Placenta has been shown to be a site of expression of several of the monoamine membrane uptake transporters. However, the correlation between the expressions of norepinephrine transporter (NET) and placental development including gynecological diseases is still unknown. To investigate the expression and functions of NET in placenta, we conducted to compare NET expression in normal and preeclamptic placenta and analyzed the function of NET in HTR8-SV/neo trophoblast cells after NET gene transfection. The expression of NET was analyzed in placental tissues from the following groups of patients (none underwent labor): 1) term normal placenta (n=15); 2) term with preeclamptic placeneta (n=15); and 3) pre-term with preeclamptic placenta (n=11) using semi-quantitative RT-PCR, immunohistochemistry, and Western blot. In order to evaluate the function of NET, NET gene plasmid and NET gene-specific siRNA were trnasfected into HTR-8/SVneo trophoblast cells for 24 hours. NET had low expression in the pre-eclamptic placenta compare with normal placenta but no difference in western blot data. NET was expressed in the trophoblasts, and the up-regulation of NET gene stimulated the invasion of HTR-8/SVneo trophoblast cells by 2.5 fold (p<0.05), whereas the NET-siRNA treatment reduced invasion rates. Also, we observed that the expression of NET induces to expression and activity of MMP-9 in HTR-8/SVneo trophoblast cells in zymography. The results suggest that the expression of NET were reduced in pre-eclampsia and should be inhibited invasion activity of trophoblasts. Therefore, these findings provide useful guidelines for the mechanisms of trophoblast invasion as well as for the basic understanding of gynecological diseases including pre-eclampsia.
Journal of the Korean Applied Science and Technology
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v.30
no.1
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pp.127-138
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2013
This study investigated the effects of feeding the broilers that are exposed to extreme heat stress (EHS, $33{\pm}2^{\circ}C$) with extreme heat stress diet (EHSD) containing adequate amount of soy oil and other nutrients on their growth performance. 500 broiler chickens (Ross 308) were randomized into five dietary treatment groups according to a randomized block design on the day they were hatched. Each group was further divided into four repeat pens with each repeat pen comprising 25 chickens. The five dietary treatment groups were: T1 (Normal ambient condition + basal diet (BD), T2 (EHS +BCD), T3 (EHS + extreme heat stress diet (EHSD) prepared from BD with tallow replaced with soy oil and containing molasses 2%), T4 (EHS + EHSD prepared from BD with tallow replaced with soy oil and containing molasses 2% and methionine and lysine of 1.5 times greater quantities than in BD), and T5 (EHS + EHSD prepared from BD with tallow replaced with soy oil and containing molasses 2%, methionine and lysine of 1.5 times greater quantities than in BD, and vitamin C 200 ppm) with inverse lighting. The body weight gain of the broilers increased significantly in T4 and T5 as compared with that in T1 and T2. Weights of the lymphoid organ, bursa of Fabricius, thymus, and spleen were similar between all groups. Serum concentrations of IgG, IgG and IgM were higher in T4 and T5 than inT1 and T2, but the corticosterone concentration decreased significantly in them. In T4 and T5, Lactobacillus in the cecum increased, but Escherichia, coliform, and total aerobic bacteria decreased rather significantly, compared with those in T1 and T2. Contents of acetic acid, propionic acid and total SCFA were significantly higher in T4 and T5 than in T1 and T2.
Journal of the Korea Academia-Industrial cooperation Society
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v.18
no.12
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pp.575-580
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2017
This study analyzed the effects of RGG box of hnRNP A1 on its subcellular localization and stabilization of hnRNP A1 over a three year period from October 2014. First, a 6R/K mutation in RGG box was generated, and pcDNA1-HA-hnRNP A1(6R/K) was constructed. The subcellular localization of hnRNP A1(6R/K) from the HeLa cells transfected with this plasmid DNA was analyzed by immunofluorescence microscopy. HA-hnRNP A1(6R/K) was found to exhibit nuclear and cytoplasmic fluorescence. The stability of hnRNP A1(6R/K) was checked by Western blot analysis using the expressed protein from the HeLa cells transfected with the pcDNA1-HA-hnRNP A1(6R/K). The results show that HA-hnRNP A1(6R/K) has a smaller size. These confirm that HA-hnRNP A1(6R/K) is localized both in the nuclear and cytoplasm, not because 6R/K mutation affects the nuclear localization of hnRNP A1, but because 6R/K mutation causes hnRNP A1(6R/K) to cleave at the mutation or near the mutation site. The cleaved protein fragment, which lacks the M9 domain (i.e. nuclear localization signal of hnRNP A1), did not exhibit nuclear fluorescence. This suggests that the arginines of RGG box in hnRNP A1 play an important role in stabilizing hnRNP A1. An analysis of the RNA-binding ability of hnRNP A1(6R/K) expressed and purified from bacteria will be a subsequent research project.
