Comparing hibernation with active periods, the regional distribution and relative frequencies of gastrointestinal endocrine cells were studied immunohist-ochemically in the GITs of the Rana dybowskii. Six kinds of endocrine cells were identified in this study. In this study, several novel findings were emerged: in hibernation period, the perdominant presence of immunoreactive cells; the widely distributional regions of glucagon-, Gas/CCK- and BPP-immunoreactive cells; the intense reaction of immunostaining against the antiserum; and the existence of 5-HT- and somatostat-in-immunoreactive cells in upper regions of the fundic glands. These results suggest that the gastro-entero-endocrine cells in hibernation period synthesize continuously its gut hormones and accumulate in their cytoplasms.
세포성장 조절물질 탐색기술 개발 분야의 연구는 학문적으로는 세포성장 조절물질의 작용기작 규명에 의한 유전병의 병리기전, 암의 병리학적인 원인규명과 면역현상의 이해를 통한 생명과학의 기초연구 증진을 이룩할 것이며 세포성장 조절인자의 유전자를 분리하여 유전자 치료법(gene therapy)에 이용하거나 이들 유전자를 발현벡타를 이용해 과발현시켜 난치성 유전병의 치료에 이용하는 등의 임상실험에 활용할 수 있다. 산업적으로는 이들 연구결과를 활용한 신규 항암제 및 면역 조절제 개발기술의 수준 향상에 따른 생물 신의약 개발 분야에서 국제경재력을 제고시키는데 큰 역할을 할 것으로 기대된다.
Proceedings of the Korea Multimedia Society Conference
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1998.10a
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pp.243-247
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1998
전자현미경 영상인 유방암 조직세포의 암 분포 정도를 알기 위해, 조직세포중 암이 퍼진 부분과 그렇지 않은 부분에 대해 정량적 분석과 세포수에 의한 분석을 비교하여 보았다. 유방암 조직세포의 면역조직화함염색에서 암이 있는 세포핵은 갈색으로 나타났고, 그렇지 않은 세포는 푸른색으로 나타났다. 이것은 환자를 진단하고 예지하는데 있어서 중요한 요인으로 작용하지만 지금까지는 의사의 주관적인 생각이 다분히 포함된 판단에 의존할 수 밖에 없었다. 의료영상이미지의 시각적 표현을 위해 RGB칼라를 HLS칼라로 변환하여 사용하였으며, 이것은 시각적으로 좀 더 쉽게 갈색세포핵과 푸픈색 세포핵을 구분하게 해 주었다. 두 세포핵을 분리하기 위해 히스트그램의 임계치와 Box classification의 두 알고리즘의 사용하여 추출하였다. 그리고 추출한 세포핵들에 대해 각각 정량적인 분석과 세포수에 의한 분석을 하였다. 이러한 실험은 시각적 병리정밀검사에 좋은 보조도구로 사용될 수 있을 것이다.
This study was designed to investigated the effects of cadmium(Cd) feeding on the humoral immune responses such as PFC-responses and production of immunoglobulins in BALB/c mice. The results obtained were summarized as follows; 1. Total PFCs of direct IgM antibody response were significantly decreased in all Cd-fed goups, whereas total PFCs of IgG antibody response were slightly increased. 2. In secondary immunization, total HA titers were increased in all Cd groups as compared with control, especially in 100ppmm group and also IgG titers were slightly increased except for 50ppm group. 3. The levels of $IgG_1$ were increased to 5.5% 18.7%, 17.4% and 7.2% in 25, 50, 100 and 200ppm groups as compared with control, respectively. And also the levels of IgE were increased to 5.7%, 7.3%, 8.7% and 0.4% in those of Cd groups, in order. Conclusively, concentrations of $IgG_1$, and IgE were increased in all Cd groups. Based on the results of this study and previous report, it was shown that Cd might affect humoral immune responses by modifying the distribution and function of cells playing in the cellular immune response.
