• Title/Summary/Keyword: 발색 반응

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신항생물질 개발에 관한 연구

  • 구양모;이창훈;주정호;김범태;최웅칠
    • 한국응용약물학회:학술대회논문집
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    • 한국응용약물학회 1993년도 제2회 신약개발 연구발표회 초록집
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    • pp.60-60
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    • 1993
  • 새로운 항생물질을 개발하기 위하여 토양으로부터 분리한 균주를 액체배지에서 배양하여 그 배양액을 여러 검정균에 대하여 종이디스크법으로 항균효력을 측정하였다. 그 결과 G(+), G(-)균에 강한 항균효력을 보인 토양균 SNUS 9101-55와 C. aibicans와 같은 진균류에 항균력을 보인 토양균 SN-US 9101-68을 선택하여 각각의 배양액에서 항생물질을 분리하고, 분리한 항생물질의 구조를 규명하고자 하였다. 토양균 SNUS 9101-55의 배양액으로부터 항생물질을 분리하기 위하여 양이온 교환수지 관 크로마토그래피와 셀룰로오스 관 크로마토그래피를 수행하여 시료 AMJ-I-212-B를 얻었다. 시료 AMJ-I-212-B의 IR, $^1$H-NMR, FAB-MS 스펙트럼을 얻어 분리한 항생물질의 구조를 분석하고 Sakaguchi test와 같은 정색반응을 통하여 그 발색단을 동정하여 이 항생물질의 구조가 스트렙토마이신과 동일하다는 것을 확인하였다.

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배추흰나비 (Pieris rapae L. ) 의$\beta-N-Acetylglucosaminidase$의 특성과 기능 (Propeties and Functions of $\betaN-Acetylglucosaminidase$ from Cabbage Whitebutterfly, Pieris rapae L.)

  • 윤치영;한원동김학열
    • 한국동물학회지
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    • 제36권1호
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    • pp.123-132
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    • 1993
  • 곤충의 탈피작용에서 일어나는 키틴 분해대사를 구명하기 위한 목적으로 배추흰나비 (Pieris rupae L.)에서 3종의 서N-acetylglucosaminldase(El, Ell, Elll)를 분리, 정제하였다. Polvacrylamide gel 상에서 이들 효소의 활성은 기질과 triphenvltetrazolium chloride와의 반응 결과 생기는 발색정도로 확인하였다. 각각의 분자량은 76,000, 55,000, 35,000 da, pl 값은 모두 5.8이었으며 후p$\beta$GlcNAc와 각p$\beta$GaINAc에 대해서 다같이 기질특이성을 나타내었다. 또한 El과 Elll는 탈피 시기와 일치하는 전용 말기에 최대 활성을 나타내었으며 Ell는 용화 직후에 최대 활성을 나타내었다.

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Cyanine 및 Merocyanine색소의 분광특성 및 광전특성(2)

  • 손세모;권태선;김성훈
    • 한국인쇄학회:학술대회논문집
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    • 한국인쇄학회 1995년도 학술발표회 논문초록집
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    • pp.13-17
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    • 1995
  • 헤테로원자(X=O, S, Se)의 변환에 따라 용액상에서 Merocyanine색소 및 Cyanine색소의 헤테로원자X는 p궤도의 원자보다 d궤도의 원자가 공명에 관여하여 공역계확장에 기여하였고, 유전률이 큰 용매 일수륵 Merocyanine색소는 장파장으로 흡수극대치가 이동하였다. 또 Cyanine색소의 기저상태는 $I^-$이온과 정전하 발색단을 가진 이온성 화합물로 되어 있으므로 극성용매에서 $I^-$ 이온의 전하가 색소본체로 전하 이동전이가 발생하여 단파장화 하였다. 고상에서 색소의 농도가 높을 수록 색소분자간의 거리가 가까워져 색소 상호작용이 변화하여 흡수스펙트럼에서는 전체적으로 폭이 넓은 형태로 나타났으며 이것은 농도가 높을 수록 색소분자간의 거리가 가까워져 색소 상호작용이 변화한 때문이라고 생각된다. 또한 3차원 형광의 저농도에서 보이지 않는 새로운 스펙트럼이 Cyanine색소에서 나타났으며 이 스펙트럼은 색소고유의 흡수에 기인한 것으로 Eximer형광으로 생각된다. 광전특성에 있어서는 Merocyanine색소가 Cyanine색소보다 활성화에너지가 낮아 전하이동도가 커짐에 따라 높은 광전특성을 나타내었다. 그리고 Merocyanine색소 헤테로원자(X)의 비교에서 광전특성은 O

