• Korean Journal of Animal Reproduction
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• v.13 no.2
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• pp.79-84
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• 1989

This study was carried out to investigate the effect of LH-RH and Gn-RH treatment in Holstein cows with ovarian quiescence and follicular cystic ovaries. The cows with ovarian quiescence and follicular cystic ovaries injected intramuscularly with 100$\mu\textrm{g}$, 200$\mu\textrm{g}$ and 400$\mu\textrm{g}$ of LH-RH and 200$\mu\textrm{g}$ and 400$\mu\textrm{g}$ of Gn-RH respectively. The cows was diagnosed by repeated rectal palpation. The plasma progesterone and estradiol-17$\beta$ concentrations were assayed by radioimmunoassay methods. The resutls of this study were summarized as follows : 1. Ovulations were induced after treatment of LH-RH and Gn-RH. The concentrations of progesterone reached small peak level at luteal phase and estradiol-17$\beta$ reached obvious peak level with the development and maturation of the follicle during the periods of degeneration of the corpus luteum, and normal ovarian cycle activity started subsequently. 2. The cows with ovarian quiescence and follicular cystic ovaries were induced ovulation at 38.9$\pm$5.3 hrs. after treatment of LH-RH in 66.7% cows and at 52.7$\pm$7.9 hrs after treatment of Gn-RH in 60.0% cows respectively. 3. The good ovarian responses were indicated in treatment with 200$\mu\textrm{g}$ to 400$\mu\textrm{g}$ of LH-RH than those treated with 100$\mu\textrm{g}$ in cows with ovarian quiescence, and did not show difference of ovarian responses between treatments with 200$\mu\textrm{g}$ to 400$\mu\textrm{g}$ of Gn-RH in cows with follicular cystic ovaries.

• Korean Journal of Animal Reproduction
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• v.18 no.2
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• pp.101-104
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• 1994

The purpose of the present study was to examine the in vivo activity of oxytocin antagonist I (AI)in the nonpregnant estrous rat. Cannulas were placed in the jugular vein for infusing compounds and a water-filled balloon-tipped cannula placed in one uterine horn for assessing uterine activity. Uterine contractions were monitored with a Grass Polygraph and contractile activity determined as the integrated area for 10 minutes. Five minutes after infusing 5 ${\mu}\textrm{g}$ of AI, 100mU of oxytocin was given as an in bolus injection and repeated every hour for 5 hours. At five minutes, 1 and 2 hours after injection AI the uterine contractile response to 100 mU of oxytocin was significantly inhibited compared to controls(p<0.05). At 3, 4 and 5 hours no differences in response were detected compared to controls(p>0.05). These results in conjunction with other reports from our laboratory suggest that AI has the potential of being a potent and specific tocolytic for prevention of preterm labor in humans.

• Korean Journal of Animal Reproduction
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• v.18 no.2
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• pp.95-99
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• 1994

The purpose of the present study was to determine the in vivo effect of oxytocin antagonist-I(Al) on uterine oxytocin receptor number (Rn) and/or binding affinity (Kd) in the estrous rat. Anesthetized rats were given a bolus infusion of control or 5${\mu}\textrm{g}$ of AI and sacri-ficed 0.5 and 4 hours later. The uterine tissue was removed, trimmed and frozen. Membrane oxytocin receptors were isolated after homogenization of uterine tissue and differential ultracentrifugation. The oxytocin receptor assay was performed by saturation with cold oxytocin competion with a high specific activity oxytocin antagonist. Rn and Kds were determined by nonlinear curve fitting methods. No differences(p>0.05) between the AI and control treated animals in either oxytocin receptor number or binding affinity was detected in this study. These data suggest that the major mode of action of AI is via competitive inhibition at the uterine oxytocin receptor and not by altering receptor number or binding affinity.

