A new bacteriocin producing lactic acid bacteria having antagonistic activity against Lactobacillus plantarum, was isolated from Kimchi. It was identified as Leuconostoc mesenteroides, and designated as Leuconostoc mesenteroides B7. The bacteriocin from Leuconostoc mesenteroides B7 named as bacteriocin B7 was stable in the pH range $2.5{\sim}9.5$. Bacteriocin B7 was active over a wide temperature range from $4^{\circ}C$ to $120^{\circ}C$. It was inactivated by proteinase K, trypsin, ${\alpha}-chymotrypsin$, and protease treatments indicating its proteinous nature. Tricine-SDS-PAGE of the purified bacteriocin B7 showed the presence of a single band, having a molecular mass of about 3,500 dalton. Mixed culture of the producer and the indicator, Lb. plantarum KFRI 464 or Lb. delbruekii KFRI 347, increased production of bacteriocin B7. This result suggested the presence of bacteriocin inducing factor in the indicator strain. The inducing factor was localized in cell debris and intracellular faction of the indicator cell, Lb. plantarum KFRI 464. Treatment of the inducing factor with proteinase K destroyed inducing activity. This result strongly suggested that the inducing factor is a protein.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.41
no.5
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pp.721-726
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2012
Lactic acid bacteria (LAB) are able to secrete antimicrobial peptides called bacteriocins, which inhibit other bacteria such as pathogenic microorganisms. Therefore, bacteriocin-producing starters can be used as natural biopreservatives for various foods. The objective of this study was to screen and characterize bacteriocin-producing LAB from Kimchi and to investigate their applicability as a starter in Kimchi fermentation. To screen bacteriocin-producing LAB, gram-positive and gram-negative bacteria were used as indicators. To measure the antimicrobial activities of isolates, agar well diffusion assay method was used. According to the results, bacteriocin produced by $Lb.$$sakei$ B16 showed antimicrobial activity against $Listeria$$monocytogenes$ ATCC 19115, $Escherichia$$coli$ KCTC 1467, and$Lactobacillus$$plantarum$ KTCT 3104. Furthermore, bacteriocin was very stable after treatment with high temperature and high and low pH, but its effects were inhibited by treatment with proteolytic enzymes such as trypsin, proteinase K, and ${\alpha}$-chymotrypsin, revealing their bacteriocin-like protein- based structure. These results suggest that $Lb.$$sakei$ B16 and its bacteriocin are good candidates as a functional probiotic and natural biopreservative, respectively, in fermented foods.
A lactic acid bacteria which showed antimicrobial activity was isolated from dairy products and identified as Lactobacillus sp. according to the morphological, physiological and biochemical properties, which was named Lactobacillus sp. SH 7311. The bacteriocin of Lactobacillus sp. GM 7311 showed a broad range of inhibitory spectrum against some gram positive and negative bacteria. Especially, Proteus mirabilis was highly sensitive to bacteriocin and used as indicator strain for further investigation. The optimal condition for the production of bacteriocin was showed on MRS broth at $37^{\circ}C$ and pM 6.0. Bacteriocin production of this strain cultured under optimal condition was increased late logarithmic phase to early stationary phase. This bacteriocin was fully active at the pH range $2.0\~5.0$, also was stable at $100^{\circ}C$ for 60 min. at pH 5.0, But about $40\%$ of bacteriocin activity was diminished by the treatment of acetone, ethanol, iso-butanol and ethyl ether during 2 hours at $4^{\circ}C$.