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공진반사광 바이오센서를 이용한 심근경색 마커 감지 기술

  • 허철;김봉규;김완중;홍종철;아칠성;김상협;성건용
    • 한국진공학회:학술대회논문집
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    • 한국진공학회 2014년도 제46회 동계 정기학술대회 초록집
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    • pp.127-127
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    • 2014
  • 인체 내 소량의 생체성분(혈액, 소변 등)을 감지하는 바이오센서 기술은 질병 진단뿐만 아니라 예방 및 관리로 의료서비스 확대, 개인 맞춤형 진료 및 의료비 감소 효과를 가져올 수 있는 기술이다. 광바이오센서는 광학적인 측정방법을 이용하여 다양한 생화학물질들의 상호 반응을 검출해 낼 수 있는 바이오센서로 현재 활발하게 연구가 진행되고 있다. 광 바이오센서는 생체성분 내에 존재하는 전하를 가진 많은 이온들 및 Salt 농도 등에 영향을 받지 않기 때문에 나노 와이어를 이용한 FET (field-effect transistor)형 바이오센서에 비해 많은 장점을 가지고 있다. 일반적으로 광 바이오센서는 형광물질, 인광물질, 발색물질, 방사선 물질 등의 발광물질을 인식물질에 표지하여 인식물질과 분석물질과의 반응유무를 표지된 발광물질의 광학 신호를 감지하여 분석물질을 검출해내는 표지식 광 바이오센서 기술이 상용화되고 있다. 그러나 이러한 분석 방법은 민감도는 우수하지만 분석 시간이 매우 느리고, 고가의 분석 장비 및 복잡한 제조 공정 등의 단점들을 가지고 있다. 이러한 단점들을 극복하기 위하여 생화학 반응 유무를 표지물질 없이 광학적 방식으로 직접 측정할 수 있는 비표지식 광 바이오센서 기술이 최근 들어 많이 연구되고 있다. 본 논문에서는 광파장 이하의 주기를 가진 주기적 공진 격자 표면에서 일어나는 바이오 항원-항체 반응에 대한 공진 반사 파장을 측정하여 생체성분 내에 존재하는 바이오 항원을 고감도로 검출할 수 있는 비표지식 공진반사광 바이오센서 기술을 소개하고자 한다. 공진반사광 바이오센서를 이용하여 human serum내에 존재하는 심근경색 마커인 troponin I (cTnI), creatine kinase MB (CK-MB), myoglobin (MYO)을 0.1 ng/mL 이하의 농도까지 고감도로 측정할 수 있었다.

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스파르가눔 항원단백질에 대한 스파르가눔증 환자 혈청의 반응 양상 (Antigenic protein fractions reacting with sera of sparganosis patients)