목적 : 쥐의 콜라겐 유도 관절염에 대한 유근피 추출액의 면역 반응 효과 및 그 기전을 살펴보고자 하였다. 방법 : 유근피 추출액의 면역 반응을 관찰하기 위하여 콜라겐 유도 관절염 쥐가 사용되었다. 실험에 쓰인 쥐 뒷다리의 부종 용적은 volume meter로 측정하였고, lymphocyte 증식, 표1, 표2 및 TNF-${\alpha}$ 레벨은 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2, 5-diphenyltetrazolirun bromide(MTT) assay에의해 측정하였다. 활막세포의 cAMP 레벨은 경쟁적 단백 결합검사 (CPBA)를 통하여 측정하였다. 2형 콜라겐에 대한 항체는 효소면역 협착검사법(ELISA)을 반복 사용하여 측정하였다. 결과 : 실험에서 유근피 추출액( 20, 80, 150mg/kg, ig ${\times}$ 7days)의 시술은 면역 반응을 억제하고 콜라겐 유도관절염 쥐의 체중과 면역 기관의 무게를 유지하였다. 콜라겐 유도 관절염 쥐에서 림프구의 증식과 IL-2의 생산은 복막의 대식세포 및 활막세포의 IL-1 , TNF-${\alpha}$와 함께 증가하였고, 유근피 추출액 (20, 80, 150mg/kg, ig ${\times}$ 7days)의 시술은 이러한 변화를 유의성 있게 감소시켰다. 0.5, 2.5, 12.5, 62.5, 125mg/l 농도에서의 유근피 추출액은 활막세포의 cAMP 레벨을 증가시킨데 반해 콜라겐 유도관절염 쥐에서의 시험관 실험결과에서는 감소시켰다. 유근피 추출액은 2형 콜라겐 항체의 농도에 대하여는 효과가 없었다. 결론 : 유근피 추출액은 항염증 작용과 면역조절 작용을 갖고 있고, 활막세포의 G protein-AC-cAMP transmembrane signal transduction 형질 도입 신호에의한 콜라겐 유도관절염 쥐의 치료 효과를 가지고 있는 것으로 여겨진다.
Journal of the Korea Institute of Military Science and Technology
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v.16
no.3
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pp.390-397
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2013
Primary-cultured immune cells are widely used in research to elucidate the mechanism of inflammation including chemotaxis, production of reactive oxygen species, cytokine release and antigen presenting. Mice are one of the species of experimental animals commonly used for such studies. Immune cells can be isolated and cultured from various organs such as bone marrow, peritoneal cavity, lung, spleen. For elaborated experimental studies, immune cells should be elicited with inflammatory substances or proliferated in vitro with special media. This paper details methods of obtaining immune cells from various organs of mice and investigating immune mechanism using isolated immune cells. It contains standard protocols of isolating and culturing immune cells from bone marrow, peritoneal cavity and lymphoid organs. It also covers the methods of investigating immune mechanism such as ELISA, western blotting, confocal microscopy and ELISPOT assay. With the works in this study, we established the standardized isolation and analysis methods of primary-cultured immune cells.
This study was performed to investigate the distribution and differentiation on the immunoreacted cells of the ChAT (choline acetyltransferase) at the Meynert basal nucleus of the forebrains in the growth periods of rat, using the immunohistochemistric method. According to the cell shape and the ratio of long axis vs short axis of cell soma, the ChAT antibody reacted nerve cells in the Meynert basal nucleus of the rats were classified into six types. In the adult rats, the FD (frequency distributions) of round, oval and elongated cells were maximum. The FD of these types were shown to be progressively decreased during the postnatal development. In addition, the FD of elongated nerve cells in were observed in the adult rats respectively. This was thought to be the same phenomenon as those in the round and oval cells . The total mean volume of ChAT antibody reacted cell somata was lowest in the PND (postnatal days) 7 rats and was highest in the PND 21 rats. But, those were decreased to the adult. These results suggest that ChAT antibody reacted nerve cells grow up to PND 21 and then, differentiate into the various types by neurites outgrowing. On the electron micrography, the adult rat forebrain cells were obtained to be well developed ribosomes, polysomes , rough endoplasmic reticula and mitochondria. The immunreactivities were observed in ribosomes, polysomes, rough endoplasmic reticula and outer membrane of mitochondria. Golgi complexes were poorly developed and not showed jmmunreactivity. The ribosomes , polysomes and endoplasmic reticula are considered to be closely related to the inter cellular localization and biosynthesis of the ChAT but not Golgi complex. According to the results in the present study, it is considered that the ChAT-immunoreacted nerve cells in the Meynert basal nucleus of the rat forebrains are differentiated throughout the postnatal development with following processes of changes; 1) the cholinergic nerve cells develop postnatally 2) cell soma volumes gradually increase during the early postnatal days 3) and then, cells differentiate into the various types by projecting the neurites to the appropriate area after PND 21.