• Proceedings of the KSAR Conference
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• 2003.06a
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• pp.88-88
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• 2003

본 연구는 배란후 48시간째 회수된 난소로부터 황체세포를 체외배양 후 progesterone 분비에 대한 LH, IGF-1 및 TGF$\beta$첨가효과에 대해 검토하였다. 축산기술연구소에서 사육중인 돼지(체중 145$\pm$kg) 12두로부터 발정을 유도시켜 배란후 약 48시간째 도축하여 난소를 회수하였다. 회수된 난소로부터 황체를 분리하여 세절한 후 0.25% collagenase용액(0.025mg DNase, 50mM EDTA, 50mM Dithiothreitol)으로 37$^{\circ}C$의 진탕수조에서 30분간 배양하여 황체세포를 분리 회수하였다. 회수된 황체세포는 D-MEM 용액(GIBCO, 10% FCS와 antibiotics 첨가)으로 2회 세정하여 1$\times$$10^{6}$live cell/$m\ell$이 되도록 희석한 후 24 well culture plate(Coming, New Tork 14831)에 분주하여 $CO_2$ 배양기($CO_2$: 5%)에서 12시간 간격으로 배양액을 회수하였으며 48시간까지 배양하였다. 배양액 1$m\ell$당 LH, IGF-I 및 TGF$\beta$1을 단독 혹은 공배양하여 회수된 배양액내의 progesterone 농도를 RIA법으로 분석하였다. 돼지황체세포는 배양후 24시간째에 높은 농도의 progesterone이 측정되었으며 LH를 첨가한 대조구에 비해 유의적으로 높은 progesterone이 측정되었다. 또한 IGF-1 과 TGF$\beta$1을 첨가한 군에서도 높은 농도의 progesterone이 측정되었다 그러나 TGF$\beta$ 혹은 IGF-I 단독으로는 대조구의 결과와 큰 차이가 없었다 따라서 돼지 황체세포에서의 progesterone 분비는 TGF$\beta$ 및 IGF-I 그리고 LH의 황체세포의 progesterone 분비기능을 촉진하는 것으로 나타났다.

• Proceedings of the KSAR Conference
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• 2003.06a
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• pp.68-68
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• 2003

오늘날 형질전환동물의 생산과 같은 생명공학기술의 발달로 인하여 우리나라 재래산양은 그 모델동물로서 번식 생리학적으로 매우 중요한 가치를 지니고 있을 뿐만 아니라 고유의 유전자원 보존 측면에서도 산양복제와 같은 다양한 연구가 절실히 요구된다. 따라서 본 연구에서는 이러한 생명공학기술의 기초자료를 제공하고자 난포란의 활성화 방법과 단위발생란의 체외발달율을 조사하였다. 성숙한 미경산 재래산양을 공시동물로 하여 CIDR를 이용하여 발정동기화를 시켰으며, 과배란 처리는 FSH와 hCG를 이용하여 과배란 처리를 실시하였고 난포란의 회수는 외과적 방법으로 개복하여 난소의 난포로부터 난자와 난포액을 흡입하여 회수하였다 난포란의 활성화 처리는 전기자극법과 약물처리 방법을 사용하였으며, 전기자극방법은 DC 2.36㎸/cm, 17$\mu$sec 전압으로 1회 전기자극을 가하여 활성화를 유도하였으며, 약물처리법은 5$\mu\textrm{g}$/$m\ell$의 ionomycin 용액에서 5min, 1.9mM 6-DMAP용액에서 4시간동안 처리하여 활성화를 유도하였다. 단위발생란의 배양은 10% GS(goat serum)가 첨가된 M16 배양액과 10% FBS가 첨가된 TCM-199 배양액에서 난관상피세포와 6~7일동안 공배양을 실시하면서 체외발달율을 조사하였다. 활성화 방법에 따른 체외발달율은 전기자극 및 약물처리를 하였을때 분할율은 3.1% 및 67.9%였으며, 상실배 및 배반포로의 발달율은 0% 및 7.9%였다. 단위발생란의 체외 발달율은 10% GS가 첨가된 M16 배양액을 사용하였을 때 분할율은 68.0%였으며, 이중 12.0%가 상실배 또는 배반포로 발달하였다. 뿐만 아니라 10% FBS가 첨가된 TCM-199 배양액에 난관상피세포와 공배양을 실시하였을 경우는 72.0%가 분할하였으며, 이중 16.7%가 상실배 또는 배반포로 발달하였다. 이상의 결과로 볼 때 활성화 처리는 ionomycin과 6-DMAP 용액처리가 적합하며, 단위발생란의 체외배양은 보다 적합한 배양조건의 확립이 필요한 것으로 생각된다.