  • 최성호;강신영;공윤;조승열
    • Parasites, Hosts and Diseases
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    • 제26권3호
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    • pp.163-168
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    • 1988
  • 스파르가눔증을 혈청학적으로 진단하기 위하여 효소면역측정법을 실시할 경우, 그 민감도와 특이도가 높다고 이미 보고되었다. 실제로 조직기생충 감염이 의심되는 환자에 대하여 특이 IgG항체가를 일상적으로 검사하면 중추신경계 환자중에서 뇌스파르가눔증은 드물지 않게 발견할 수 있다. 그러나 혈청학적 진단에 이용되는 스파르가눔 조항원(조항원)은 조충증(조충증), 유구낭미충증이나 포충증 환자의 혈청과 비특이적인 교차반응을 일으키는 경우가 있다. 이러한 교차반응의 문제를 해결하려면 우선 스파르가눔 항원의 구성 단백질이 환차혈청과 반응하는 양상을 알아야 할 필요가 있다. 이 연구에서는 외과적으로 스파르가눔증을 확인한 환자 15명에서 얻은 혈청이 스파가눔의 생리식염수 추출액의 항원단백질중 어느 분획과 반응하는지 검토하였다. 그리고 뇌유구낭미충증 환자 24명(그중 8명은 효소면역측정법으로 교차반응이 있었음)의 혈청과 교차반응을 일으키는 단백질 분획을 관찰하였다. 스파르가눔충체의 생리식염수 추출액을 10∼15% linear gradient gel에서 SDS-폴리아크릴아마이드 전기영동을 실시하여 단백질대 30개를 구별할 수 있었다. 분리한 단백질(대)를 nitrocellulose 종이에 옮긴후 스파르가눔증 환자 혈청 및 conjugate와 차례로 반응시키고 발색반응을 일으킨 결과 (효소면역 전기영동이적법, immunoblot), 스파르가눔 항원단백질중 29kDa 및 36kDa가 가장 많이 또 가장 진하게 반응한 것이어서 민감하고 항원성이 높은 단백질 분획이라고 판단하였다. 그리고 위의 단백질 이외에도 158kDa, 130kDa, 107kDa, 78kDa, 72kDa, 52kDa, 23kDa, 21kDa, 15kDa 및 6kDa 등에도 반응이 있었다. 유구낭충증 환자 24명의 혈청중 스파르가눔 항원에 혈청학적 교차반응이 있었던 혈청은 36kDa 및 29kDa 단백질에 반응하고 있어 이 단백질이 스파르가눔의 종 특이(종특이)단백질 항원은 아닌 것으로 판단되나 그 성질에 대해서는 앞으로 더 추구할 가치가 있다고 생각한다.

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치수 및 치근단 병소에서 기질금속단백분해효소(matrix metalloproteinase) -1, -2, -3의 분포에 관한 연구 (Detection of Matrix Metanoproteinase -1, -2, -3 in pulpal and periapical pathosis)

  • Su-Jung Shin;Seung-Ho Baek;Sung-Sam Lim
    • Restorative Dentistry and Endodontics
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    • 제26권3호
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    • pp.191-199
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    • 2001
  • 목적 - 기질금속단백분해효소(matrix metalloproteinase)는 조직의 염증 및 치유과정에서 숙주세포에서 생성, 분비되어 세포외기질(extracellular matrix)의 분해에 작용한다. 다양한 염증반응에 기질금속단백분해효소가 중요한 역할을 하는것으로 보고되고 있으나 치수 및 치근단 질환에서의 그 역할은 거의 알려져 있지 않은 상태이다. 본 연구에서는 염증이 있는 사람의 치수 및 치근단 조직을 채취하여 Enzymeimmunoassay 및 면역조직화학적 검색을 통해 제1형, 2형, 3형 기질금속단백분해효소의 수준 및 그 분포를 측정하여 치수 및 치근단 병소에서 이 효소의 작용을 알아보는 것을 목적으로 한다. 방법 - 연구재료는 근관치료를 위해 서울대학교 병원 치과 진료부 보존과에 내원한 환자를 대상으로 34개의 치아에서 통상의 근관치료 중 발수한 치수조직과 치근단 수술중 얻은 치근단 병소(n=10)를 이용하였다. 치수는 발수 전에 임상진단을 통해 급성 치수염(n=12), 만성 치수염(n=12), 정상 치수(n=10)로 구분하고 정상치수로 진단된 것을 대조군으로 설정하였다. 채취된 표본은 둘로 나누어 절반은 30분 이내에 5$\mu\textrm{m}$ 두께로 동결절단을 시행하여 조직표본을 제작하였고 deep freezer에 보관하였다가 헤마톡실린-에오신 염색 및 면역조직화학적 검색을 시행하였다. 나머지 조직은 ELISA를 위해 액체 질소에 보관하였다. ELISA를 시행하기전 표본의 단백질 정량을 시행하여 모든 표본의 단백질 양을 50mg/$\mu\textrm{l}$로 일치시키고 Amersham사의 ELISA kit를 사용하여 제1형, 2형, 3형의 기질금속단백분해효소의 양을 측정하였으며 그 결과를 Mann-Whitney U test를 사용하여 각 군간의 통계학적 유의성을 검증하였다. 결과 1. ELISA의 결과 제1형 기질금속단백분해효소의 농도는 모든 실험군에서 대조군보다 유의성있게 높게 나타났다.(p<.05). 또한 급성치수염군의 제1형 기질금속단백분해효소의 농도가 다른 실험군보다 유의성있게 높았다(p<.05). 2. 제2형 기질금속단백분해효소의 경우 급성치수염군과 대조군에서만 유의성있는 차이를 보였다(p<.05). 3. 제3형 기질금속단백분해효소의 경우 급성치수염군에서 대조군이나 만성치수염군보다 유의성 있는 높은 수치를 보였다(p<.05). 4. 면역조직화학검색 결과 염증성 치수에 존재하는 급성 및 만성염증세포 주위로 기질금속단백분해효소에 대한 면역 반응이 존재하였으며 주로 제1형과 제3형 기질금속단백분해효소의 경우 대식세포 및 림파구 주위로 강한 발색제의 침윤양상이 관찰되었다. 5. 치근단병소의 면역조직화학적 검색 결과 만성염증 세포 주변으로 미약한 발색제의 침윤양상이 관찰되었다.