Purpose: This study was performed to investigate the effects of immune cell activation and the antitumor effect for the combination of treatment with X-irradiation and E/eutherococcus senticosus Maxim Root (ESMR) on mouse tumor cells. Materials and Methods: ESMR (250g) was extracted with 80% methanol, concentrated under decompression and lyophilized. To determine whether ESMR is able to activate the immune cells or not, the proliferation of splenocytes in vitro and the number of B cells and T cells in splenic lymphocytes in ESMR-pretreated mice were evaluated. X-irradiation was given to the mouse fibrosarcoma tumor cells (FSa II) by 250 kv X-irradiation machine. The cytotoxicity of ESMR was evaluated from its ability to reduce the clonogenecity of FSa II cells. In X-irradiation alone group, each 2, 4, 6 and 8 Gy was given to FSa II cells. In X-irradiation with ESMR group, 0.2 mg/ml of ESMR was exposed to FSa II cells for 1 hour before X-irradiation. Results: The proliferation of cultured mouse splenocytes and thymocytes were enhanced by the addition of ESMR in vitro. The number of B cells and T cells in mouse splenic lymphocytes was significantly increased in ESMR pretreated mice in vivo. In FSa II cells that received a combination of 0.2 mg/ml of ESMR with X-irradiation exposure, the survival fraction with a dose of 2, 4 and 6 Gy was $0.39{\pm}0.005$, $0.22{\pm}0.005$ and $0.06{\pm}0.007$, respectively. For FSa II cells treated with X-irradiation alone, the survival fraction with a dose of 2, 4 and 6 Gy was $0.76{\pm}0.02$, $0.47{\pm}0.008$ and $0.37{\pm}0.01$. The difference in the survival fraction of the mouse FSa II cells treated with and without ESMR was statistically significant (p<0.05). Conclusion: Treatment with ESMR increased cell viability of mouse splenocytes in vitro and especially the subpopulation of B cells and T cells in splenocytes in ESMR-pretreated mice. However, treatment with ESMR did not increase the level of Th and Tc subpopulations in the thymocytes. Treatment with the combination of ESMR and X-irradiation was more cytotoxic to mouse tumor cells than treatment with X-irradiation alone; this finding was statistically significant.