• Reproductive and Developmental Biology
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• v.35 no.3
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• pp.395-398
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• 2011

The objective of this study was to compare the accuracy analysis and the effect of field application of a newly developed automatic heat detector in dairy cows. From 2009 to 2010, we used 48 Holstein cows (mounting cows : 38 heads, standing cows : 10 heads) raised in experimental barn of National Livestock Research Institute (RDA) for the accuracy analysis of automatic heat detector, and 14 Holstein cows raised in three commercial dairy farms of Cheonan and Pochun area for comparison of the effect of field application. The accuracy of response in cows attached with automatic heat detector was 86.8% (33/38) displayed on board when mounting activity observed, and 100% (10/10) when standing activity observed, and on average, 90.0% (43/48) displayed on board. The accuracy of automatic heat detector in on-farm test was 85.7% (12/14), and conception rate was 75.0% (9/12).

• Proceedings of the KSAR Conference
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• 2001.03a
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• pp.81-81
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• 2001

최근 적절한 사양관리를 위해서 유중 요소태질소 수준(MUN)과 유단백을 이용하여 사료 내 에너지와 단백질의 균형을 평가하는 지표로 활용하고 있으며 요소태질소 수준이 정상보다 크게 높거나 낮았을 때 번식능력이 저하되기 때문에 번식효율의 지표로서 활용되고 있다. 따라서 본 연구에서는 우유내 요소태질소 수준이 번식장애에 미치는 영향을 조사하여 요소태질소 수준을 번식장애의 진단지표로 활용하고자 실시하였다. 본 실험에 공시된 우유시료는 경기도 안성시와 이천시에 소재한 낙농목장에서 사육중인 조사두수를 대상으로 개체당 약 30~50$m\ell$의 우유를 채유하고 냉장보관하여 실험실로 운반하였다. 우유의 분석은 유성분분석기(Fosscomb : 4000, Fossmatic 5000, Denmark)를 이용하여 우유의 일반성분인 유지방, 유당, 유단백, 무지고형분, 총고형분, 빙점, 유중요소태질소, 구연산과 체세포를 동시에 분석하였다. 번식장애우의 진단은 낙농가가 번식장애우로 분류한 개체를 대상으로 직장검사 및 초음파 진단기를 이용하여 진단하였다. MUN준에 따른 공태일수의 조사 결과 MUN수준이 7이하 군의 공태일수가 88.98$\pm$120.68로 7-16의 92.20$\pm$105.39와 16이상의 94.42$\pm$87.51보다 다소 낮은 결과를 나타냈다. 또한 번식장애우의 발생빈도와 유성분 분석결과를 살펴보면 낙농가가 번식장애우로 분류한 68두를 진단한 결과 발정발견을 하지 못하여 번식장애우로 분류된 두수가 30두(44.1%)와 비정상두수 38두(55.9%)로 나타났으며 비정상 두수 중 난포난종이 19두(27.9%)로 영구항체6두(8.8%), 자궁내막염(10.3%), 자궁축농증 6두(8.8%)보다 많은 것으로 나타났다. 번식장애우의 유성분 분석결과 자궁축농증이 있는 개체의 유단백 평균이 3.43$\pm$0.35로 다른군에 비해 높았으며 영구항체가 있는 개체군의 MUN수준이 7.73$\pm$8.58로 다른군의 10.84$\pm$4.92, 10.89$\pm$7.38와 10.61$\pm$5.52에 비해 낮게 나타났다.

• Proceedings of the KSAR Conference
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• 2001.03a
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• pp.65-65
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• 2001

