This study was conducted to investigate the developmental potential of cloned embryos derived from bovine fetal fibroblast cells, and the effect of quiescent treatment, passage number and origin of donor cells on in vitro development of cloned embryos. Fetal skin and liver-derived fibroblast cells were transferred to enucleated oocytes after serum starvation or nontreatment (cycling). After electrofusion. reconstituted embryos were activated with $Ca^{++}$-ionophore and cycloheximide, and cocultured for 7~9 days with BRL cells. Some blastocysts were transferred to recipient cows 7~8 days post estrus. The development rate to the blastocyst stage of serum starved cell-derived embryos was higher (25.3%) than that of actively dividing cells-derived embryos (15.9%), The rates of blastocyst formation were 23.1~25.0% after transfer of cell passaged 4 to 6 times, and 23.8 and 25.2% after transfer of fetal skin and liver cells, respectively. After embryo transfer, 34.4% and 15.6% of recipient cows were pregnant on Day 60 and 120, respectively, and one male calf was produced from skin-derived vitrified blastocyst. The result of this study showed that the development of cloned embryos. was enhanced by quiescent treatment, but did not different among the cells passaged 4 to 6 times, and between skin and liver cells. This result also confirms that offspring can be obtained from the vitrified clone embryo derived from fetal skin cell.
Development and reproduction of the cotton caterpillar, Palpita indica, were investigatedunder different temperatures (15 .O, 17.5, 20.0, 22.5, 25 .O, 27.5, 30.0, 32.5, and 35 .O$^{\circ}$C). Duration fromegg to pre-adult of the cotton caterpillar were ranged from 68.6 days at 175$^{\circ}$C to 19.7 days at 35.0% (3.5times shorter growth period compared with that at 17S$^{\circ}$C). At 15.0$^{\circ}$C, cotton caterpillar eggs developedto the last larval instar but were not able to go through the pupal stage. The lower developmentalthreshold temperatures and degree-days of egg, larva, pupa, and complete development were 13.4, 10.6,11.6, and 11.5"C and 55.3,251.5, 138.3, and 479.8 degree days, respectively. The hatching, pupation andemergence rates were higher at 25.0eC and 27.5"C compared with other temperatures. The survival ratefrom the hatched larva to adult was the highest at 27.5"C. The preoviposition and the adult longevity were11.5 and 30.6 days at 17.5"C and 1.5 and 9.2 days at 35.0$^{\circ}$C, respectively. The mean fecundity perfemales was greater at 25.0$^{\circ}$C and 27.5"C compared with other temperatures. Mean generation time indays (T) was shorter on higher temperature. Net reproductive rate per generation (R,) was the lowest atthe highest temperature as well as at the lowest, and it was 199.1 which was the highest at 27.5"C. Theintrinsic rate of natural increase (r,) was highest at 30.0$^{\circ}$C as 0.148. As a result, optimum ranges oftemperature for P. indica growth were between 25.0-32.5"C .emperature for P. indica growth were between 25.0-32.5"C .t;C .
The embryos formed from anther culture of peony exhibited divergent morphologies. The frequency of normal embryos with two cotyledons was about two times higher in the embryos formed through direct embryogenesis than those formed from callus. About 69% of the embryos with two cotyledons converted into normal plants, but convention rate of the abnormal embryos with one and three or four cotyledons was only 4 to 9%. The embryos of hem and bowling pin shape did not undergo development into normal plants.
This study was conducted to investigate the effects of equilibration and dilution methods on the survival rate of vitrified IVM-IVF bovine blastocysts. Vitrification solution was composed with 20% glycerol, 20% ethylene glycol, 3/8 M sucrose and 3/8 M dextrose in D-PBS supplemented with 20% FBS (GESD). Embryos were equilibrated in 1 of 3 methods: 3-step (El), 2-step (E2), or 1-step (E3), and after loading into 0.25-ml straws, were plunged into liquid nitrogen. After warming in water bath at 2$0^{\circ}C$, cryoprotectants were diluted in 1 of 3 methods: 1) D1(VS+1/2 M sucrose, 1/2 M sucrose and l/4 M sucrose), 2) D2 (1/2 M sucrose and 1/4 M sucrose), or 3) D3(1/2 M sucrose only). All procedures except warming were conducted at room temperature. Survival and hatching rates of blastocysts and expanded blastocysts following equilibration methods were 50 and 83.6%, and 27.8 and 67.3%, respectively in El, which were significantly higher (P〈0.01) than those of E2 (16.7 and 23.2%, and 7.4 and 12.5%, respectively) and 23 (0 and 3.7%, and 0 and 0%, respectively). Survival and hatching rates of expanded blastocysts were significantly (P〈0.01) higher than those of blastocysts in El. Survival rates of blastocysts and expanded blastocysts following dilution methods were 52% and 80.6% in D2, which were significantly higher (P〈0.05) than those of D1 (29.6 and 48.3%) and D3 (47.2 and 63.8%). Hatching rates of blastocysts were similar in D1, D2 and D3, however in expanded blastocysts, that of D2(61.3%) was significantly higher (P〈0.01) than that of D1(34.5%). Survival rates of expanded blastocysts in D1 and D2, and hatching rates in D2 and D3 were significantly higher(P〈0.01) than those of blastocysts. These results indicate that the viability of vitrified blastocysts was improved by the several steps of equilibration, and by 2-steps dilution after warming, independently of their stage of development. The results also indicated that the expanded blastocysts are more profitable to vitrification than blastocysts.