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Streptozotocin에 의한 lipid peroxidation 측정시 TBA법의 적합성에 관한 연구 (Drect Interaction of Streptozotocin with TBA (thiobarbituric acid) in Lipid Peroxidation Analysis)

  • 정진호;호지숙;문창규
    • 한국식품위생안전성학회지
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    • 제5권4호
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    • pp.237-242
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    • 1990
  • Streptozotocin에 의한 적혈구의 막 lipid peroxidation 측정시 TBA법의 적합성에 관하여 검토하기 위하여 Streptozotocin와 TBA의 직접반응 여부를 연구하였다. 여러 농도의 Streptozotocin 와 20% RBC suspension을 함께 배양한 후 lipid peroxidation을 TBA법으로 측정했을 때, Streptozotocin의 농도에 따라 흡광도가 증가하다가 100mM부터는 plateau를 이루었다. 그런데 적혈구를 제거한 대조실험에서도 발색단이 관찰되었다. 시험관에서 5mM의 Streptozotocin와 1% TBA를 산성조건에서 가열 직접 반응시킨 후 spectrum을 찍은 결과 TBA법 측정파장인 532nm에서 새로운 peak가 생겼다. 또 이 파장에서의 흡광도는 Streptozotocin 농도에 따라 증가하다가 25mM부터는 plateau가 되었다. 이러한 결과들은 적혈구와 Streptozotocin를 함께 배양하여 lipid peroxidation을 측정할 때, cell 내로 유입된 Streptozotocin 가 TBA와 직접반응을 할 수 있음을 제시한다. 그리고 다른 측정법인 lipid conjugation은 233nm에서의 흡수를 측정하는데. Streptozotocin 자체가 200-300nm에서 흡수를 나타내므로 이 방법으로도 lipid peroxidation 측정을 방해할 수 있다. 따라서 Streptozotocin에 의한 적혈구막의 lipid peroxidation은 TBA method 및 lipid conjugation 방법으로 측정하기는 부적합한 것으로 사료된다.