본 연구는 칡소 귀세포를 공여핵으로 이용한 체세포 복제송아지 생산에 있어서 배양방법이 배발생 및 배반포 발달율에 미치는 영향과 체세포 복제란의 이식후 수태율에 미치는 영향을조사하여 복제송아지의 생산 효율을 제고하고자 실시하였다. 실험에 공시된 공여핵은 칡소 의 귀세포를 회수하여 10%FBS가 첨가된 DMEM배지에서 3-4일 동안 배양하여 monolayar Confluent 형성 후 0.25% trypsin을 처리하여 준비하였으며 공여세포는 적어도 passage가 5회 이상의 세포만을 사용하였다. 복제수정란의 생산은 18-20시간 동안 체외성숙 된 난자의 핵을 제거하고 공여핵을 주입하여 2.2kv/cm, 10$\mu\textrm{s}$의 전압으로 2회 자극함으로 융합하였으며, 융합된 난자는 5$\mu\textrm{g}$/$m\ell$ ionomycin에서 4분간, 1.9mM 6-dimethyl aminopurine에서 4시간동안 배양하여 활성화처리를 하였다. 핵이식수정란의 배양은 39$^{\circ}C$, 5%$CO_2$ incubator에서 처리구 I은 CRlaa에서 4일간 배양 후 CR2aa배지에서 배양, 처리구II는 CRlaa에 4일간 배양후 CR2aa배지에 cumulus cell과 공배양, 처리구III은 CR2aa 배지에 camulus cell과 함께 배양하였다. 수정란이식은 발정발현 7일째에 비외과적 방법으로 젖소 미경산우에 이식하였으며 이식란수는 2~4개의 핵이식된 수정란을 이식하였다. 임신진단은 45~60일 사이에 직장검사 및 초음파 진단기를 이용하여 실시하였다. 배양방법에 따른 배발생율은 처리구 I에서 92.2 %(83/90)으로 처리구II와 III의 62.4%(63/101)와 77.8%(144/185)에 비하여 높게 나타났으나 배반포 발달율은 처리구II와III에서 65.1%(41/63)와 50.0%(72/144)로 처리구 I의 30.1%(25/83)보다 높게 나타났다. 각 처리구에 따른 수정란 이식후 수태율은 처리구II와 III에서 공히 20%의 수태율을 나타낸 반면 처리구 I에서는 수태가 되지 않았다. 따라서 체세포 복제수정란의 생산에 있어서 배반포 발달율과 수태율을 높이기 위해서는 단순배양보다 공배양이 더 효과적인 것으로 사료되지만 이런 결과가 복제송아지 생산효율에 있어서도 효과적일지는 향후 더 많은 연구가 있어야 할 것으로 사료된다.

• Reproductive and Developmental Biology
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• v.37 no.1
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• pp.29-33
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• 2013

The objective of this work was to analyze the concentrations of progesterone (P4) and estrogen (E2) hormones changed during estrus synchronization in dairy heifers. Estrus synchronization was carried out with CIDR$^{(R)}$ (Controlled Intravaginal Drug Release) devices. Corpus luteum (CL) was classified into three grades based on its size and palpable characteristics. The concentrations of P4 and E2 were measured by enzyme-amplified chemiluminescence. Serum P4 concentration was markedly low at the estrus stage (36 hrs after removal of CIDR) compared to other stages, while E2 concentration was kept high during estrus stage. The serum P4 concentration was highest in the CL classified into grade I. These results indicate that P4 concentration could be used as a criteria for determining recipients for artificial insemination or embryo transfer in dairy cattle.

• Korean Journal of Veterinary Research
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• v.30 no.3
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• pp.349-354
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• 1990

The effects of $PGF2{\alpha}$ on the conception rate and the plasma levels of estradiol-$17{\beta}$ and progesterone of anestrus Cheju mares were investigated at the breeding and non-breeding seasons. The results obtained from this studies are as follows; 1. The durations of the estrus and diestrus after $PGF_2{\alpha}$ treatment persisted shorter than control cycle (p<0.05), but ovulation time was fast. 2. The levels of estradiol-$17{\beta}$ and progesteron before $PGF_2{\alpha}$ treatment showed 103.8pg/ml, 8.0ng/ml in breeding season and 72.8pg/ml, 4.7ng/ml in non-breeding season, respectively. 3. The levels of estradiol-$17{\beta}$ rose to 115.4~154.0pg/ml, and 90.8~27.0pg/ml from 2nd to 6th day after the treatment of $PGF_2{\alpha}$, in breeding and non-breeding seasons, respectively, while progesterone level dropped to 1ng/ml with the sign of estrus and at 8th day rose in breeding season (p<0.05). 4. Of thirty anestrus mares investigated for $PGF_2{\alpha}$ administration, 87.5% showed estrus on an average of 3.8 days after treatment and the conception rate was 62.5% in breeding season, but the estrus and conception rates dropped 40% and 20% in non-breeding season, respectively.