Kim, Sihyeon;Kim, Jong Cheol;Lee, Se Jin;Kim, Jae Su
Korean journal of applied entomology
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v.55
no.4
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pp.421-429
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2016
Tenebrio molitor larvae contain large amounts of proteins, lipids and other functional materials, enabling this insect to be used as an edible food source in animal feeds and for industrialization. Although many efforts have been made to set up mass rearing systems, few studies have been conducted to establish optimal rearing conditions for the production of high quality T. molitor larvae. Herein we investigated 1) the effects of additional diets on the survival and fecundity of the insect, 2) the relationship between oviposition period and the uniformity of larval size, 3) the effects of rearing density and temperature on insect development, and 4) the storage stability of eggs and pupae at low temperatures given possible temporary production discontinuation. The addition of carrot and zucchini to the traditional wheat bran diet significantly increased the survival and fecundity rate of adult T. molitor. Of the three different oviposition sampling periods (3, 7, and 14 days) used to investigate the uniformity of the hatched larvae in each treatment, the period of 3 and 7 days provided higher uniformity than the 14 days oviposition period. Larval development was faster at $30^{\circ}C$ than at 20, 25, and $35^{\circ}C$. Interestingly, oviposition rates were highest at $20^{\circ}C$ but showed much slower larval development and lower uniformity at $30^{\circ}C$. Regarding the effect of larval rearing densities (1, 10, 20, 30, 40, and 50 larvae per 90 mm diam. dish), larval weight was significantly reduced at higher rearing densities, but larval longevity and length were not influenced by rearing density. The 30 larvae/dish is suggested to be a reasonable density to be applied to mass production systems. When kept at $4^{\circ}C$, T. molitor eggs showed a significant reduction in hatching rate; however, when stored under the same conditions, pupae emergence rates remained high until 10 weeks, suggesting that storage at low temperatures is more suitable for the pupal stage than the egg stage. Our findings suggest that an increase in T. molitor adult survival and fecundity rates and a uniformity of hatched larval development can be achieved with the following recommendations: a combination diet (including wheat bran), a 7-day oviposition period; a larvae-rearing temperature of $30^{\circ}C$, a rearing density of 30 larvae/dish, and the storage of pupal stages at low temperatures in the case of rearing discontinuation. This study serves as a strong foundation for the successful mass production of high quality T. molitor larvae.
This study was conducted to determine the effect of temperatures on the egg and nymphal development, adult longevity and oviposition of bean bug, Riptortus clavatus Thunberg, using Saealkong seed as food sources in fibrous nylon-tube at four different temperatures (20, 24, 28 and $32^{\circ}C$). Hatchability showed the highest value of 100% at $28^{\circ}C$ and decreased with increasing temperature. Egg duration ranged from 7 days at $32^{\circ}$ to 16.7 days at $20^{\circ}C$. Instar duration was longer with increasing instar stage. Nymphal duration was 38 days at $20^{\circ}C$, 30 days at $24^{\circ}C$, 23 days at $28^{\circ}C$, and 18 days at $32^{\circ}C$ Emergence rates to adult were 16, 41, 72 and 68% at 20, 24, 28 and $32^{\circ}C$, respectively. Female adult longelity ranged from a minimum 20 days at $20^{\circ}C$ to a maximum 63 days at $28^{\circ}C$, while the longevity of male ranged from 19 days at $20^{\circ}C$ to 60 days at $28^{\circ}C$. Preoviposition duration was shorter with increasing temperature and ranged from 11 days at $20^{\circ}C$ to 5 days at $32^{\circ}C$. Total number of eggs laid per female ranged from a minimum 21 eggs at $20^{\circ}C$ to a maximum 67 eggs at $28^{\circ}C$. Consequently, the estimated lower threshold tempeatures of each developmental stage were $10.3^{\circ}C$ for egg, and 9.3, 12.7, 10.0, 11.0 and 8.7 for the 1st, 2nd, 3rd, 4th and 5th instar, respectively.