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ELISA법에 의한 zearalenone 생성균주의 검색 (Screening of zearalenone-producing strains by ELISA method)

  • 김성영;정선희;정덕화
    • Applied Biological Chemistry
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    • 제36권1호
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    • pp.7-10
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    • 1993
  • ELISA법을 zearalenone 생성균주 검색에 응용하였다. 먼저 zearalenone에 대한 항체를 500배 희석한 후 microtiter well에 $125\;{\mu}l$씩 주입하여 $40^{\circ}C$에서 overnight시켜 coating하고, 시료용액과 enzyme을 $37^{\circ}C$에서 30분간 반응시켰다. 배양후 washing buffer로 6회 세척한 다음 plate에 2,2'-azino-di-3-ethyl-benzthiazoline sulfonic acid(ABTS) 용액을 $100\;{\mu}l$씩 첨가하여 15분간 발색시킨 다음 반응 정지액 $100\;{\mu}l$씩을 가해 반응을 정지시키고 ELISA Reader로서 흡광도(410 nm)를 측정하였다. 그 결과 zearalenone 생성이 확인된 19 균주 중 분리균 R-5, C-46 및 S-134가 50 ng/ml 이상의 zearalenone을 생성하였다.

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삭시톡신 분석을 위한 항체의 제조 및 항-삭시톡신 항혈청의 민감도 분석 (Production of antibodies for saxitoxin analysis and sensitivity analysis of anti-saxitoxin antiserum)

  • 장만;이건섭;모상현;신경순;오정균;이택견
    • 한국산학기술학회논문지
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    • 제13권12호
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    • pp.6208-6214
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    • 2012
  • 해양미세조류 유래 독성물질에 대한 이해와 활용에 있어서 가장 중요하지만 간과되고 있는 부분은 독성물질을 검출할 수 있는 빠르고, 쉽고 경제적인 검출기술을 개발하는 것이다. 이 논문에서 우리는 삭시톡신(STX)에 대한 항체를 생산하였다. 헤모시아닌(mariculture keyhole limpet hemocyanin, mcKLH)과 오브알부민(ovalbumin, OVA)을 운반단백질로 사용하였다. 면역반응을 위해서 mcKLH-STX 결합체를 BALB/c 쥐에 복강주사하였다. 채혈 후 항-STX 항혈청을 분리하였다. 항혈청의 역가분석을 위하여 유리 STX와 OVA-STX로 코팅된 microtiter plate를 이용하여 간접 ELISA 실시하였다. 발색반응을 위한 이차항체로는 goat anti-mouse IgG-phosphatase conjugate가 사용되었다. 항-STX 항혈청은 OVA-STX와 유리 STX에 특이적으로 반응하였다. 항-STX 항혈청의 민감도는 매우 높았으며, STX를 위한 검출한계는 약 64.9 ng/kg이었다.

수열법에 의한 $(Li,Al)MnO_{2}(OH)_{2}$:Co 화합물의 합성 (Hydrothermal synthesis of $(Li,Al)MnO_2(OH)_2$:Co compound)

  • 최종건;황완인;김판채
    • 한국결정성장학회지
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    • 제11권4호
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    • pp.154-159
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    • 2001
  • (Li,Al)$MnO_2(OH)_2$:Co 화합물의 합성르 수열법에 의해 행하였다. 출발원료는 $MnO_2$, LiOH.$H_2$O, $Co_3O_4$, $Al(OH)_3$이 사용되었으며, 단일상의 (Li,Al)$MnO_2(OH)_2$:Co 화합물을 얻을 수 있는 최적의 합성조건은 다음과 같았다. 반응온도 : $200^{\circ}C$ 반응시간 ; 3일간, 반응장치 ; 시이소형, 수열용매 ; 3M-KOH, (Li,Al)$MnO_2(OH)_2$:Co 의 원자비 = 1:2.1:2.5~2:0.5~1. 수열합성된 단사의 (Li,Al)$MnO_2(OH)_2$:Co 화합물은 결정성이 우수하였으며, 청색안료로써 천연 오수에 필적하는 발색효과를 나타내었다. 합성된 (Li,Al)$MnO_2(OH)_2$:Co 화합물의 형태는 육각 판싱이였으며, 입자의 크기는 0.5~1 $\mu\textrm{m}$의 미립자이였다.

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