The alone and combined effects of bacteriocin produced from Enterococcus faecalis MJ-213 and potassium sorbate against the food-borne pathogenic bacteria were studied. Bacteriocin minimal inhibitory concentration (MIC) values for Staphylococcus aureus ATCC 6538 and Salmonella enteritidis ATCC 13076 were 50 and 100 ${\mu}g$/ml, respectively. Bacteriocin (100 ${\mu}g$/ml) alone was active against S. aureus and S. enteritidis, but it was lower in antimicrobial effectiveness than the combination of bacteriocin (100 ${\mu}g$/ml) with potassium sorbate (100 ${\mu}g$/ml), which reduced initial counts (6 log cycle) of S. aureus and S. enteritidis by 1 and 3 log cycle, respectively. The bactericidal activity of bacteriocin of E. faecalis MJ-213 heated at $100^{\circ}C$ for 30 min or $121^{\circ}C$ for 15 min was markedly decreased as compared with the control. Moreover, the activity of bacteriocin was completely abolished by pepsin or protease II, but not affected by ${\alpha}$-amylase or lipase. The activity of bacteriocin adjusted to pH 6.0-8.0 showed almost the same inhibition ratio compared with the bacteriocin unadjusted pH, and though the inhibition ratio against pathogenic bacteria was reduced than the control, the bacteriocin was stable at pH 4.0 or 10.0, relatively. Furthermore, the combined treatment of bacteriocin and potassium sorbate than the alone treatment of bacteriocin significantly decreased (p<0.05) the viable cell counts of S. aureus or S. enteritidis inoculated on grind beef during storage at $4^{\circ}C$.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.31
no.3
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pp.399-404
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2002
The fermented fruit and vegetable mixed broth was prepared by using bacteriocin-producing lactic acid bacteria to evaluate the possibility of developing isotonic beverage with anticariogenic activity. Optimum conditions were also established to produce bacteriocin by a mixed culture system consisting of Lc. lactis and Leu. mesenteroides in a fruit and vegetable mixture. Production of bacteriocin was not observed when both strains were simultaneously innoculated, but pH adjustment of the broth fermented by Leu. mesenteroides to nearneutral pH stimulated the production of bacteriocin by Lc. lactis. The concentration of sodium of the fermented broth was higher than those of commercial products. Color change of the fermented broth was not observed during storage. The fermented broth showed strong inhibitory effect against Streptococcus mutans which is an oral inhabitant with a cariogenic activity. Bacteriocin activity in the fermented broth was retained very stable for 4 weeks at 4$\^{C}$. The results indicated that bacteriocin-producing lactic acid bacteria can be used for the preparation of a Korean style thirst-quenching beverage containing bacteriocin.
Enterococcus faecium MJ5-14 isolated from Meju produced a bacteriocin, which was antagonistic towards Listeria monocytogenes. Bacteriocin activity reached a maximum (640 BU/mL) after incubation for 12 hr, the early stationary phase, then dropped after the late stationary phase. Bacterocin of E. faecium MJ5-14 was extremely active against a wide range of Listeria species, including L. monocytogenes with sensitives up to about 640 BU/mL. In case of mixed culture with 105 CFU/mL L. monocytogenes and 105 CFU/mL E. faecium MJ5-14, the inhibitory effect against L. monocytogenes at $37^{\circ}C$ was higher than at $25^{\circ}C$. The mode of action was identified as bactericidal, because the addition of 100 BU/mL this bacteriocin to cell suspensions of L. monocytogenes KCTC 3569, led to a marked decrease in the number of viable cells. Further, when held in contact with bacteriocin of E. faecium MJ15-14 for 12 hr, L. monocytogenes KCTC 3569 displayed the disruption of the cells and an important efflux of the intracellular material.
Lactobacillus brevis DK25 isolated from Dongchimi was identified by physiological and biochemical tests and 16S rDNA sequence analysis. Bacteriocin of L. brevis DK25 exhibits inhibitory activity against Enterococcus faecalis and Listeria monocytogenes when using agar well diffusion method. Maximal production of bacteriocin was reached in the beginning of the stationary phase, and inhibitory activity declined after the late stationary phase. This result suggested that bacteriocin was produced in a growth-associated manner. Complete inactivation of bacteriocin activity was observed after treatment with protease, but the activity was stable between pH 4-9 and heat resistant (30 min at $100^{\circ}C$). Bacteriocin showed a concentration-dependent antimicrobial activity against L. monocytogenes KCTC 3569. Moreover, the application experiment showed that combination of bacteriocin (320 AU/ml) with potassium benzoate (0.05%) could significantly reduce the counts of L. monocytogenes KCTC 3569 in mayonnaise during storage at 4 or $25^{\circ}C$ for 10 days. Thus, bacteriocin from L. brevis DK25 may be used for hurdle technology by combination with potassium benzoate in order to increase pathogenic bacteria inactivation in food processing and food safety control.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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