For the two-dimensional observation on the growth and development of CLonorchis sinensis, an image analysis system (IBAS 2000, Kontron, Germany) was used in this study. On 3, 6, 9, 12, 15, 21, 30 and 90 days of infection, 474 worms were collected from rats infected with 50 metacercariae each. The overall recovery rate was 31.6%. The worms grew rapidly in their length and width up to 30 days of infection and then, did slowly to 90 days of infection. However, the growth pattern of body area was not similar to that of body length and width, because the body area increased continuously even after 30 days of infection. With the image analysis system, the sizes of irregular-shaped genital organs were measured easily, which showed sigmoidal growth patterns . The growth rate of genital organs increased rapidly. until 21 days of infection when the uterus was filled with numerous eggs, and then gradually slowed down to 90 days. There was no difference in growth pattern between the anterior and posterior testis. The seminal receptacle , however, showed an abrupt increase in size between 15 to 21 days of infection when it was filled with condensed semen. Therefore, the growth pattern of seminal receptacle might be used as another criteria to estimate the extent of sexual maturation of C. sinensis. From this study, it is suggested that image analysis system is very useful to reveal the growth and development pattern of C. sinensis, especially of their internal organs.
Development and reproduction of Dichromothrips smithi were investigated under different temperatures, Durations of the development from egg to pre-adult of D. smithi were measured under 11 temperature ranges and it was 44.0 days at 13$^{\circ}C$ and 8.7 days at 32$^{\circ}C$. Developmental zero point and total effective temperature for the development of egg and larva, prepupa, pupa and for the complete development (egg to emergence) were 9.4, 8.9, 10.5, 10.8 and 9.5$^{\circ}C$, and 46.1, 90.1, 23.9, 41.2 and 204.4 degree days, respectively. The adult longevity was 28.3 days at 15 C and 14.3 days at 30$^{\circ}C$. The highest average fecundity per female was 69.3 at 25 C. The highest intrinsic rate of natural increase (r$\_$m/) and the highest net reproduction rate (R$\_$o/) were 0.241 at 30$^{\circ}C$ and 56.56 at 25$^{\circ}C$. The optimum temperature range for the growth of D. smithi was between 25$^{\circ}C$ and 30$^{\circ}C$.
Effects of temperature on the development and reproduction of the Udea ferrugalis Hubner were investigated at various temperatures (10, 15, 18, 20, 23, 25, 27, 30$\^{C}$). The development times of eggs, larvae, prepupae and pupae were shorter in higher temperatures than in lower ones. Egg and pupa did not develop at 10$\^{C}$. The lower developmental threshold temperatures for eggs, larvae, pupae were 9.5, 9.6 and 11.9$\^{C}$, respectively, and their thermal requirements for development completion were 87.9, 200.9 and 119.7 degree-days at the same temperature, respectively. Adult longevity was 25.2 days at 15$\^{C}$, 7.3 at 23$\^{C}$ and 5.3 at 30$\^{C}$. Mean fecundity per female was higher at 20-23$\^{C}$ compared to other temperatures. Mean generation time in days (T) was shorter in higher temperature region. Net reproductive rate per generation (Ro) was lowest at 15$\^{C}$ (138.2) and it was highest at 20$\^{C}$ (265.4). The intrinsic rate of natural increase (r$\_$m/) was highest at 25$\^{C}$ as 0.247. As a result, it was considered that optimum range of temperature for U. ferrugalis growth was 20.0 to 23$\^{C}$.
Park, Jiyeong;Lee, Sanghoon;Lee, Hanwoong;Kim, Yonggyun
Korean journal of applied entomology
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v.52
no.3
/
pp.227-237
/
2013
The black soldier fly (BSF), Hermetia illucens, is a generalist detritivore that is usually exploited for recycling environmental wastes, including food remnants. These insects can also be used to produce antibiotics for medical applications. For this purpose, flies need to be mass-reared using an automatic rearing system that generates various sounds. Insects use sound as a means of communication for mating or warning against predators. Thus, extrinsic sounds may interrupt the normal physiological processes of insects. In this study, we analyzed the physiological changes due to various sound treatments at $25^{\circ}C$ and 8:16 h (L:D) photoperiod. At 95 dB, larvae were exposed to different sound frequencies (0-5,000 Hz). The treated larvae were adversely affected by the high-frequency sounds and showed significant reduction in pupation and adult emergence. Different sound intensities (0-105 dB) at 5,000 Hz caused significant changes in the pupation and survival of the adults at 85 dB or above. Under a stress sound condition (5,000 Hz, 95 dB), the BSF larvae exhibited aberrations in the expression of genes related to the immune system and digestion. These results indicate that high-frequency sound treatments at or above 85 dB act as a stress sound to BSF development.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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