반속도 300rpm, 균사배지 접종량을 10.0%로 하고 산소 통기량을 1.0volume of ait/volume of medium/mimute으로 하였을때 가장 양호한 조건이였으며, 대량생산 하기 위한 SCM배지에서 최적의 C/N비는 13.1오써 7일간 배양하였을때 18.8g/L의 균사령을 얻었으며, 이때 생산수율은 0.46으로 나타났다. 발효가 끝난 배양액에서 균사, 여액 그리고 배양액의 전체에서 단백다당체를 분리한 결과 각 분획에서 단백다당체가 각각 0.55%, 0.12%, 0.69%가 회수되어 배양액 전체에서 단백다당체를 추출하는 것이 바람직하며, 추출방법으로 열수추출, glass bead추출 및 cellulasa처리를 하여 단백다당체의 수율을 비교한 결과 0.25-0.5mm glass nead로 30분간 균사체를 분쇄한 다음 열수추출을 1시간을 하였을때 990mg/100ml의 단백다당체를 얻을 수 있었다. 고단백다당체를 1차 단백질 가수분해 효소로 분해하고, EDAE cellulose 및 Sepadex G-100 column chromatography로 정제한 후, TLC/FLD, ultracentrifugation한 결과 순수한 물질임을 알 수 있었다. 단백다당체의 항암효과 조사중 in vitro배양에서 $P_{388}$과 $L_{1210}$에 대한 단백다당체의 활성단위 1 unit는 1mg정도였으며, 인체의 장암세포인 HCT-48, HRT-18, HT-29 밀 간암세포인 Hep G2 대한 생육저해 단위는 각각 4.4, 3.6, 6.6, 2.6mg이었다. HCT-48과 Hep G2 세포의 크기 분포도는 대조군에 비하여 시간이 경과함에 따라, 그리고 단백다당체의 농도가 증가함에 따라 peak가 작은 size 쪽으로 이동하였다. 또, 단백다당체를 첨가 배양한 HCT-48과 Hep G2세포의 현미경 관찰에서 본래의 암세포 형태가 변형되고 크기가 감소하며 세포사이의 경계막이 흐트러지면서 세포수가 감소하고 사멸하였다. In vivo실험에서는 대조군보다 단백다당체를 첨가한 군에서 항체 형성능력이 대조군에 비하여 형질세포가 2배로 증가하였다. 단백다당체의 화학적 성분 분석에서 다당함량은 46.1%이면 구성다당류는 glucose, galactose, mannose, xylose로 구성되었고 단백질의 함량은 7.28%이며, 구성아미노산은 15종의 아미노산으로 되었다. 또 무기물은 Na, K, Zn, Ca등의 순으로 이루어 짐을 알 수 있었다.
In order to elucidate the effect of acetate ion on the growth of Escherichia coli, flask and fermentor cultures were performed using M9 and LB media. Acetic acid was secreted at a higher rate under the conditions of high glucose concentration as well as of richer medium, i. e., LB broth. The pH in flask culture could not be controlled as i fermentor and pH decreased with the formation of acetic acid. The inhibition effect of acetic acid was pronounced at a lower pH, and the effective inhibitory concentrations of acetic acid were 2.0g/l for LB flask culture, 4.0g/l for M9 flask culture, and 8.0g/l for M9 fermentor culture. Dialysis flask culture was designed to slowly provide E coli cells with glucose. Solid LB agar was layered under LB liquid medium with the variation of agar concentration and solid volume, The increase in the solid portion in the total volume(agar+liquid) resulted in the increase of the final cell concentration. This can be ascribed to the fact that the larger solid phase behaves like a larger reservoir for glucose and controls the growth of E. coli with a controlled rate.
The effects of fermentation conditions and medium compositions on the production of vitamin $B_{12}$ by Propionibacterium shermanii IFO 1239 were studied. Changes from an anaerobic to aerobic condition and a complex to synthetic medium after 48hr resulted in a 100% increase in vitamin $B_{12}$ production compared to an anaerobic culture alone. Glucose, fructose and lactose were found to be equally good as a carbon source for vitamin $B_{12}$ production. Addition of succinate and malate to the synthetic medium with glucose as a carbon source led to an increase in vitamin $B_{12}$ production by 33.6% and 17.2% respectively.
A Saccharomyces cerevisiae isolated from a feed additive yeast product was cultivated in a Korean paper digestion wastewater in order to investigate the possibility of using it as substrate for the yeast. The yeast couldn't grow in the wastewater. It could grow in the wastewater diluted and the optimum dilution rate was 7.5 In batch cultivation with the jar fermenter the maximum total cell count was $1.34{\times}107/mL$ was obtained by the addition of undiluted digestion wastewater. By adding $(NH_4)_2S0_4 and KH_2P0_4$together with the undiluted wastewater the maximum cell concentration could be obtained faster.
This study was conducted to investigate the condition of enhancing glutathione content of yeast. Rhodotorula glutinis in various kind of yeasts produced high content of glutathione and dry cell by cultivating for 48 hours at 30'C and pH 6.0 on reciprocal shaker. In order to enhance the glutathione content, as 0.7% of amino acid was applied into the medium. Glutathione was produced high for 36 hours cultivation. When glutamic acid, cysteine and glycine composing the glutathione were added, glutathione content increased to 219 $\mu\textrm{g}$/ml. However the control showed to 73 $\mu\textrm{g}$/ml.
본연구는 조경소재로 이용가능성이 크지만 현재 자생지가 파괴되어 복원이 요구되고 있는 야생자란의 대량번식을 위해 무균배양시 배지 내 담함량의 변화와 펩톤, 트립톤 등의 첨가가 종자발아와 계대배양 후 유식물의 생육에 미치는 영향을 알아보고자 실시하였다. 배지 내 펩톤과 트립톤의 첨가는 발아에 영향을 주지는 않았지만, 당의 함량은 그 농도가 10g/L까지 증가함에 따라 발아율을 높였다. 또한 발아 후 유식물의 생육시 당의 첨가는 뿌리의 생육을 두드러지게 향상시켰으며, 생체중도 거의 2~3배정도 많았다. 하이포넥스 배지(대조구)에서는 높은 발아율을 보였지만 유식물의 생육은 트립톤 첨가배지(2g/L)에서 많았는데 엽수, 뿌리수, 엽장 근장, 생체중 등이 모두 다른 처리구의 2~3배에 이르는 초기생육을 보였다. 계대배양 이후의 생육상은 펩톤 첨가배지에서 가장 많은 생육량을 보였는데 특히 엽장과 엽폭 그리고 근장이 다른 처리구보다 월등히 높은 경향을 나타냈다. 생체중도 한 개체당 0.18g으로 가장 높게 나타나 펩톤의 첨가가 계대배양 이후의 생육을 크게 촉지시키는 것으로 나타났다. 결론적으로 하이포넥스 배지에 트립톤 2g/L를 첨가하였을 때 발아율과 유식물의 생육이 다른 배지에 대해 매우 양호한 것으로 나타나 자생 자란의 종자발아용 배지로 가장 적당한 것으로 사료된다. 그리고 이후 계대배양시에는 펩톤의 첨가 (3g/L)가 유식물의 생육을 가장 촉진시키는 것으로 나타났다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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