Probiotic microorganisms are thought to provide health benefits when consumed. In 2001, the World Health Organization defined probiotics as "live microorganisms which confer a health benefit on the host, when administered in adequate amounts." Three methods for screening potential probiotics have currently widely available. (1) In vitro assays of potential probiotics are preferred because of their simplicity and low cost. (2) The use of in vivo approaches for exploring various potential probiotics reflects the enormous diversity in biological models with various complex mechanisms. (3) Potential probiotics have been analyzed using several genetic and omics technologies to identify gene expression or protein production patterns under various conditions. However, there is no ideal procedure for selecting potential probiotics than testing cadidate strains on the target population. Hence, in this review, we provide an overview of the different methodologies used to identify new probiotic strains. Furthermore, we describe futre perspectives for the use of in vitro, in vivo and omics in probiotic research.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.45
no.11
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pp.1533-1543
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2016
The anti-stress effects of Punica granatum L. (family Lythraceae, PG) on $H_2O_2$/corticosterone (CORT)-induced stress in cells and sleep-deprived rats were investigated. The PG extract showed neuroprotective effects in SH-SY5Y cells against $H_2O_2$/CORT-induced stress. Sleep deprivation led to behavioral, hormonal, and biochemical alterations in the animal model. The effects of P. granatum on physiological, behavioral, and biochemical parameters aggravated by sleep deprivation were investigated. Sleep deprivation impaired physiological (survival, body weight, and drowsiness scores) and behavioral (rotarod, passive avoidance, hot hyperalgesia, and Y maze) parameters as well as biochemical factors (cortisol, serotonin, dopamine, testosterone, and growth factor I contents in serum). These parameters were significantly recovered by PG extract in a concentration-dependent manner. The PG extract also enhanced catalase, superoxide dismutase, and non-enzymatic antioxidative activities such as glutathione compared to sleep-deprived rats. On the basis of these results, our findings suggest that Punica granatum prevents impairment of body functions induced by sleep deprivation and related oxidative damage.
Yoo, Seul Ki;Kim, Jong Min;Park, Seon Kyeong;Kang, Jin Yong;Han, Hye Ju;Park, Hyo Won;Kim, Chul-Woo;Lee, Uk;Heo, Ho Jin
Korean Journal of Food Science and Technology
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v.51
no.4
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pp.379-392
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2019
The current study investigated the effect of Gabjubaekmok (Diospyros kaki) ethanolic extract (GEE) on $H_2O_2$-induced human neuroblastoma MC-IXC cells and amyloid beta $(A{\beta})_{1-42}$-induced ICR (Institute of Cancer Research) mice. GEE showed significant antioxidant activity that was evaluated based on ABTS, DPPH scavenging activity, and inhibition of malondialdehyde (MDA) and acetylcholinesterase activity. Further, GEE inhibited ROS production and increased cell viability in $H_2O_2$-induced MC-IXC cells. Administration of GEE ameliorated the cognitive dysfunction on $A{\beta}$-induced ICR mice as evaluated using Y-maze, passive avoidance, and Morris water maze tests. Results of ex vivo test using brain tissues showed that, GEE protected the cholinergic system and mitochondrial functions by increasing the levels of antioxidants such as ROS, mitochondrial membrane potential (MMP), and adenosine triphosphate (ATP) against $A{\beta}$-induced cognitive dysfunction. Moreover, GEE decreasd the expression levels of apoptosis-related proteins such as $TNF-{\alpha}$, p-JNK, p-tau, BAX and caspase 3. While, expression levels of p-Akt and $p-GSK3{\beta}$ increased than $A{\beta}$ group. Finally, gallic acid was identified as the main compound of GEE using high performance liquid chromatography.
Lim, Chun Kyu;Sung, Ji Hye;Choi, Hye Won;Cho, Jae Won;Shin, Mi Ra;Jun, Jin Hyun
Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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v.33
no.1
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pp.25-33
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2006
Objective: The aim of this study was to investigate whether embryonic stem (ES) cells can be established from isolated blastomeres of mouse embryos. Methods: Blastomeres were separated from mouse (C57Bl/6J) 2- or 4-cell embryos. Isolated blastomeres or whole 4-cell embryos were co-cultured with mitosis-arrested STO feeder cells in DMEM supplemented with recombinant murine leukemia inhibitory factor and ES-qualified fetal bovine serum. After the tentative ES cell lines were maintained from isolated blastomeres or whole embryos, some of them were frozen and the others were sub-cultured continually. Characteristics of tentative ES cell lines as were evaluated for specific genes expressions with immunocytochemistry and RT-PCR. Results: One ES cell line (3.0%) was established from isolated blastomere of 2-cell embryo and one cell line (4.0%) from isolated two blastomeres of 4-cell embryo. And five cell lines (16.7%) were established from whole 4-cell embryos. Both cell lines from isolated blastomere and whole embryo expressed mouse ES cell specific markers such as SSEA-1, Oct-4 and alkaline phosphatase. Marker genes of three germ layers were expressed from embryoid bodies of both cell lines. Conclusion: This study suggests that mouse ES cells could be established from isolated blastomeres, although the efficiency is lower than whole embryos. This animal model could be applied to establishment of autologous human ES cells from biopsied blastomeres of preimplantation embryos in human IVF-ET program.