Proceedings of the Korean Aquaculture Society Conference
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2003.10a
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pp.80-81
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2003
양식 생물의 질병 제어는 예방과 치료를 통해 이루어진다. 그러나 항생제의 오ㆍ남용으로 인하여 약제 내성균의 증가와 치료 효과가 감소하고, 나아가 식품안전성 문제로 양식생물의 소비를 위축시켜왔다. 따라서 질병이 발생한 후에 시행하는 화학약품 치료법은 이미 한계에 달하였다. 이에 따라 사전에 질병을 차단하는 예방법인 vaccine이나 질병에 대한 저항능력을 키우는 비특이적 면역 증강물질에 대한 관심이 꾸준히 높아지고 있다. 해조류에는 다량의 lectin이 포함되어 있는데, Lectin은 당에 결합하는 단백질의 총체적인 이름으로, defence molecule로 작용하여 어류가 섭취할 경우 외래 항원으로 인식하여 지속적으로 면역 기능을 활성화시키는 것으로 알려져 있다. 따라서 본 연구는 돌돔사료에 kelf meal을 첨가하여 공급한 후 이들의 성장과 비특이적 면역기구에 미치는 효과를 조사하였다. 실험사료는 상업용 kelf meal을 0%, 2%, 5% 첨가하고, 2반복으로 500L FRP 탱크에서 8주간 사육하였다. 실험어류는 40g 내외의 돌돔을 대상으로 하였고, 사료공급 4주 및 8주에 각 실험구의 돌돔을 대상으로 비특이적 면역기구에 미치는 효과를 조사하였다. 체액성 면역 조사로는 혈청 및 점액 lysozyme 활성과 Escherichia coli에 대한 혈청 내 보체의 살균 능력을 조사하였고, 세포성 면역 조사는 전신 식세포의 NBT 환원 실험과 말초혈액의 식세포 식균능을 측정하였다. 식균능 시험은 Escherichia coli FKC (formalin killed cell)에 대한 식균율 및 식균지수로 나타내었다. 나아가 돌돔 말초혈액의 혈구조성에 미치는 영향을 조사하기 위하여 적혈구 5,000 세포당 임파구, 전구, 호중구의 수를 계수하였다. 8주간의 사육결과 사료계수는 각각 1.20, 1.25, 1.42로 대조구와 2% 첨가구는 큰 차이가 없었으나, 5% 첨가구는 나빠지는 경향을 보였다. 사료섭취량은 kelf meal의 첨가량이 늘어나면서 감소하는 경향이었다. 비특이적인 면역 기구에 대한 자극 효과는 체액성 면역의 지표로 측정한 lysozyme의 활성도는 혈청과 점액 모두에서 대조구보다 실험구에서 활성이 높았고, 혈청 lysozyme 활성은 5% 첨가구에서 가장 높았다. 혈청 내 보체의 살균능은 실험구간 차이가 없었다. 세포성 면역의 지표로 측정한 전신 식세포의 $O_2$ 생성능(NBT 환원능)은 5% 첨가구에서 가장 높았다. 말초 혈액의 식균능은 식균율과 식균지수 모두 실험구에서 높았고, 특히 5% 첨가구에서 가장 높았다. 말초 혈액 혈구조성의 변화는 임파구와 전구의 경우 실험구에서 높았으나 호중구에서는 차이가 없었다. 이상의 결과, 양식 돌돔에 kelf meal을 2% 첨가하는 것이 사료계수에 큰 영향을 미치지 않고, 돌돔의 체액성 및 세포성 면역을 적절히 자극하는 것으로 나타나, 돌돔의 기능성 사료 첨가물로서 이용 효과가 있을 것으로 기대된다.
Alopecia areata (AA) is a common and tissue-specific autoimmune disease of hair follicle resulting in the loss of hair on the scalp and elsewhere on the body. Hair follicles is a unique organ because it has its own immune system and hormonal milieu and has a different immune state at each hair cycle stage. The collapses of anagen-dependent hair follicle immune privilege arise autoimmune attack, inducing ectopic MHC class I expression in the hair follicle epithelium and autoantigen presentation to autoreactive CD8+T cells, which results in AA. Clinical and experimental studies have pointed that psychological stress may also influence the hair follicle immune/hormone systems and contribute to the induction of AA. The key pathogenesis of AA is associated with immune privilege guardians (including ACTH, ${\alpha}-MSH$, and $TGF-{\beta}$), natural killer group 2D-positive (NKG2D+) cells (including NK and CD8+T cells), and stress hormones (including CRH and substance P). Effective treatments for AA are still demanded. One of the future targets of treatment will be the modification of hair follicle immune privilege including stress. Recent studies have reported that JAK inhibitors and immunomodulators used in other autoimmune disease, such as psoriasis, atopic dermatitis, and rheumatoid arthritis, Tregs, platelet-rich plasma therapy, statins, and prostaglandin anaolgues are effective for AA. Here the article reviews the recent understanding in the pathogenesis associated with perifollicular endocrine/immunology and new treatments of AA.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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