One of the critical problems to preserve books and documents in libraries and archives is the deterioration. Some of previous results showed that the major cause of paper deterioration was the acid-catalyzed hydrolysis of the cellulose in paper fibres and aging rate of acidic paper was faster than that of alkaline paper. Therefore, It is necessary to remove the acid in the paper for reducing the rate of paper deterioration. It has been reported to extend the useful life of acidic paper by three to five times. Recently, It has been recognized the need for an effective method of deacidifying large quantities of books and document. However, in the previous many reports little attention was paid to the effect of paper additives. In this paper, We carried out experiment about the effect of additives on paper aging and the effect of deacidification by the gaseous ethanolamines (monoehtanolamine, diethanolamine, triehtanolamine). In result, it was found that the strength of aging was in the order of the alum+rosin>alum >AKD> control and the rate of deacidification was in the order of the monoethanolamine>diethanolamine>triethanolamine. The treatment with the gaseous ethanolamines caused decreasing of brightness and dropping of fold endurances. However, deacidification by combination treatment of the various gaseous ehtnaolamines prevented from decreasing of brightness and dropping of folding endurances.
This study aimed to find out suitable culture conditions for the differentiation of human amniotic membrane-derived stem cells(HAM) into hepatocyte-like cells. Almost homogenous population of fibroblast-like cells was successfully isolated from the amniotic membrane. In comparison to the non-coated plates and in the absence of insulin/transferrin/selenium(ITS), HAM cultured on the fibronectin-coated plates and in the presence of ITS showed the more intense immunocytochemical staining against the albumin. Addition of both fibroblast growth factor(FGF)-1 and -2 to the differentiation medium gave stronger staining compared to the treatment with FGF-1 or -2 alone. Periodic acid Schiff's base staining of glycogen and morphological turnover of fibroblast-like appearance of HAM into round shape matched the results of immunocytochemical studies. When the efficiency of two-step culture method was examined on the differentiation of HAM into hepatocyte-like cells, all of the results of immunocytochemical staining, periodic acid Schiff's staining and morphological change exhibited effective hepatic differentiation of HAM compared to the continuous culture method. Immunoblot analyses of HAM- conditioned media against the albumin showed that the culture of HAM in the presence of both ITS and fibronectin always gave a stronger staining intensity than those in the absence of them, and that the addition of ether mixture of FGF-4 and either FGF-2 or transforming growth $factor(TGF)-{\alpha}$ to the culture medium significantly enhanced the albumin secretion by HAM. Based on these observations, it is suggested that HAM could differentiate into hepatocyte-like cells under a culture condition consisting of fibronectin and ITS, and addition of FGF-4 with either one of FGF-2 or $TGF-{\alpha}$ could enhance the hepatic differentiation of HAM.
Kang, Ho Bum;Ryoo, Seung Heui;Lee, Sang Hoon;Jeon, Byung Soon;Sang, Byung Chan
Korean Journal of Agricultural Science
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v.25
no.1
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pp.79-88
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1998
This study was performed in order to apply to effective breeding of Korean native cattle on the molecular genetic level obtained from PCR and nucleotide sequencing analysis of BoLA DRB3 exon2 that has important roles in host immune defence. Genomic DNA used in this study was prepared from the blood of Korean native cattle in Korean Native Cattle Improvement Center of National Livestock Cooperation. The results obtained from this study are summarized as follows: 1. Genomic DNA extracted from the blood of Korean native cattle was subjected to electrophoresis on 1.5% agarose gel. Major band was bigger than 12.2kb, indicating that genomic DNA was well prepared for PCR. Amplified products of 284bp fragments was obtained the amplification of BoLA DRB3 exon2 gene by PCR. 2. Cloning of BoLA DRB3 exon2 of Korean native cattle with pCR2.1 vector was conformed by 300bp fragment from recombinent plasmid that restricted with enzyme digestion of EcoRI. 3. Homology of BoLA DRB3 exon2 alleles of parent was 82.0% between sire's alleles and 90.1% between dam's alleles. 4. In pedigree analysis using BoLA DRB3 exon2 gene, sequencing result of BoLA DRB3 exon2 genes showed inheritance by Mendelian mode through the parents to their offspring. 5. Taking together those experimental results, pedigree was confirmed on the basis of sequencing for the alleles of parents and offspring. This knowledge by the molecular biological approach could be served for the improvement of Korean native cattle.
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